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大黄鱼过氧化氢酶基因的克隆及其对鳗弧菌感染的响应
引用本文:严林飞,安昕,包苗苗,何建瑜,吴常文,刘慧慧.大黄鱼过氧化氢酶基因的克隆及其对鳗弧菌感染的响应[J].水产学报,2017,41(5):641-648.
作者姓名:严林飞  安昕  包苗苗  何建瑜  吴常文  刘慧慧
作者单位:浙江海洋大学国家海洋设施养殖工程技术研究中心,浙江舟山,316022
基金项目:国家自然科学基金(41606148);浙江省自然科学基金(LY14C190004);浙江省大学生科技创新活动计划暨新苗人才计划(2015R411005);舟山市科技局项目(2015C41014)
摘    要:为探究过氧化氢酶(catalase,CAT)对大黄鱼机体的保护作用,实验基于大黄鱼基因组序列数据库克隆获得CAT基因1584 bp的完整开放阅读框(GenBank登陆号:KKF-14425.1),该序列编码527个氨基酸残基,包含与其他动物高度保守的酶活性中心序列FDRERIPERVVHAKGA、亚铁血红素结合信号序列RLFSYPDTH、3个催化位点残基His75、Asn148和Tyr358,以及12个NADPH结合位点等,理论分子量为59.98 ku,等电点为8.37。多序列比对显示,大黄鱼CAT氨基酸序列与其他鱼类具有较高的一致性,与同属于石首鱼科的军曹鱼和条石鲷同源性高达94%,在进化树中也聚类于同一进化分支,说明该序列为CAT家族成员。实时荧光定量PCR检测显示,大黄鱼CAT基因在所检测的7种组织(肝脏、脾脏、脑、肾、肌肉、鳃、肠)中均有表达,但在肝脏中表达水平最高(为肌肉中的6.68倍)。鳗弧菌感染后,大黄鱼肝组织中CAT基因的表达随着时间的推移而变化明显,感染后12 h,达到最高(7.48倍),随后逐渐下降,到72 h已基本恢复到原始水平,注射PBS的对照组,CAT基因表达只略有上调,说明病原菌侵染可能引起鱼体产生大量活性氧自由基及H2O2,CAT基因则可以清除体内过量的活性氧,进而防止它们对细胞造成损伤。

关 键 词:大黄鱼  鳗弧菌  过氧化氢酶(CAT)  基因克隆
收稿时间:2016/1/13 0:00:00
修稿时间:2016/10/11 0:00:00

Expression of catalase in Larimichthys crocea after infection of Vibrio anguillarum
YAN Linfei,AN Xin,BAO Miaomiao,HE Jianyu,WU Changwen and LIU Huihui.Expression of catalase in Larimichthys crocea after infection of Vibrio anguillarum[J].Journal of Fisheries of China,2017,41(5):641-648.
Authors:YAN Linfei  AN Xin  BAO Miaomiao  HE Jianyu  WU Changwen and LIU Huihui
Institution:Zhejiang Ocean University, National Engineering Research Center of Marine Facilities Aquaculture,,,,Zhejiang Ocean University, National Engineering Research Center of Marine Facilities Aquaculture
Abstract:
Keywords:Larimichthys  crocea  catalase  Vibrio  anguillarum
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