| 1株抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定 |
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| 引用本文： | 殷一凡,季霖,马千惠,范红结,蔺辉星.1株抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定[J].畜牧与兽医,2022(5):98-104. |
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| 作者姓名： | 殷一凡 季霖 马千惠 范红结 蔺辉星 |
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| 作者单位： | 南京农业大学动物医学院 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2021YFD1801200)； |
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| 摘 要： | 为鉴定猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳(N)蛋白的抗原表位，本研究通过原核表达N蛋白，纯化后免疫BALB/c小鼠，利用细胞融合和亚克隆技术，筛选出1株稳定分泌抗PEDV N蛋白抗体的杂交瘤细胞9B4。经鉴定单克隆抗体9B4的亚型为IgG1型，轻链为Kappa链。腹水抗体ELISA效价为10~6以上。ELISA、Western blot和免疫荧光鉴定结果显示该单克隆抗体反应原性和特异性良好。利用噬菌体展示技术对单克隆抗体9B4进行抗原表位鉴定，获得4个N蛋白的模拟抗原表位(C11、C12、C14和C26)。随后分别以噬菌体阳性克隆为模拟抗原，对临床PEDV血清样品进行检测，发现其均能与猪PEDV阳性血清发生特异性结合，而与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)阳性血清、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)阳性血清不反应，说明本研究获得的N蛋白模拟表位可用于PEDV抗体的检测，有助于PED流行病学调查和PEDV疫苗免疫效果的评价。
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 单克隆抗体 抗原表位 |
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