| 缺刻缘绿藻溶血磷脂酰乙醇胺酰基转移酶(LPEAT)的基因克隆与特征分析 |
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| 引用本文： | 周志刚,包虹,欧阳珑玲.缺刻缘绿藻溶血磷脂酰乙醇胺酰基转移酶(LPEAT)的基因克隆与特征分析[J].中国水产科学,2018,25(2):251-262. |
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| 作者姓名： | 周志刚 包虹 欧阳珑玲 |
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| 作者单位： | 水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室;上海海洋大学;海洋生物科学国际联合研究中心;上海海洋大学;水产科学国家级实验教学示范中心;上海海洋大学 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31772821，31402274）；国家海洋局可再生能源专项基金项目（SHME2011SW02）；上海高校水产科学高峰学科建设项目. |
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| 摘 要： | 缺刻缘绿藻三酰甘油(TAG)中花生四烯酸(Ar A)占其总脂肪酸含量的68.0%。为了弄清Ar A是如何被优先地用于合成TAG,鉴于Lands循环是通过改变膜脂的脂肪酸组成进而影响TAG的脂肪酸组成,本研究选择在Lands循环中起关键作用的溶血磷脂酰乙醇胺酰基转移酶(LPEAT)作为突破口。运用反转录PCR与3′-及5′-c DNA末端快速扩增技术,自缺刻缘绿藻(Myrmecia incisa Reisigl)中克隆到MiLPEAT;它的c DNA序列全长1303 bp,其中,5′-非翻译区(UTR)长129 bp,3′-UTR长193 bp,开放阅读框长981 bp,编码326个氨基酸残基;以缺刻缘绿藻基因组DNA为模板扩增得到该基因长为1871 bp的DNA序列;这两序列的比对结果显示,MiLPEAT含有6个内含子,将其开放阅读框(ORF)分割成7个外显子。通过多序列比对及生物信息学分析,发现MiLPEAT存在一个磷酸酰基转移酶结构域Pls C,并含有LPEAT家族所具有的NH(x)4D、FPEGT等4个特征性模体;Wolfpsort等在线预测结果以及MiLPEAT羧基端存在的双赖氨酸模体"KKxx",暗示它可能位于内质网并参与分泌途径。基于不同植物LPEAT的氨基酸序列所构建的邻接聚类图表明,MiLPEAT因与2型LPEAT有不同的序列特征而形成不同的分支,但却与1型LPEAT聚类在一起,推测它们的功能可能更近似。通过荧光定量PCR检测,发现MiLPEAT的基因转录量在氮饥饿8 h时显著(P0.05)增加;与其变化相应的溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)相对丰度却极显著地(P0.01)减少49%,但磷脂酰乙醇胺(PE)相对丰度的增加却不显著;推测在氮饥饿过程中增加的磷脂酰乙醇胺(PE)可能被磷脂:二酰甘油酰基转移酶作用以合成为TAG,致使缺刻缘绿藻TAG含量的增加。
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| 关 键 词： | 缺刻缘绿藻 溶血磷脂酰乙醇胺酰基转移酶(LPEAT) 三酰甘油(TAG) 磷脂 氮饥饿 |
| 修稿时间： | 2018/4/24 0:00:00 |
Cloning and characterization of a gene encoding lysophosphatidylethanolamine acyltransferase (LPEAT) in the green microalga Myrmecia incisa Reisigl |
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| ZHOU Zhigang,BAO Hong,OUYANG Longling.Cloning and characterization of a gene encoding lysophosphatidylethanolamine acyltransferase (LPEAT) in the green microalga Myrmecia incisa Reisigl[J].Journal of Fishery Sciences of China,2018,25(2):251-262. |
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| Authors: | ZHOU Zhigang BAO Hong OUYANG Longling |
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| Institution: | 1. The Key Laboratory of Exploration and Utilization of Aquatic Genetic Resources Conferred by Ministry of Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;2. International Research Center for Marine Biosciences Conferred by Ministry of Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China;3. National Demonstration Center for the Experimental Teaching of Fisheries Science, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Myrmecia incisa lysophosphatidylethanolamine acyltransferase (LPEAT) triacylglycerol (TAG) phospholipid nitrogen starvation |
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