| 猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定 |
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| 引用本文： | 王梦婕,张杰,孙杨杨,白娟,刘星,姜平.猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定[J].畜牧与兽医,2022(6):91-96. |
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| 作者姓名： | 王梦婕 张杰 孙杨杨 白娟 刘星 姜平 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院/农业农村部动物细菌学重点实验室 |
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| 基金项目： | 财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系专项(CARS-35)；;江苏省重点研发计划重点项目(BE2018386)； |
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| 摘 要： | 为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白单克隆抗体，将PRRSV类NADC30毒株FJ1402的M蛋白胞外区基因与TAT穿膜肽基因融合，密码子按大肠杆菌偏嗜性优化，构建了大肠杆菌表达质粒，制备获得重组M蛋白。取6周龄雌性BALB/c小鼠免疫重组蛋白，将脾脏淋巴细胞和SP2/0细胞融合，用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株，获得4株分泌M蛋白抗体的杂交瘤细胞株。其中1E7、2F7、3A12的细胞上清液抗体效价为1∶3 200,3G7的细胞上清液抗体效价为1∶800,传至第15代均能稳定分泌抗体。单抗经亚型鉴定可知1E7、2F7、3A12的重链类型为Ig2a, 3G7的重链类型为IgG1,轻链类型都为κ型。经间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot鉴定，4株单克隆抗体均可与PRRSV产生特异性反应，鉴定出2个抗原表位，为PRRSV诊断和疫苗研制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白 单克隆抗体 |
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