鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备 |
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引用本文: | 王洪海,苏敬良,曹振,田克恭.鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备[J].中国兽医科技,2004,34(11):13-17,F002. |
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作者姓名: | 王洪海 苏敬良 曹振 田克恭 |
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作者单位: | [1]中国农业大学动物医学院,北京100094 [2]农业部兽医诊断中心,北京100094 |
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摘 要: | 采用差速离心和蔗糖密度梯度离心法提纯鸭肠炎病毒(DEV)鸭胚成纤维细胞适应毒,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选,有限稀释法3次克隆,获得了2株稳定分泌DEV单克隆抗体的杂交瘤细胞株1B8和2G8。经鉴定,2株单克隆抗体分别为IgM和IgG1亚类,腹水ELISA效价均达到1:10^7以上。以2G8单抗腹水为材料,采用间接免疫荧光抗体技术对DEV标准毒感染的鸭胚成纤维细胞进行检测,结果表明,用该抗体可特异性检出接毒后6h感染细胞中的DEV,且感染后48h免疫荧光强度最高,该单抗与细胞成分和鸭肝炎病毒无交叉反应。将杂交瘤细胞冻存3和6个月,复苏后仍能稳定分泌单克隆抗体。
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关 键 词: | 鸭 肠炎病毒 单克隆抗体 制备技术 |
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