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应用Dot_ELISA技术检测草鱼出血病病毒的研究 总被引：4，自引：0，他引：4
报道了斑点免疫吸附ＥＬＩＳＡ（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）快速检测草鱼出血病病毒（ＧＣＨＶ）的方法以及对提纯病毒、染毒细胞内病毒和病鱼组织的检测结果，并对该方法的灵敏度与ＳＰＡ－ＣｏＡ和常规ＥＬＩＳＡ法进行了系统的比较。结果表明，Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检出ＧＣＨＶ的最低含量为３ｐｇ，该灵敏度比ＳＰＡ－ＣｏＡ和常规ＥＬＩＳＡ法分别提高１０倍和２０倍，而且快速易行，是目前检测ＧＣＨＶ最为有效的方法，并可在草鱼出血病临床诊断和病毒疫苗质量鉴定等方面得到应用。 相似文献
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用酶联免疫吸附受体法检测鱼类生长激素的生物活性 总被引：13，自引：0，他引：13
根据激素一受体反应的原理，结合酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）和放射受体测定法（ＲＲＡ）的优点，应用我们纯化的Ａ昌鱼生长激素（ｇｃＧＨ）和大鳞大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）及其特异抗体，采用鱼类肝细胞膜受体制剂，首次建立了测定鱼类ＧＨ生物活性的酶联免疫吸附受体测定法（ＥＬＩＳＡ－ＲＡ）。此法检测草鱼ＧＨ的灵敏度达０．０６３￣０．１２５ｕｇ／ｍｌ，检测大马哈鱼ＧＨ与草鱼肝膜受体结合的灵敏度达０．２５ｕｇ 相似文献
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采用饱和硫酸铵分步盐析法结合柱层析提取，纯化欧洲鳗血清免疫球蛋白（Ｉg) ,实验证实欧洲鳗Ｉg主要分布在硫酸铵饱和度３０％－５０％的区间内，Ｓephacry1-S200进一步提纯的Ｉg主要存在于第一个蛋白峰，而Ｓepharose-4B柱层析提纯的Ｉg则存在于第二个蛋白峰，ＤＥＡE-52脑子交换柱层析可进一步纯化Ｓepharose-4B柱层析的产物，ＥＬＩＳＡ和Western-blot分别证实上述提取物具有抗体的免疫学活性，ＳＤＳ－ＰＡＥＧ分析纯化的Ｉg，显示了洲鳗Ｉg重链约为６８kD，轻链约为２６kD. 相似文献
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采用细胞病变抑制等方法，在植物凝集素（Ｐhytoagglutinin,PHA)诱导的草鱼血清中检测到一种干扰素，理化和生物学性质鉴定表明，它不同于病秀导的α／β－干扰素，表现在对５６℃,pH２和０．１％ＳＤＳ敏感，其活性不能被α／β－干扰素抗体所中和，其诱生剂为非病毒性质的有丝分裂原，诱生作用受波酯（ＰＭＡ）和白细胞介素－２（ＩＬ－２）的调节，这些特性与人类和高等脊椎动物中报道的γ干扰素相符，表明是一种γ样性质的干扰素，草鱼γ样干扰素的体内诱导受环境温度，诱导时间，ＰＨＡ剂量等因素的影响，２５℃或３０℃水温诱导的干扰素活性明显高于１５℃或８℃，高剂量（每尾０.5-0.8mg)PHA诱导的干扰素活性明显太于低剂量（每尾０.1-0.3mg)，且达到活性高峰所需要的时间短，为３d，而低剂量为５d，ＰＭＡ和ＩＬ－２能促进草鱼γ样干扰素的诱生。 相似文献
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不同脂肪源饲料对草鱼稚鱼生长的影响 总被引：10，自引：2，他引：10
不同脂肪源饲料对草鱼稚鱼生长的影响刘玮，徐萍，任本根，龚纲明（江西省科学院生物资源研究所，南昌３３００２９）关键词草鱼，鱼饲料，必采脂肪酸ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＤＩＥＴＳＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧＤＩＦＦＥＲＥＮＴＬＩＰＩＤＳＯＮＧＲＯＷＴＨＯＦＪＵＶＥＮＩＬ... 相似文献
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草鱼血清生长激素水平的日变化 总被引：1，自引：0，他引：1
草鱼血清生长激素水平的日变化ＤＡＩＬＹＶＡＲＩＡＴＩＯＮＳＯＦＳＥＲＵＭＧＲＯＷＴＨＨＯＲＭＯＮＥＬＥＶＥＬＳＩＮＧＲＡＳＳＣＡＲＰ￥ＺｈａｎｇＷｅｉｍｉｎａｎｄＬｉｎＨａｏｒａｎ（ＢｉｏｌｏｇｙＤｅｐａｒｔｍｅａｔｏｆＺｈｏｎｇｓｈａｎＵｎｉｖｅｒ... 相似文献
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渔业经济学科的建设与发展ＳＵＲＪＥＣＴＣＯＮＳＴＲＵＣＴＩＯＮＡＮＤＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＯＦＦＩＳＨＥＲＹＥＣＯＮＯＭＩＣＳ吴万夫（中国水产科学研究院，北京１０００３９）ＷｕＷａｎｆｕ（ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＦｉｓｈｅｒ，Ｓｃｉｅｎｅｃｅ... 相似文献
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草鱼出血病病毒854株基因组SDS—PAGE分析及其核酸类型鉴定 总被引：3，自引：0，他引：3
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明:草鱼出血病病毒854株基因组由11个分段的核酸片段组成,总分子量约为14.46×10~6道尔顿。其中最大片段的分子量约为2.45×10~6道尔顿;最小片段的分子量约为0.38×10~6道尔顿。其基因组核酸片段电泳图谱具有病毒株的特异性.核酸酶敏感性试验表明该病毒的核酸为RNA。 相似文献
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为建立并优化草鱼鳃蛋白质组双向电泳的技术体系,实验将草鱼鳃经裂解处理后,通过固相p H梯度胶条进行一向等电聚焦和SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳进行蛋白分离,对不同的裂解液配方、蛋白纯化方法、IPG胶条的分离范围、上样量和染色方法等进行了探索和优化,并应用lmage Master 2D Platinum 7.0软件对电泳图谱进行了分析。结果表明:采用裂解液中添加DTT来取代Tris和TBP、选择分离范围为pH4-7的IPG胶条和150μg的主动水化上样,电泳结束后对凝胶进行硝酸银染色,获得了覆盖范围广、低背景、高分辨率、适合差异蛋白分析的双向电泳参考图谱。 相似文献
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采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究了鲤、鲢、鳙、草鱼亲鱼消化道消化酶的种类;用比色法及滴定法分别测其消化酶相对活性。结果表明：鲤、鲢、鳙、草鱼4种鱼消化道的蛋白酶、淀粉酶活性与食性有明显的相关性。其中,蛋白酶活性依次为鲤〉鲢〉鳙〉草鱼;淀粉酶活性依次为草鱼〉鲤〉鳙〉鲢。脂肪酶活性与食性的关系不明显。四种鱼消化酶的表达与消化道的组织结构特征相一致,消化道前2／5部位（G1、G2）的消化酶活性最高,是无胃鱼消化道的主要消化场所。消化道中央部位（G3）的消化酶活性次之,能将未消化完全的食糜进一步消化,而消化道后段（G4、G5）消化酶活性最低。可见,消化酶活性及消化功能呈递减形式,食物在消化道中随着消化、吸收,逐渐排出体外。本研究为鲤、鲢、草鱼、鳙4种鱼的营养生理学、高效饲料配比的研制及种质资源的科学管理提供理论依据。 相似文献
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超高压对草鱼肌肉超微结构与质构特性的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
研究了等静超高压对草鱼肌肉超微结构与质构特性的影响，并与猪肌肉用对照。结果表明：１．加压处理的草鱼肌肉，其超微结构中出现较明显的变化，如肌原纤维中Ａ带和Ｉ带的细丝均被破坏，粗丝相互聚集，出现间隙，Ｚ线变粗，不连续，Ｈ带和Ｍ线消失等，但肌原纤维的外形仍保持完整。２加压处理的草鱼肌肉，其外观无显著变化，色泽稍白，略有汁液流出，但质构特性与处理前无明显差别。 相似文献
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Ngr1(nogo-66 receptor)是在哺乳类上发现的一种神经元受体,可调节轴突的可塑性并抑制损伤中枢神经系统(CNS)的再生,最新研究还发现它是哺乳动物呼肠孤病毒(mammalian reovirus)的神经受体。草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)可引发草鱼(Ctenopharyngodon idellus)出血病导致高死亡率,开展GCRV受体相关研究可有助于了解病毒的致病机制。该研究在草鱼吻端成纤维细胞(PSF)中克隆到草鱼ngr1 c DNA序列(下文简称为gcngr1),发现其与哺乳动物呼肠孤病毒神经受体基因Ngr1有相似的结构序列;采用q RT-PCR方法检测该基因在PSF细胞的表达情况,结果显示受草鱼呼肠孤病毒(GCRV-GD108株)感染后gcngr1 m RNA的表达量显著上升,与病毒的增殖趋势基本一致;病毒经病毒抗体孵育后再感染PSF细胞,细胞中病毒的增殖水平下降,gcngr1m RNA的表达量也显著下降。该研究结果提示gcngr1与病毒的感染相关,为进一步分析gcngr1是否为GCRV神经元受体提供依据。 相似文献
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为了体外表达黑头软口鲦上皮瘤细胞(EPC)I型干扰素(IFN-1),本实验通过RTPCR从EPC中扩增ifn-1基因,构建重组表达质粒pET-32a-IFN-1,并转化到感受态细胞Transetta(DE3),体外纯化后检测其抗病毒活性。结果显示,ifn-1编码区大小为552 bp,编码184个氨基酸,与草鱼干扰素1(CiIFN1)亲缘关系最近。通过SDS-PAGE分析,重组表达质粒pET-32a-IFN-1在宿主菌中可明显表达约35 ku的融合蛋白条带,且部分呈可溶性表达,进而通过亲和纯化可溶性重组IFN-1(rIFN-1),免疫新西兰大白兔获得效价较高的抗IFN-1多克隆抗体,可用于检测细胞内源性的IFN-1。定量PCR显示rIFN-1与EPC细胞孵育可以诱导抗病毒蛋白Mx1的表达,并抑制鲤春病毒血症病毒(SVCV)引起的细胞病变(CPE)及SVCV的复制,表明rIFN-1具有抗病毒活性。 相似文献