| 猪γ干扰素单克隆抗体的制备与特性研究 |
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| 引用本文： | 沈环环,韩顺子,孟闯,潘志明,焦新安,康喜龙.猪γ干扰素单克隆抗体的制备与特性研究[J].黑龙江畜牧兽医,2024(5):80-85. |
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| 作者姓名： | 沈环环 韩顺子 孟闯 潘志明 焦新安 康喜龙 |
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| 作者单位： | 1. 扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室;2. 扬州大学农业农村部农产品质量安全生物性危害因子(动物源)控制重点实验室;3. 扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心 |
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| 摘 要： | 为了制备高特异性的抗猪γ干扰素(IFN-γ)抗体，试验采用原核表达的携带His标签的重组猪IFN-γ(PoIFN-γ)蛋白免疫小鼠，利用杂交瘤技术制备杂交瘤细胞；并以携带GST标签的重组蛋白PoIFN-γ(GST-PoIFN-γ)为包被抗原，通过间接ELISA方法筛选稳定分泌抗体的单克隆细胞株；而后通过间接ELISA方法、单克隆抗体亚型鉴定试剂盒、SDS-PAGE分析、Western-blot鉴定和间接免疫荧光方法对获得的单克隆抗体的腹水效价、亚型、反应特异性等生物学特性进行鉴定。结果表明：经筛选后共获得7株能稳定分泌PoIFN-γ的单克隆抗体细胞株；7株单克隆抗体的腹水效价在1∶2 048 000～1∶16 384 000之间，均为IgG1亚型，均能与原核表达及真核表达的PoIFN-γ蛋白发生特异性反应且反应性良好。说明试验成功制备了可特异性识别PoIFN-γ的单克隆抗体。
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| 关 键 词： | 猪γ干扰素 原核表达 单克隆抗体 效价 特异性 |
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