| 鸭RIG-Ⅰ蛋白C端helicase结构域和RD结构域的原核表达及其单克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 臧凤霞,张雅春,王伟,赵颖慧,李越,周长良,陈洪岩,孟庆文.鸭RIG-Ⅰ蛋白C端helicase结构域和RD结构域的原核表达及其单克隆抗体的制备[J].中国家禽,2014,36(20). |
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| 作者姓名： | 臧凤霞 张雅春 王伟 赵颖慧 李越 周长良 陈洪岩 孟庆文 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 地方科技攻关计划课题，“十二五”农村领域国家科技计划课题，中央级公益性科研院所基本科研业务费 |
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| 摘 要： | 利用PCR技术将鸭维甲酸诱导基因Ⅰ(RIG-Ⅰ)helicase区和RD区部分编码序列分别进行扩增,并分别命名为c、d段;克隆到pET30a原核表达载体,构建了重组原核表达质粒pET30a-c和pET30a-d,通过转化BL21 (DE3)感受态菌、IPTG诱导、镍柱纯化表达蛋白,将纯化的c、d蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体(mAb),采用ELISA、Western blot和间接免疫荧光试验对单克隆抗体进行鉴定分析.获得鼠抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体有14株与原核分段表达的c、d蛋白有良好的反应性,其中3株与真核表达的RIG-Ⅰ蛋白有良好的反应性.制备的鼠抗鸭RIG-Ⅰ单克隆抗体为RIG-Ⅰ在抗病毒天然免疫信号转导途径的研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 鸭RIG-Ⅰ helicase结构域 RD结构域 原核表达 单克隆抗体 |
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