| 单增李斯特菌单克隆抗体制备及免疫磁珠分离方法的建立 |
| |
| 引用本文： | 叶方钰,谢雨芮,王权,刘爽,张海洋,韩先干,蒋蔚.单增李斯特菌单克隆抗体制备及免疫磁珠分离方法的建立[J].畜牧与兽医,2023(9):93-99. |
| |
| 作者姓名： | 叶方钰 谢雨芮 王权 刘爽 张海洋 韩先干 蒋蔚 |
| |
| 作者单位： | 1. 塔里木大学动物科学与技术学院;2. 中国农业科学院上海兽医研究所;3. 南京农业大学动物医学院 |
| |
| 基金项目： | 上海市科学技术委员会科研计划项目(21N31901000)；;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2020JB07)； |
| |
| 摘 要： | 免疫磁珠技术操作简单、快速高效，目前已广泛应用于细菌的快速分离纯化等领域，本研究旨在建立一种捕获率高、特异性好的单增李斯特菌免疫磁珠分离方法。首先通过杂交瘤技术制备出8株抗单增李斯特菌单克隆抗体，效价均达到1∶1 024 000,且特异性较好。利用效价最高的腹水6-E6制备单增李斯特菌免疫磁珠，并对单增李斯特菌免疫磁珠最适条件进行优化，结果选择MEST(7.0)为偶联缓冲液、磁珠直径为750 nm、免疫磁珠添加量为0.4 mg、捕获时间45 min、单增李斯特菌含量在1×104 CFU/mL时，免疫磁珠捕获率最高可达76.29%。在模拟牛奶样品中免疫磁珠特异性捕获率可达到67.71%。该分离方法可快速且特异地分离单增李斯特菌，操作简便，为快速分离食品中的单增李斯特菌并实现快速检测提供了技术支持。
|
| 关 键 词： | 单增李斯特菌 单克隆抗体 免疫磁珠 捕获率 |
|
|
