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抗猪PD-L1分子的单克隆抗体制备及免疫学特性分析
引用本文:彭金美,李登云,郭娟娟,安同庆,孙艳,吴玉全,陈家锃,冷超粮,田志军.抗猪PD-L1分子的单克隆抗体制备及免疫学特性分析[J].中国预防兽医学报,2013,35(7).
作者姓名:彭金美  李登云  郭娟娟  安同庆  孙艳  吴玉全  陈家锃  冷超粮  田志军
作者单位:1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001
2. 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100
摘    要:为制备抗猪程序性死亡因子配体1 (PD-L1)的单克隆抗体(MAb)并鉴定其免疫学特性,本研究将猪PD-L1基因的外膜区利用原核表达载体pET32a进行表达,以纯化的表达蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,以表达PD-L1-Fc蛋白的293T细胞作为抗原,采用间接免疫荧光试验筛选杂交瘤培养上清,获得两株稳定分泌抗猪PD-L1 MAb的杂交瘤细胞系.MAb亚型鉴定均为IgG1型,轻链为(K)链.Western blot试验表明这两株MAb均可以特异性识别PD-L1蛋白.流式细胞检测结果显示这两株MAb可以识别表达于293T细胞膜表面的PD-L1分子,但不能阻断PD-L1分子与其受体PD-1的结合.这两株MAb的获得为研究PD-1/PD-L1通路与猪的某些感染性疾病发展进程的关系提供了必要的检测工具.

关 键 词:PPD-L1分子  PD-1/PD-L1通路  单克隆抗体

Preparation of the anti-porcine PD-L1 monoclonal antibodies and analysis of their immunological characteristics
Abstract:
Keywords:PD-L1  PD-1/PD-LI pathway  monoclonal antibody
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