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| 鸭β-防御素4cDNA的克隆、表达及其抑菌活性的初步分析 | |
| 引用本文： | 蔺利娟,韩宗玺,邵昱昊,张可心,刘胜旺,李子瑞,马得莹.鸭β-防御素4cDNA的克隆、表达及其抑菌活性的初步分析[J].畜牧兽医学报,2011,42(9). |
| 作者姓名： | 蔺利娟 韩宗玺 邵昱昊 张可心 刘胜旺 李子瑞 马得莹 |
| 作者单位： | 1. 东北农业大学动物营养研究所,哈尔滨 150030;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室,哈尔滨 150001 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室禽传染病研究室,哈尔滨,150001 3. 东北农业大学动物营养研究所,哈尔滨,150030 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30972110); 黑龙江省教育厅科研重点项目(1153lz05) |
| 摘 要： | 本研究旨在克隆与表达鸭β防御素4(AvBD4)基因及测定其生物学特性,并检测其在鸭脏器组织中的分布.采用RT-PCR方法从鸭法氏囊组织中扩增到鸭AvBD4,其cDNA大小为171 bp,编码56个氨基酸.经同源性分析,鸭AvBD4与鸡AvBD4的氨基酸序列同源性最高,达73.2％.将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1的EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX-duck AvBD4.将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃进行诱导表达,SDS-PAGE电泳表明,重组鸭AvBD4蛋白的相对分子质量约为32 ku,与预期大小一致.该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性与理化特性,结果显示,重组鸭AvBD4蛋白具有广谱的抗菌活性,对11种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌作用.在高盐离子条件下,重组鸭AvBD4蛋白仍具有抑制金黄色葡萄球菌和多杀性巴氏杆菌的作用.此外,该重组蛋白的溶血活性极低.运用实时荧光定量PCR法检测到该基因在鸭组织器官中表达局限,仅在盲肠扁桃体、脾脏和法氏囊中表达. |
| 关 键 词： | 鸭 AvBD4 重组蛋白 抗菌活性 组织分布 |
cDNA Cloning, Expression and Initial Characterization of Antibacterial Activity of Duck Avian Beta-defensin 4 |
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| LIN Li-juan,HAN Zong-xi,SHAO Yu-hao,ZHANG Ke-xin,LIU Sheng-wang,LI Zi-rui,MA De-ying.cDNA Cloning, Expression and Initial Characterization of Antibacterial Activity of Duck Avian Beta-defensin 4[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2011,42(9). | |
| Authors: | LIN Li-juan HAN Zong-xi SHAO Yu-hao ZHANG Ke-xin LIU Sheng-wang LI Zi-rui MA De-ying |
| Institution: | LIN Li-juan 1,2,HAN Zong-xi 2,SHAO Yu-hao 2,ZHANG Ke-xin 1,LIU Sheng-wang 2,LI Zi-rui 1,MA De-ying 1 (1.Institute of Animal Nutrition,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,2.Division of Avian Infectious Disease,National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,Harbin Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150001) |
| Abstract: | |
| Keywords: | duck AvBD4 recombinant protein antibacterial activity tissue distribution |
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