| 大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制 |
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| 引用本文： | 夏兴霞,王永山,孟祥升,朱国强,张雪寒,何孔旺.大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制[J].中国兽医寄生虫病,2010,18(4):47-53. |
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| 作者姓名： | 夏兴霞 王永山 孟祥升 朱国强 张雪寒 何孔旺 |
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| 作者单位： | 1. 江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014
2. 江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014;扬州大学兽医学院,扬州225009
3. 扬州大学兽医学院,扬州,225009 |
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| 基金项目： | "十一五"国家科技支撑计划 |
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| 摘 要： | 用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜（NC）上;组装成双抗夹心法O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测O157∶H7,敏感度为106CFU/mL,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157∶H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1~5 min内可得出检测结果,便于O157∶H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌O157∶H7 单克隆抗体 胶体金 免疫层析试纸条 人兽共患病 |
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