| 鸭疫里默氏杆菌GroEL蛋白的原核表达和单克隆抗体制备 |
| |
| 引用本文： | 侯湾湾,韩先干,王少辉,王小兰,岳嘉蘋,曹守林,范红结,于圣青.鸭疫里默氏杆菌GroEL蛋白的原核表达和单克隆抗体制备[J].中国动物传染病学报,2014(2):58-64. |
| |
| 作者姓名： | 侯湾湾 韩先干 王少辉 王小兰 岳嘉蘋 曹守林 范红结 于圣青 |
| |
| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室;中国农业科学院上海兽医研究所 |
| |
| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项经费项目(201003012);国家自然科学基金(31272591) |
| |
| 摘 要： | 本试验旨在研制鸭疫里默氏杆菌GroEL蛋白的单克隆抗体。将鸭疫里默氏杆菌WJ4菌株的groEL基因进行原核表达,重组蛋白经过纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠。经过3次免疫后,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用间接ELISA筛选阳性细胞株并进行3次亚克隆后制备小鼠腹水单克隆抗体。共获得2株稳定分泌鸭疫里默氏杆菌GroEL单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1G2B6和1G2F10。2株单克隆抗体均为IgG1亚类。腹水单克隆抗体ELISA效价达到1:102 400。Western blot检测结果表明2株单克隆抗体均能与鸭疫里默氏杆菌血清1、2和10型菌株发生特异性结合,而与禽致病性大肠杆菌、沙门氏菌和禽巴氏杆菌菌株无反应性。本研究成功制备了稳定性好、特异性强的鸭疫里默氏杆菌GroEL单克隆抗体,为进一步研制基于抗体检测鸭疫里默氏杆菌抗原的试剂盒奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 鸭疫里默氏杆菌 GroEL蛋白 单克隆抗体 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
