| 赤羽病病毒Gcaa465～704的杆状病毒表达和单克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 魏方,陈冬杰,邓俊花,王晶晶,吴绍强.赤羽病病毒Gcaa465～704的杆状病毒表达和单克隆抗体制备[J].中国兽医杂志,2023(12):49-53. |
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| 作者姓名： | 魏方 陈冬杰 邓俊花 王晶晶 吴绍强 |
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| 作者单位： | 中国检验检疫科学研究院动物检验与检疫研究所 |
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| 基金项目： | “十四五”国家重点研发计划(2022YFD1800505)； |
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| 摘 要： | 为制备针对赤羽病病毒(AKAV)糖蛋白Gc的单克隆抗体(mAb),本试验选取AKAV Gc蛋白第465～704位氨基酸的基因序列进行密码子优化并合成至pFastBac HTB载体；通过蓝白斑筛选和昆虫细胞杆状病毒表达系统制备重组AKAV Gcaa465～704蛋白，纯化后免疫小鼠；通过细胞融合和亚克隆筛选阳性杂交瘤细胞，利用Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)对mAb特性进行鉴定。结果显示，本试验成功筛选出1株可稳定分泌抗AKAV Gcaa465～704蛋白mAb的杂交瘤细胞株4D1,Western blot结果显示，mAb 4D1可特异性识别AKAV Gcaa465～704蛋白；IFA结果显示，mAb 4D1能够与AKAV感染的BHK21细胞发生反应。结果表明，本试验成功制备抗AKAV Gcaa465～704蛋白mAb,为进一步研究AKAV Gc蛋白生物学功能和建立AKAV检测方法提供技术支持。
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| 关 键 词： | 赤羽病病毒 Gc蛋白 杆状病毒表达 单克隆抗体 |
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