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【目的】 分析乌鲁木齐及周边地区牛羊源金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的污染状况及常见毒力基因检测。【方法】 采集乌鲁木齐及周边地区牛养殖场和牛羊屠宰场752份样品(粪样、挤奶厅工具拭子、胴体拭子、屠宰工具拭子等),采用国家标准方法进行金黄色葡萄球菌分离和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的鉴定,检测10种常见毒力基因(sea、seb、sec、fnbA、fnbB、hla、hlb、clfa、pvl、tst)的编码情况。【结果】 共分离出26株金黄色葡萄球菌,分离率为3.46%,其中奶牛养殖场、牛屠宰场和羊屠宰场的分离率分别是4.39%、1.13%、3.72%、。其中有8株是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,占检出率的30.77%。毒力基因sea、seb、sec、fnbA、fnbB、hla、hlb、clfa、pvl、tst的检测率分别是11.54%、19.23%、3.85%、3.85%、23.08%、100%、53.85%、100%、0、15.38%,其中clfa和hla的检出率最高。 【结论】 新疆奶牛养殖场和牛羊屠宰场中均存在金黄色葡萄球菌,其中奶牛养殖场中MRSA的污染较严重,金黄色葡萄球菌主要编码hla和clfa 2种毒力基因。 相似文献
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《山东农业科学》2016,(12)
为了解生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌污染状况及产肠毒素特性,进而为金黄色葡萄球菌引起的食物中毒监测以及污染源追踪提供依据,本试验从山东省两个地市采集生鲜牛乳共152份,对其进行金黄色葡萄球菌检测,并对地市1样品进行产肠毒素检测。结果显示,152份样品共检出金黄色葡萄球菌阳性样品84份,检出率为55.26%,其中,地市1的114份样品中共检出被金黄色葡萄球菌污染的样品63份,检出率为55.26%;地市2的38份样品中共检出被金黄色葡萄球菌污染的样品21份,检出率为55.26%,且不同地区来源的样品受污染程度存在明显差异。对地市1的样品进行肠毒素检测,均未检出肠毒素。本研究结果表明,两个地市生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌污染范围较广,应进一步加强奶源管理,避免由其污染引起的食物中毒。 相似文献
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生鲜乳金黄色葡萄球菌污染来源调查及其耐药性 总被引：1，自引：0，他引：1
为考察贵阳市生鲜乳中金黄色葡萄球菌污染环节及其对药物的敏感性,采集贵阳市周边5个大型奶牛场及一个牛奶加工厂的乳区棉签拭子75份和各生产环节奶样310份,按国家标准(GB 4789.10—2010)分离鉴定金黄色葡萄球菌,并测定其对9种常用抗菌药物的敏感性。结果表明:生鲜乳中金黄色葡萄球菌污染主要来源于牛乳头内;传统的"弃前三把奶"工艺对降低生鲜乳中金黄色葡萄球菌污染的作用不明显;规范的乳区消毒可以有效地降低乳头外环境金黄色葡萄球菌对生鲜乳安全的影响;所调查奶牛场的金黄色葡萄球菌对磺胺类、β-内酰胺类和四环素类药物的耐药水平较高。 相似文献
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新疆集约化奶牛场隐性乳房炎流行病学和病原学研究 总被引：2，自引：1，他引：1
对分布于南北疆的4个集约化奶牛场进行了隐性乳房炎发病情况和病原学研究.通过对不同牛场采集的1 578份奶样的检测,发现隐性乳房炎平均头阳性率为64.75;,乳区阳性率为36.6;.对两个牛场跟踪检测,不同牛场隐性乳房炎高发季节不同;在4个乳区中,右侧前乳区和左侧后乳区阳性率高于其它两个乳区;21.6;～28.5;的被检牛为一个乳区阳性,33.2;～45.6;的被检牛呈多个乳区阳性.隐性乳房炎阳性奶样的细菌分离和生化实验表明,感染细菌种类主要为葡萄球菌(45.31;)、链球菌(34.15;)和大肠杆菌(11.9;);其中金黄色葡萄球菌分离率为29.93;、无乳链球菌为18.09;、停乳链球菌为12.83;,25.3;的奶样为混合感染,其中以葡萄球菌和链球菌的混合感染比例最高.对所分的3种菌进行小白鼠致病性实验,50;的实验菌株对小鼠无致病性. 相似文献
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从阿拉尔地区某奶牛场随机采取20头奶牛乳样共70份,经LMT诊断液检测,阴性乳样29份占41.43;,阳性乳样41份占58.57;.在阳性乳样中,弱阳性乳样18份占43.90;、阳性乳样11份占26.83;、强阳性乳样12份占29.27;.取阳性乳样、强阳性乳样进行细菌的分离鉴定,得到7种细菌共168株,表皮葡萄球菌69株、金黄色葡萄球菌35株、大肠杆菌29株、停乳链球菌13株、乳房链球菌10株、克雷伯氏菌9株、蜡样芽孢杆菌3株.通过动物攻毒试验结果表明,分离出的7种细菌均具有一定的致病力. 相似文献
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食品中金黄色葡萄球菌DNA环介导恒温扩增快速检测方法的建立与应用 总被引：5，自引：0，他引：5
【目的】金黄色葡萄球菌是一种人畜共患病的重要致病菌,主要经食品传播,引起食物中毒、组织及器官的化脓性炎症,建立快速、准确的检测方法对预防和控制金黄色葡萄球菌的传染具有重要意义。【方法】DNA环介导恒温扩增(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)是一种新颖的快速、高灵敏核酸扩增技术,本研究利用该技术建立金黄色葡萄球菌LAMP检测方法。基于金黄色葡萄球菌高度保守的Sa442基因序列,设计4条特异性LAMP扩增引物,两条外引物F3和B3及两条内引物FIP和BIP,在BstDNAPolymerase作用下,65℃恒温水浴中,对26个种类共45株细菌进行扩增,所试的20株金黄色葡萄球菌均为LAMP阳性,说明所设计的LAMP引物具有高度特异性。【结果】本LAMP方法对纯培养的金黄色葡萄球菌检测灵敏度为25CFU/mL,对污染食品中金黄色葡萄球菌的检测灵敏度为42CFU/g,40—60min内即可完成检测。检验检疫实践证明,利用本LAMP方法对958份肉类、蛋奶及其制品、人工污染样品等进行检测,检出115份LAMP阳性,与国标法(GB)检测结果一致。【结论】本LAMP方法操作简便、特异性强、灵敏度高,具有良好的实用性。 相似文献
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为了解奶牛乳房炎病畜生鲜乳中大肠杆菌污染状况及耐药性,于2019年从潍坊、青岛采集牛乳房炎病畜生鲜乳样品共计98份,对其中常见大肠杆菌的污染状况进行分析。结果表明,98份奶牛乳房炎病畜生鲜乳样品中,42份检出大肠杆菌,检出率为42.9%。对检出的大肠杆菌菌株进行10种抗生素的药敏试验,结果表明,检出的大肠杆菌对氨苄西林、多西环素、四环素有较高的耐药性,且多数为多重耐药菌株。综上,牛乳房炎病畜生鲜乳中大肠杆菌污染较为严重,建议相关部门进一步加强牛乳房炎病畜生鲜乳的监管,采取针对性风险监测措施。 相似文献
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金黄色葡萄球菌粘附素Fnbp A功能区基因的克隆和原核表达 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】克隆和表达奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤连蛋白连接蛋白A(Fnbp A)的功能基因。【方法】采集奶牛急性乳腺炎乳样,分离金黄色葡萄球菌,提取其DNA作为模板,利用设计合成的特异性引物,对金黄色葡萄球菌进行FnbpA功能基因的PCR扩增。回收目的基因并连接到T载体,鉴定后进行测序,然后将FnbpA基因连接到pET-32a(+)质粒中,经鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导后采用SDS-PAGE分析蛋白质的表达情况。【结果】PCR产物经电泳成像,仅金黄色葡萄球菌在1.7 kb处出现特异性条带,测序发现其与GenBank公布的FnbpA序列的同源性为98%;蛋白诱导表达SDS-PAGE分析发现,在80 ku处出现特异性条带。【结论】试验成功地克隆到FnbpA基因,并在大肠杆菌中获得高效表达,蛋白量为33.4%,为进一步研究金黄色葡萄球菌粘附素基因工程疫苗奠定了基础。 相似文献
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《山东农业科学》2019,(12):96-99
本研究于2015—2016年从山东省主要乳制品生产城市的生鲜乳罐装车中采集412份生鲜牛乳样品,对其进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定,并采用微量肉汤稀释法对金黄色葡萄球菌进行药物敏感性试验。结果表明,从412份生鲜牛乳中共分离到148株金黄色葡萄球菌,分离率为35.8%;金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率最高,为77.7%,其次为红霉素,耐药率为58.1%,对万古霉素和阿莫西林/克拉维酸的耐药率较低,分别为0.7%和1.4%,所有菌株对利奈唑胺表现为敏感。本研究结果可为山东地区生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌的监测与防控,以及养殖场中抗生素的规范使用提供参考。 相似文献
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调查陕西规模化牛场奶牛乳房炎常见病原微生物及其对药物的敏感性,为防治耐久性乳房炎提供参考。从陕西某牛场发病症状典型的乳房炎牛中,无菌操作采乳样20份,经细菌的生物学特性检验和生理生化试验,3份乳样中分离鉴定出大肠埃希菌(3/20),7份乳样中分离鉴定出金黄色葡萄球菌(7/20),14份乳样中分离鉴定出酵母菌(14/20),2份乳样中未分离出任何细菌和真菌,且6份乳样中同时分离鉴定出酵母菌和细菌(6/20)。分离细菌经抗生素敏感性试验,共同高度敏感抗生素为氯霉素、先锋噻肟、氧氟沙星等;共同耐药抗生素为环丙沙星、万古霉素、氧哌嗪霉素等,酵母菌菌对环丙沙星、万古霉素、氯霉素、先锋噻肟等抗生素均不敏感。检测确定引起该地区奶牛乳房炎的病原种类,同时筛选出这些病原敏感药物。 相似文献
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【目的】建立一种特异、灵敏的牛源幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)检测方法,为家畜感染幽门螺杆菌的流行病学调查鉴定提供支持。【方法】分别选取Hp的16SrRNA、UreA、glmM为靶基因设计特异性引物,以H.pylori动物模型适应菌株SS1株为标准菌株建立PCR检测方法,并进行PCR条件优化,运用所建立的最优PCR方法检测临床奶牛乳样和粪样中Hp的分布情况。【结果】PCR特异性试验结果显示,仅Hp SS1株能扩增出特异性条带,而对照菌株金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠杆菌及蜡样芽孢杆菌均无扩增条带。PCR灵敏度试验结果显示,16SrRNA、UreA、glmM基因在乳样中的最低检出浓度分别为101,103和103CFU/mL,在粪样中的最低检出浓度分别为101,104和104 CFU/mL。应用该PCR方法对采集自规模化养殖场及散养的共计41头奶牛的乳样和粪样进行检测,成功检出Hp DNA,靶基因16SrRNA、UreA和glmM序列与NCBI上所发表的J166和ATCC43504菌株序列的同源性均达98%以上。【结论】成功建立了特异、灵敏的牛源Hp的PCR检测方法,可以应用于临床奶牛乳样和粪样中Hp的检测。 相似文献
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<正>按照农业部要求和北京市农业局统一部署,2012年年初以来,北京市启动了生鲜乳质量安全监督监测工作。截至目前,全年监测工作结束,共监测生鲜乳收购站53个和奶牛养殖场51个,涉及871个生鲜乳样品,其中农业部检测机构检测620个生鲜乳样品,北京市检测机构检测251个生鲜乳样品,检测结果全部合格。 相似文献
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《塔里木大学学报》2017,(3)
【目的】探索分离自新疆南疆地区奶牛场乳房炎发病乳样中的表皮葡萄球菌抗生素耐药性与其生物膜形成能力间的相关性。【方法】本试验采用分子生物学方法对阳性乳样中表皮葡萄球菌进行鉴定,微量板半定量法检测表皮葡萄球菌的生物膜形成能力,二倍稀释法检测分离的表皮葡萄球菌对常规兽用抗生素(青霉素、链霉素和土霉素)的敏感性。卡平方(χ2)分析表皮葡萄球菌耐药性与生物膜形成能力之间的相关性。【结果】分离获得表皮葡萄球菌56株,其中生物膜形成阳性菌株28株。分离的56株表皮葡萄球菌均对链霉素耐药;25株对青霉素耐药,其中生物膜形成阳性菌株17株,占68%;21株对土霉素耐药,其中生物膜形成阳性菌株16株,占76%;经统计学分析,生物膜形成阳性菌株与阴性菌株对青霉素及土霉素的耐药率具有极显著差异(p0.01)。【结论】奶牛乳房炎性表皮葡萄球菌生物膜形成阳性菌株对常规兽用抗生素具有较强的耐药性,生物膜形成能力是表皮葡萄球菌耐药的重要原因。 相似文献
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PCR检测乳品中金黄色葡萄球菌 总被引：14，自引：0，他引：14
【目的】利用PCR技术,无需增菌，直接检测乳品中的金黄色葡萄球菌。【方法】通过溶剂提取的方法从人工样品中提取模板，以金黄色葡萄球菌耐热核酸酶基因（nuc）为靶基因，经过PCR扩增得到279 bp的产物。经过DNA测序证实该产物为目的扩增产物。采用PCR方法实际检测了乳品中的金黄色葡萄球菌，同时，与国标GB 4789.10-94方法及两种快速检测致病性金黄色葡萄球菌测试片Petrifilm RSA.Count Plate 及Baird-parker+RPF Agar进行了比较。【结果】PCR方法的灵敏度高，全脂乳和脱脂乳检测的检出限为10 CFU/ml，奶酪检测的检出限为55 CFU/g，可在6 h内完成对乳品中金黄色葡萄球菌的检测，比目前普遍采用的先增菌再进行PCR检测的方法缩短了12～24 h。与国标方法相比，PCR方法的符合率为94.3％，敏感性为100％。【结论】采用溶剂提取制备模板的方法可有效的用于PCR直接检测(无需增菌)乳及乳制品中的金黄色葡萄球菌。 相似文献
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奶牛乳房炎葡萄球菌的分离鉴定及耐药性检测 总被引：4，自引：0，他引：4
【目的】了解引起奶牛乳房炎的最主要病原菌葡萄球菌的耐药性,为奶牛乳房炎的防治提供参考依据。【方法】于2006~2007年在泰安地区5个规模化奶牛场,采集128份临床乳房炎奶牛乳样,用传统的细菌分离、培养和生化鉴定方法,对其中的葡萄球菌进行了分离,用K-B纸片扩散法对葡萄球菌的耐药性进行了检测调查。【结果】本次调查中共分离到29株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌14株(14/29,47.4%),产色葡萄球菌3株(3/29,10.3%),木糖葡萄球菌、腐生葡萄球菌、松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌和人葡萄球菌各2株(2/29,6.9%),头葡萄球菌和模仿葡萄球菌各1株(1/29,3.3%);葡萄球菌对头孢拉定和阿米卡星高度敏感,对临床上常用的林可霉素、红霉素、四环素、复合磺胺均存在不同程度的耐药性。金黄色葡萄球菌对万古霉素的平均抑菌圈直径为19.1 mm,凝固酶阴性葡萄球菌对万古霉素的平均抑菌圈直径为20.3 mm。【结论】金黄色葡萄球菌在分离葡萄球菌中仍占主导地位,万古霉素对葡萄球菌具有较强的体外抗菌活性,未发现耐药株。 相似文献
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新疆垦区奶牛乳房炎致病菌的调查 总被引：8，自引：0，他引：8
本试验选取新疆垦区7个试验牛场,经临床调查和试剂诊断,检测奶牛712头,采集奶牛乳房炎阳性乳样314份．其中,奶牛隐性乳房炎阳性检出率平均为36．3％,临床性奶牛乳房炎为16．7％．采集阳性奶样经实验室分离鉴定,革兰氏阳性菌仍是引起奶牛乳房炎的主要致病菌,但金色葡萄球菌已基本取代链球菌成为主要的致病菌,其检出率为78．98％．另外,常见环境性致病菌如沙门氏菌、大肠杆菌已明显减少,检出率仅为21．1％和9．24％．相反,绿脓杆菌和蜡样芽孢杆菌的检出率明显增加,其检出率为5．41％和11．15％,而且绿脓杆菌和隐球菌已经引起临床性乳房炎的爆发,其中隐球菌已经成为造成顽固性乳房炎的又一种新型病原。 相似文献
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《河南农业大学学报》2014,(5)
以金黄色葡萄球菌clfa基因和溶血性链球菌sdy基因为靶基因设计引物.通过对单个基因PCR和多重基因PCR扩增进行特异性、敏感性试验以及优化反应体系,建立了快速检测溶血性链球菌和金黄色葡萄球菌的双重PCR方法.在郑州市不同地区随机抽检126份生鲜猪肉样品,分别进行了双重PCR检测和常规微生物学检验.结果表明,建立的双重PCR方法特异性好,抗干扰能力强,灵敏度可达到102ng·L-1.在126个样品中检测出溶血性链球菌的样品数为7份,检出率为5.55%;检出金黄色葡萄球菌阳性的样品数为8份,检出率为6.35%. 相似文献