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| 猴免疫缺陷病毒p27蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | |
| 引用本文： | 华秋东,吴志军,姜成刚,沈楠,陈维多,相文华,周建华.猴免疫缺陷病毒p27蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J].中国预防兽医学报,2008,30(11). |
| 作者姓名： | 华秋东 吴志军 姜成刚 沈楠 陈维多 相文华 周建华 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学.黑龙江,哈尔滨,150030 2. 中国农业科学院,哈药集团,黑龙江,哈尔滨,150018 3. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙,江哈尔滨,150001 4. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 5. 东北农业大学.黑龙江,哈尔滨,150030 |
| 基金项目： | 哈尔滨市科技攻关项目 |
| 摘 要： | 利用PCR技术从质粒pSHIV89．6P中扩增猴免疫缺陷病毒（SIV）衣壳蛋白p27基因，并将其插入表达载体pET32a（＋）构建重组质粒pET32a-p27，转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导，对其产物进行SDS-PAGE和Western blot分析，并将纯化定量后的表达产物免疫小鼠，制备单克隆抗体。结果显示，gag基因的p27相应片段为763bp，其表达产物相对分子量为46ku。经镍柱纯化，获得目的蛋白p27纯度可达90％以上。利用淋巴细胞杂交瘤技术获得5株稳定分泌抗p27的单克隆抗体细胞株，分别命名为1A5、1C7、3C2、2D12、3D12。5株杂交瘤细胞诱生小鼠产生的腹水抗体效价分别为1：12800、1：25600、1：819200、1：51200和1：409600。免疫球蛋白类型均为IgG1型，轻链均为入链。Western blot和IFA试验结果表明所获得的单克隆抗体均对病原检测具有很高的特异性，为进一步开发SW早期诊断试剂盒奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 猴免疫缺陷病毒 p27蛋白 单克隆抗体 |
Development of monoclonal antibodies against the capsid p27 protein of SIVmac239 |
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| HUA Qiu-dong,WU Zhi-jun,JIANG Cheng-gang,SHEN Nan,CHEN Wei-duo,XIANG Wen-hua,ZHOU Jian-hua.Development of monoclonal antibodies against the capsid p27 protein of SIVmac239[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2008,30(11). | |
| Authors: | HUA Qiu-dong WU Zhi-jun JIANG Cheng-gang SHEN Nan CHEN Wei-duo XIANG Wen-hua ZHOU Jian-hua |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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