重组鸡β-防御素1O蛋白的原核表达及其抗菌活性的测定 |
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引用本文: | 廖文艳,马得莹,韩宗玺,刘胜旺.重组鸡β-防御素1O蛋白的原核表达及其抗菌活性的测定[J].中国预防兽医学报,2008,30(10). |
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作者姓名: | 廖文艳 马得莹 韩宗玺 刘胜旺 |
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作者单位: | [1]东北农业大学动物营养研究所,黑龙江哈尔滨150030 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨150001 |
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摘 要: | 鸡抗菌肽属β-防御素类,在鸡的先天性免疫中发挥重要作用。本研究将克隆得到的鸡β-防御素-10基因(AvBD10)亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中构建了重组表达质粒pGEX-AvBD10。将重组质粒转化至BL21,于37℃用IPTG诱导培养不同时间,SDS-PAGE电泳与灰度扫描显示该重组蛋白表达量占菌体总蛋白的34.3%。表达的AvBD10融合蛋白以包涵体的形式存在,分子量约为31ku。重组蛋白经纯化后,以对数生长中期的大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽胞杆菌和猪霍乱沙门氏菌为检测菌,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定了重组鸡AvBD10蛋白的抗菌活性。结果显示,重组鸡AvBD10蛋白对大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽胞杆菌有抗菌活性。此外,重组鸡AvBD10蛋白在-70℃~100℃及在pH4-pH10条件下仍具有抗茵活性。
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关 键 词: | 鸡AvBD10 融合蛋白 抗菌活性 |
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