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应用单克隆抗体建立夹心ELISA检测EDS—76病毒 总被引：2，自引：1，他引：2
利用单克隆抗体建立夹心ＥＬＩＳＡ方法，对人工感染鸡带毒和排毒检测，表明第３天血、脾、输卵管带毒，第８天时各脏器几乎都带毒，第１４天仅输卵管、肾、肝检出病毒。第６天时鸡蛋带毒，泄殖腔排毒；直至１４天时仍带毒和排毒。夹心ＥＬＩＳＡ与ＨＡ、鸭胚接种相比较，在３６份样品中，ＨＡ检出１９份。ＥＬＩＳＡ检出２４份，鸭胚接种检出１２份。病毒在鸭胚和细胞上复制动态表明，２４小时后血凝试验和夹心ＥＬＩＳＡ都能检出病毒，随着时间延长，ＨＡ价和ＥＬＩＳＡ价（ＰＮ）继续上升，８４小时至９６小时到最高峰。在２４小时时，无血凝性，但ＥＬＩＳＡ检测为阳性，因此夹心ＥＬＩＳＡ可用于病毒检测。单抗夹心ＥＬＩＳＡ的建立为生产上提供了一种更简单、快速、灵敏、应用广泛的病毒检测方法。 相似文献
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为了解不同疫苗生产厂家生产的新城疫灭活疫苗的免疫效果,更好地开展新城疫的免疫工作,选用国内4个厂家所生产的新城疫灭活疫苗,免疫商品蛋鸡,依据免疫前后、攻毒后抗体水平变化趋势和攻毒后对鸡群的保护力,评估4种ND油苗的免疫效果。结果表明:3和4号疫苗组死亡保护力均为100%,而且3号和4号疫苗组产生的抗体水平较高、提升时间较早;而1号和2号疫苗组均有死亡,并且抗体水平与3号和4号疫苗组相比较低。由试验可知,不同生产厂家所生产的ND油苗质量参差不齐,免疫效果有较大差异。 相似文献
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本研究通过制备可乐定完全抗原,免疫新西兰大白兔,得到特异性多克隆抗体,并和HRP标记的羊抗兔,构建间接ELISA检测法试剂盒,并进行性能测试评价。结果表明,吸光度百分比值与赛庚啶质量浓度的对数在0.1-8.1μg/L呈线性关系,相关系数R2为0.977,半数抑制浓度(IC50)为0.675μg/L,检测限为0.2μg/L,回收率为81% ～109%,具备良好的特异性,可用于动物尿样、血清和组织中的可乐定残留检测。 相似文献
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不同家禽红细胞悬液检测水禽禽流感抗体对比试验 总被引：6，自引：0，他引：6
用同种水禽红细胞及水禽血清经处理后用鸡红细胞检测水禽禽流感抗体,试验结果表明:用鸡的红细胞来检测鹅、鸭的禽流感免疫抗体,比用同种水禽红细胞检测的抗体滴度平均低(2～4)Log2,如果禽流感免疫抗体低于4Log2时.用鸡红细胞基本检测不到Hl抗体.而用同种水禽红细胞对水禽禽流感抗体进行检测,可完全消除j}特异性凝集因子对水禽流感抗体检测的影响. 相似文献
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乳胶凝集试验快速检测副猪嗜血杆菌 总被引：1，自引：0，他引：1
利用原核表达并经过纯化的副猪嗜血杆菌TbpB N端蛋白及人工合成的特异性多肽制备单克隆抗体,经碳化二亚胺(EDC)将纯化后的单克隆抗体IgG与羧化乳胶共价偶联,并对偶联乳胶的IgG含量及偶联时间等条件进行合理选择,建立了快速检测副猪嗜血杆菌的乳胶凝集试验方法.利用LAT方法检测148株副猪嗜血杆菌疑似菌株,参考16 S rRNA-PCR方法的结果,符合率为83.1%,且致敏乳胶不与临床常见菌株发生凝集反应.结果表明,此检测方法具有操作简便、快速、特异性高的特点,便于在基层推广使用,为副猪嗜血杆菌的诊断和有效防治提供了参考和依据. 相似文献
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赛庚啶ELISA检测试剂盒的研制及其性能评价 总被引：1，自引：0，他引：1
基于直接竞争法原理酶联免疫技术研制了一种测定动物尿液中赛庚啶(CHP)残留量的检测试剂盒,并对试剂盒的检测限、特异性和稳定性等参数进行确定。通过在CHP分子上引入活性羧基,在EDC作用下分别偶联到KLH、BSA上形成CHP-KLH和CHP-BSA抗原,CHP-KLH抗原免疫BALB/C小鼠制得抗CHP单克隆抗体,经辣根过氧化物酶HRP标记抗CHP抗体,采用CHPBSA抗原包被酶标板,最终成功构建动物尿样中CHP残留量的竞争酶联免疫法检测体系,并进行性能测试评价。结果表明,吸光度百分比值与CHP质量浓度的对数在0.1~1.6μg/L呈线性关系,相关系数R~2为0.986,半数抑制浓度(IC_(50))为0.316μg/L,检测限为0.158μg/L,回收率在80%~110%,变异系数为2.0%~10.0%。方法具备良好的特异性,可用于动物尿样、血清及组织中CHP残留的快速检测。 相似文献
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牛布鲁菌单克隆抗体乳胶凝集试验方法的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
建立了用纯化好的牛布鲁菌(B.abortus)单克隆抗体致敏乳胶的检测方法。通过试验确定了抗体致敏乳胶最佳偶联蛋白量为1.23 mg/mL,最佳致敏时间4 h,最佳的乳胶浓度为1%。水样模拟样本的制作,取含1.0×109cfu/mL灭活的B.abortus544A生理盐水菌悬液各1 mL,加入9 mL自来水中,充分混合均匀,各取1 mL,土样、奶样模拟样本制作同上。最低检出率水样为3×104cfu/mL~1.0×105cfu/mL,土样、奶样为5×104cfu/mL~1.0×105cfu/mL。 相似文献
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本研究鸡传染性法氏囊病冻干卵黄抗体和市售精制液体卵黄抗体分别以10羽份和3 mL超剂量肌肉注射各10只18日龄SPF雏鸡,观察14 d均安全。两种抗体以1羽份剂量分别肌肉注射各20只18日龄SPF雏鸡24 h后,用IBDV强毒TL株攻击,连续观察144 h,2个试验组分别有20/20、17/20的雏鸡健活,剖检没有发现法氏囊病变;二者分别以1羽份剂量连续2 d肌肉注射各20只18日龄已经被IBDV强毒TL株攻击12 h的SPF雏鸡,连续观察96 h,2个试验组有19/20、17/20的雏鸡健活,而预防和治疗试验中的阳性对照组中20只鸡均有法氏囊特征性病变发生（20/20）,且死亡率在85%（17/20）以上,阴性对照组雏鸡均正常。 相似文献
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口蹄疫疫苗效力试验和血清学取代方法研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
口蹄疫疫苗效力试验是通过强毒攻击疫苗免疫动物来评价12蹄疫疫苗免疫效果的一种方法,该方法在安全性、经济性、动物福利方面存在问题,寻找更安全的12蹄疫疫苗效果评价方法成了各国口蹄疫疫苗研究的重要任务。许多研究表明,动物免疫后的血清学指标和动物能否抵抗强毒攻击有相关关系,提出了疫苗效力试验的各种血清学替代方法,如“抗体平均值预测”、“bootstrap”和“抗体滴度最佳临界点”等,取得了很多进展,其中用“抗体滴度最佳临界点”方法可以计算出疫苗的PD50（50％ protectivedose）,重复性（re—peatability）为65．8％,再现性（reproducibility）为60．7％,该方法有望标准化。 相似文献
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琼脂扩散试验检测雏鹅新型病毒性肠炎病毒及抗体的研究 总被引：7，自引：0，他引：7
本文报道１种检测雏鹅新型病毒性肠炎病毒及抗体的琼脂扩散试验。以１／１５Ｍ ｐＨ７．２ＰＢＳ配制的含０．８５％琼脂糖凝胶检测效果最好,对ＮＧＶＥＶ提纯抗原和兔抗ＮＧＶＥＶ的ＩｇＧ的最低检出量分别为０．１５ｍｇ／ｍｌ和０．０５ｍｇ／ｍｌ。１次加样和２次加样对ＮＧＶＥＶ感染死亡雏鹅的肠、肝脏、心、脾、肾、胰腺的阳性检出率分别为１００％、８０％、４０％、５０％、２０％、６０％和１００％、１００％、５６％、 相似文献
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应用胶体金免疫层析技术,结合胶体金定量读数仪研制出一种快速定量检测猪血清中猪瘟抗体水平的检测卡。该检测卡以胶体金标记高灵敏的猪瘟重组E2蛋白,同时在NC膜上包被同一蛋白,经正交实验确定最适条件,同时通过与对照线的颜色对比,应用胶体金定量读数仪,可对样本中猪瘟抗体水平进行定量。该检测卡检测方法简便、快速、稳定性好。与猪圆环病毒病、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征等常见猪疫病抗体均无交叉反应。检测71份猪血清样本结果与ELISA结果的符合率达90.1%。结果表明,实验研制的猪瘟抗体胶体金快速定量检测卡可用于基层兽医站和养殖企业的检测。 相似文献
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为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒大小为30 nm的胶体金,再用胶体金标记纯化单克隆抗体7D1,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体7D4,经反应条件优化,组装成了大片形吸虫免疫检测试纸条。经测试该检测试纸条对ES抗原的检测下限为0.94 μg/mL,与胰扩盘吸虫、前后盘吸虫、支原体、弓形虫、伊氏锥虫均无交叉反应,特异性好。采集广西地区334份水牛新鲜粪样并用试纸条检测,阳性率为38.62%。结果表明,试纸条方法操作简单、快速、易于判定,特异性好,敏感性高,适合基层大面积普查和现场检测大片形吸虫。 相似文献