| 猪传染性胃肠炎病毒NSP5蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定 |
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| 引用本文： | 董慧,张鑫,陈建飞,时洪艳,石达,常铁城,谷凤丽,徐天,王智琴,冯力.猪传染性胃肠炎病毒NSP5蛋白单克隆抗体的制备及抗原表位鉴定[J].中国预防兽医学报,2015(3):220-224. |
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| 作者姓名： | 董慧 张鑫 陈建飞 时洪艳 石达 常铁城 谷凤丽 徐天 王智琴 冯力 |
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| 作者单位： | 沈阳农业大学畜牧兽医学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室;黑龙江八一农垦大学动物科技学院;东北农业大学生命科学学院;首都医科大学基础医学院 |
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| 基金项目： | 黑龙江省高等学校科技创新团队项目(2011TD001) |
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| 摘 要： | 为制备猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)NSP5蛋白的单抗隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究以原核表达并纯化的重组NSP5蛋白(r NSP5-GST)免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛出一株稳定分泌抗TGEV NSP5蛋白的MAb杂交瘤细胞株(5C3)。MAb亚类鉴定结果显示其抗体亚类为Ig G1/κ链。杂交瘤细胞培养上清液和腹水的效价分别为1∶6 400和1∶105。Western blot鉴定表明该MAb能够识别原核及真核表达的NSP5重组蛋白。利用肽扫描法鉴定显示,该MAb识别的抗原表位为286EFTPTEVIR QMYGVN300。本研究制备的MAb及其抗原表位的鉴定,为TGEV NSP5蛋白结构和功能的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪传染性胃肠炎病毒 nsp5基因 单克隆抗体 抗原表位 |
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