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抗A型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及抗原捕获ELISA检测方法的建立
引用本文:孙静,周国辉,王幸,李超斯,魏萍,于力.抗A型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及抗原捕获ELISA检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2013,35(2):146-150.
作者姓名:孙静  周国辉  王幸  李超斯  魏萍  于力
作者单位:1. 东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨150001
2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室,黑龙江哈尔滨,150001
3. 东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨,150030
基金项目:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ZGKJ200101)
摘    要:为建立A型口蹄疫病毒(FMDV)病原学诊断方法,本研究应用纯化的A型FMDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得一株稳定分泌单克隆抗体(MAb)的杂交瘤细胞株5F7.经IFA特异性鉴定,5F7为一株血清型特异性MAb.亚类为IgG1/k.间接ELISA检测杂交瘤细胞上清和腹水抗体效价分别为1:12 800和1:105.硫氰酸盐洗脱法测定其相对亲和力常数为1.5 mol/L.应用该A型特异性MAb及实验室已制备的MAb 3D9初步建立了检测A型FMDV的抗原捕获ELISA方法.该方法可以检出2.0 ng纯化FMDV和1.0×104 TCID50病毒,与O型、Asial型FMDV及牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒、牛传染性鼻气管炎病毒等均无交叉反应,组内及组间重复性试验显示变异系数小于8%.本研究建立的抗原捕获ELISA方法为A型FMDV抗原检测提供了一种实用有效的技术手段.

关 键 词:A型口蹄疫病毒  单克隆抗体  抗原捕获ELISA

Preparation of monoclonal antibody against foot and mouth disease virus serotype A and establishment of antigen capture ELISA
SUN Jing , ZHOU Guo-hui , WANG Xing , LI Chao-si , WEI Ping , YU Li.Preparation of monoclonal antibody against foot and mouth disease virus serotype A and establishment of antigen capture ELISA[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2013,35(2):146-150.
Authors:SUN Jing  ZHOU Guo-hui  WANG Xing  LI Chao-si  WEI Ping  YU Li
Institution:1.College of Veterinary Medicine,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China; 2.Division of Livestock Infections Disease,State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001,China)
Abstract:
Keywords:
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