猪圆环病毒4型Cap蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 |
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引用本文: | 姚晓慧,连拯民,袁丽莉,胡丹鹤,刘盼娆,朱振邦,李向东.猪圆环病毒4型Cap蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J].畜牧与兽医,2022(4):67-71. |
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作者姓名: | 姚晓慧 连拯民 袁丽莉 胡丹鹤 刘盼娆 朱振邦 李向东 |
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作者单位: | 1. 扬州大学兽医学院;2. 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;3. 扬州大学教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室 |
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摘 要: | 为制备猪圆环病毒4型(PCV4)Cap蛋白单克隆抗体,以原核表达的重组Cap蛋白免疫6~8周龄小鼠,三次免疫后取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合。利用亚克隆技术和间接免疫荧光(IFA)方法筛选到2株阳性单克隆杂交瘤细胞株,分别命名为5H9和2F3。间接免疫荧光和Western blot试验表明,2株单抗均能特异性识别293T细胞中特异表达的Cap蛋白,且5H9和2F3的IFA效价分别为1∶12 800和1∶6 400。亚类鉴定结果表明,两株单抗重链均属于IgG1,轻链类型为kappa型。本研究制备的抗PCV4 Cap特异性单抗,为PCV4检测方法的建立和流行病学调查提供了有效的生物材料,也为该病毒的分离鉴定与Cap蛋白功能的探究奠定了基础。
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关 键 词: | 猪圆环病毒4型 衣壳蛋白 原核表达 单克隆抗体 |
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