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牛蛙(Rana catesbeiana)蛙皮抗菌肽基因的克隆、测序及其表达
引用本文:韩俊友,乔红伟,赵瑞利,胡博,谢芳,王金玲,郑伟,雷连成,韩文瑜.牛蛙(Rana catesbeiana)蛙皮抗菌肽基因的克隆、测序及其表达[J].中国兽医学报,2007,27(3):399-402.
作者姓名:韩俊友  乔红伟  赵瑞利  胡博  谢芳  王金玲  郑伟  雷连成  韩文瑜
作者单位:1. 吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
2. 中国医学科学院,中国协和医科大学实验动物研究所,北京,100021
3. 沈阳出入境检验检疫局,辽宁,沈阳,110016
4. 吉林省水产科学研究院,吉林,长春,130033
摘    要:利用RT—PCR的方法从牛蛙皮肤组织中克隆到大小为270bp的片段RCABP,将其克隆到pGEM—T载体,测序获得1个新的碱基序列。将此基因克隆到原核表达载体pQE一80L,获得融合表达质粒pQE一80L/DHFR/ABP,在1%IPTG诱导下进行表达。SDS—PAGE检测表明,重组蛙皮抗菌肽蛋白的表达量占菌体总蛋白的24%,以包涵体形式存在。体外抑菌试验表明,所构建的质粒能在大肠杆菌中表达具有体外抑菌活性的蛙皮抗菌肽,该融合蛋白具有良好的应用前景。

关 键 词:牛蛙  抗菌肽  基因表达
文章编号:1005-4545(2007)03-0399-04
修稿时间:2006年6月1日

Cloning and expression of antimicrobial peptides gene from bullfrog skin
HAN Jun-you,QIAO Hong-wei,ZHAO Rui-li,HU Bo,XIE Fang,WANG Jin-ling,ZHENG Wei,LEI Lian-cheng,HAN Wen-yu.Cloning and expression of antimicrobial peptides gene from bullfrog skin[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2007,27(3):399-402.
Authors:HAN Jun-you  QIAO Hong-wei  ZHAO Rui-li  HU Bo  XIE Fang  WANG Jin-ling  ZHENG Wei  LEI Lian-cheng  HAN Wen-yu
Abstract:Using RT-PCR techuique, a nucleotide segment of 270 bp was obtained from the skin of bullfrog and then cloned into the vevtor of pPGEM-T. The product was gained and sequenced. The identified cDNA was cloned into the new type of prokaryotic expression vector pQE-80L, and a synthetized expression plasmid named pQE-80L/DHFR/ABP obtained. The E.coli competent host BL21(DE3)lysS was transformed with pQE-80L/DHFR/ABP and the antimicrobial peptide gene was expressed at a high level, amounting for 24% of the induced recombinant bacteria protein at the presence of IPTG.
Keywords:bullfrog  antimicrobial peptide  gene expression
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