抗鸡传染性支气管炎病毒核蛋白单链抗体的构建及初步鉴定 |
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引用本文: | 徐佳,韩宗玺,杨光,邵昱昊,李慧昕,孔宪刚,刘胜旺.抗鸡传染性支气管炎病毒核蛋白单链抗体的构建及初步鉴定[J].中国预防兽医学报,2009,31(10). |
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作者姓名: | 徐佳 韩宗玺 杨光 邵昱昊 李慧昕 孔宪刚 刘胜旺 |
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作者单位: | 徐佳,韩宗玺,邵昱昊,李慧昕,孔宪刚,刘胜旺(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001);杨光(吉林省四平市动物疫病预防控制中心,吉林,四平,136000) |
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基金项目: | "十一五"国家科技支撑计划重大项目:重大动物疫病病原遗传变异及分子进化规律研究 |
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摘 要: | 为了构建鸡传染性支气管炎病毒(IBV)核蛋白(N)单链抗体(scFv),本研究通过提取杂交瘤细胞株6H3的总mRNA,采用RT-PCR法扩增出抗IBV N蛋白抗体的重链和轻链可变区基因,利用重叠延伸PCR将其重链和轻链通过一条寡核苷酸链连接起来扩增了单链抗体基因,并将其克隆于原核表达载体pET-30a,构建重组质粒,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达.对表达产物进行纯化复性后,用夹心ELISA和western blot检测表明scFv可与传染性支气管炎病毒核蛋白发生特异性结合.
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关 键 词: | 鸡传染性支气管炎病毒 核蛋白 单链抗体 原核表达 |
Preparation of a single-chain variable fragment against the IBV nucleocapsid protein |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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