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鸭β-防御素10基因的克隆、遗传进化分析及其生物学特性的初步研究
引用本文:廖文艳,马得莹,王瑞琴,韩宗玺,邵昙昊,李慧昕,刘胜旺.鸭β-防御素10基因的克隆、遗传进化分析及其生物学特性的初步研究[J].畜牧兽医学报,2009,40(9).
作者姓名:廖文艳  马得莹  王瑞琴  韩宗玺  邵昙昊  李慧昕  刘胜旺
作者单位:1. 东北农业大学动物营养研究所,哈尔滨,150030;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术
2. 东北农业大学动物营养研究所,哈尔滨,150030
3. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术
基金项目:国家自然科学基金,黑龙江省教育厅科研重点项目,NOVUS国际科研基金 
摘    要:旨在从鸭肝脏组织中克隆鸭β-防御素10(AvBD10)基因,并在原核表达重组鸭AvBD10蛋白,研究重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性.试验采用RT-PCR法,从鸭肝脏组织中扩增鸭AvBD10基因,测定该基因在鸭各组织器官中的分布;将鸭AvBD10基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,构建重组表达质粒pGEX-duck AvBD10,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达;亲和层析纯化蛋白,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性.结果表明,鸭AvBD10 cDNA大小为169bp,编码55个氨基酸残基,与鸡AvBD10氨基酸同源性为85.5%.该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达.重组鸭AvBD10融合蛋白的分子量约为30 ku,重组蛋白占菌体总蛋白的34%.重组鸭AvBD10蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有抗菌活性.结果,从鸭肝脏组织中扩增了鸭AvBD10基因,该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达.重组鸭AvBD10融合蛋白具有广谱抗菌活性,该重组蛋白对温度和酸碱度有很高的稳定性.

关 键 词:  重组蛋白  抗菌活性

mRNA Cloning, Evolutionary Analysis and Biological Characterization of Duck Avian Beta-defensin 10
LIAO Wen-yan,MA De-ying,WANG Rui-qin,HAN Zong-xi,SHAO Tan-hao,LI Hui-xin,LIU Sheng-wang.mRNA Cloning, Evolutionary Analysis and Biological Characterization of Duck Avian Beta-defensin 10[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2009,40(9).
Authors:LIAO Wen-yan  MA De-ying  WANG Rui-qin  HAN Zong-xi  SHAO Tan-hao  LI Hui-xin  LIU Sheng-wang
Abstract:
Keywords:AvBD10
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