| 相思子毒素-a单克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 李小兵,谢光洪,周昌芳,张志刚,宋文学,周晓翠,张乃生,王兴龙,高宏伟,王哲.相思子毒素-a单克隆抗体的制备与鉴定[J].中国兽医学报,2008(7). |
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| 作者姓名： | 李小兵 谢光洪 周昌芳 张志刚 宋文学 周晓翠 张乃生 王兴龙 高宏伟 王哲 |
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| 作者单位： | 吉林大学畜牧兽医学院 军事医学科学院军事兽医研究所 吉林大学畜牧兽医学院 吉林长春 吉林长春 |
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| 摘 要： | 用含1%甲醛的磷酸盐缓冲液对相思子毒素-a(abrin-a)减毒处理制备类毒素,以类毒素为免疫抗原分4次免疫3只BALB/c小鼠。采用聚乙二醇(PEG)法,取免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,筛选分泌抗abrin-a的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株。将阳性细胞株接种BALB/c小鼠制备McAb腹水,根据亚类鉴定结果,分别采用蛋白A或蛋白G亲和层析柱纯化腹水,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测McAb特异性,Western-blot法分析McAb抗原识别位点。结果获得1G5、3C2和4G1共3株McAb杂交瘤细胞株,均为抗abrin-a的特异性McAb,与相思子凝集素、蓖麻毒素(ricin)和蓖麻凝集素均无交叉反应,其中4G1为特异性结合abrin-a A链的McAb,1G5和3C2两株为特异性结合abrin-a B链的McAb;制备的McAb可用于abrin-a含量的检测。
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| 关 键 词： | 相思子毒素-a 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验（ELISA） Western-blot |
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