| 禽白血病病毒衣壳蛋白单克隆抗体研制及其双夹心ELISA的建立 |
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| 引用本文： | 尹丽萍,秦爱建,钱琨,邵红霞,金文杰,史荣华,梁有志,杭柏林,孙薇薇.禽白血病病毒衣壳蛋白单克隆抗体研制及其双夹心ELISA的建立[J].中国家禽,2013,35(3). |
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| 作者姓名： | 尹丽萍 秦爱建 钱琨 邵红霞 金文杰 史荣华 梁有志 杭柏林 孙薇薇 |
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| 作者单位： | 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室,江苏扬州 225009;扬州大学教育部禽类预防医学重点实验室,江苏扬州 225009 |
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| 基金项目： | 联合国家基金重点项目，教育部创新团队项目，江苏省优势学科项目 |
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| 摘 要： | 为制备禽白血病病毒(ALV)核衣壳蛋白p27的单克隆抗体,本研究以原核表达的融合蛋白GST-ALV p27免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,通过间接免疫荧光(IFA)和间接ELISA进行筛选,制备了5株能够稳定传代并分泌抗p27单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为5D3、4F12、5B10、1C5和3C6,亚类鉴定3C6为IgG2b,其余为IgG1.通过IFA、Western-blot及竞争抑制ELISA,表明该5株单抗与J亚群禽白血病病毒(ALV-J)呈阳性反应,而与其他常见禽源病毒无交叉反应.利用5D3和4F12单抗建立了双抗体夹心ELISA方法,经663份临床样本验证,该方法与商品化试剂盒的符合率达到95.17％,证明所研制的针对ALV p27蛋白的单抗及建立的双抗体ELISA方法具有较高的应用价值.
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| 关 键 词： | 禽白血病病毒 p27 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA |
Development of Monoclonal Antibodies Against p27 of Avian Leukosis Virus and the Establishemnt of a Sandwich ELISA for Detection |
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| YIN Liping
,
QIN Aijian
,
QIAN Kun
,
SHAO Hongxia
,
JIN Wenjie
,
SHI Ronghua
,
LIANG Youzhi
,
HANG Bolin
,
SUN Weiwei.Development of Monoclonal Antibodies Against p27 of Avian Leukosis Virus and the Establishemnt of a Sandwich ELISA for Detection[J].China Poultry,2013,35(3). |
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| Authors: | YIN Liping QIN Aijian QIAN Kun SHAO Hongxia JIN Wenjie SHI Ronghua LIANG Youzhi HANG Bolin SUN Weiwei |
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