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兔出血症病毒VP60蛋白单克隆抗体的制备及活性鉴定
引用本文:杨慧,武玉香,王文秀,孙培姣,于雪,王玉茂,沈志强,肖跃强.兔出血症病毒VP60蛋白单克隆抗体的制备及活性鉴定[J].动物医学进展,2019(8):6-10.
作者姓名:杨慧  武玉香  王文秀  孙培姣  于雪  王玉茂  沈志强  肖跃强
作者单位:山东省滨州畜牧兽医研究院;山东绿都生物科技有限公司
基金项目:山东省自然科学基金项目(ZR2014CQ045);滨州市科技发展计划项目(2015ZC0108);中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金课题;山东省现代农业产业技术体系项目(SDAIT-21-15)
摘    要:为制备兔出血症病毒VP60单克隆抗体,利用HEK293T细胞瞬时表达VP60,免疫Balb/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选获得阳性克隆细胞株-5D11。利用血凝抑制(HI)、间接免疫荧光(IFA)和Westernblot等方法对5D11分泌的单克隆抗体活性进行鉴定,并对其识别区域进行了定位。结果显示,5D11能抑制病毒凝集人“O”型红细胞,与杆状病毒表达的VP60蛋白发生特异性抗原抗体反应,且其识别VP60蛋白线性抗原表位,并定位于494aa-579aa区段。成功制备了抗VP60蛋白单克隆抗体,为开展病原学检测、流行病学研究等奠定了基础。

关 键 词:兔出血症病毒  VP60  单克隆抗体  活性鉴定  定位

Preparation and Identification of Monoclonal Antibody against VP60 Protein of Rabbit Hemorrhagic Disease Virus
YANG Hui,WU Yu-xiang,WANG Wen-xiu,SUN Pei-jiao,YU Xue,WANG Yu-mao,SHEN Zhi-qiang,XIAO Yue-qiang.Preparation and Identification of Monoclonal Antibody against VP60 Protein of Rabbit Hemorrhagic Disease Virus[J].Progress In Veterinary Medicine,2019(8):6-10.
Authors:YANG Hui  WU Yu-xiang  WANG Wen-xiu  SUN Pei-jiao  YU Xue  WANG Yu-mao  SHEN Zhi-qiang  XIAO Yue-qiang
Institution:(Shandong Binzhou Animal Science&Veterinary Medicine Academy,Binzhou,Shandong,256600,China;Shandong Lvdu Bio-science &Technology Co.Ltd,Binzhou,Shandong,256600,China)
Abstract:YANG Hui;WU Yu-xiang;WANG Wen-xiu;SUN Pei-jiao;YU Xue;WANG Yu-mao;SHEN Zhi-qiang;XIAO Yue-qiang(Shandong Binzhou Animal Science&Veterinary Medicine Academy,Binzhou,Shandong,256600,China;Shandong Lvdu Bio-science &Technology Co.Ltd,Binzhou,Shandong,256600,China)
Keywords:Rabbit hemorrhagic disease virus  VP60  monoclonal antibody  activity identification  localization
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