| 禽传染性支气管炎病毒S2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定 |
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| 引用本文： | 李忠斐,周建卫,张焕东,彭莉,颜焰,周继勇,廖敏.禽传染性支气管炎病毒S2蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定[J].中国预防兽医学报,2023(9):942-950. |
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| 作者姓名： | 李忠斐 周建卫 张焕东 彭莉 颜焰 周继勇 廖敏 |
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| 作者单位： | 1. 农业农村部动物病毒学重点实验室;2. 浙江大学动物医学中心 |
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| 摘 要： | 为制备禽传染性支气管炎病毒(IBV) S2蛋白的单克隆抗体(MAb)，本研究通过原核表达系统表达并纯化重组S2蛋白，将其免疫BALB/c小鼠并通过间接ELISA方法筛选到4株能够稳定分泌S2蛋白MAb的杂交瘤细胞株，分别命名为1A7、4F12、4A7、4D1。亚类鉴定结果显示4株MAb的重链均为Ig G1，轻链均为κ。采用间接ELISA法检测上清及腹水效价，结果显示MAb细胞上清效价均不低于1∶12 800，腹水效价均不低于1∶51 200。采用western blot检测制备的S2蛋白MAb与IBV感染鸡胚尿囊液后天然表达的S2蛋白的反应原性；采用间接免疫荧光试验(IFA)检测IBV感染非洲绿猴肾细胞(Vero)后天然表达的S2蛋白的反应原性。Western blot结果显示，感染IBV的鸡胚尿囊液中出现了90 ku左右的特异性条带；IFA结果显示，感染IBV的Vero细胞中出现绿色荧光。以上结果表明，制备的S2蛋白MAb能够与天然表达的S2蛋白反应，反应原性较强。利用间接ELISA检测MAb与S2蛋白的亲和力，结果显示4株MAb对S2蛋白均有良好的亲和力。利用一系列表达部分重叠的重...
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| 关 键 词： | 禽传染性支气管炎病毒 S2蛋白 单克隆抗体 抗原表位 |
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