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为研制沙门氏菌类活疫苗活菌计数的参考疫苗,以期更科学地评价活菌计数结果的有效性,研究制备了一批仔猪副伤寒活疫苗作为参考疫苗候选物,对其性状、纯粹检验、真空度、剩余水分进行检测,对其运输稳定性、均一性进行测定,组织协作标定对参考疫苗候选物进行赋值,用协作标定的方法统计参考疫苗候选物在18个月的保存期,将参考疫苗初步应用于仔猪副伤寒活疫苗活菌计数的检验。结果表明,参考疫苗的性状、纯粹检验、剩余水分和真空度测定均符合《中国兽药典》的规定,均一性试验结果显示10瓶参考疫苗候选物计数结果的变异系数小于10%,说明其均一性良好。协作标定统计出参考疫苗候选物的赋值范围为(3.0,4.0)×109CFU/头份,保存期试验结果显示参考疫苗候选物在-70℃以下保存18个月菌数稳定。参考疫苗的初步应用显示本参考疫苗不仅可以为沙门氏菌类活疫苗活菌计数提供参照物,而且还可用于控制普通琼脂培养基的质量。 相似文献
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为了建立一种通过吸光度测定能够快速准确检测奶牛乳房炎疫苗中无乳链球菌抗原浓度的方法,本试验将血平板培养的无乳链球菌用生理盐水将菌苔洗下,稀释成不同浓度的细菌悬浮液,然后用平板计数法测定不同浓度菌液的活菌数,同时测定其相应的吸光度,进而研究二者之间的相关性,建立标准曲线。结果表明,无乳链球菌的活菌数与其吸光度呈直线线性相关,无乳链球菌菌液浓度与吸光度之间的回归方程为y＝7.5861x－0.0805,R2＝0.9735,通过测定细菌悬浮液的吸光度,可以快速计算出该菌的菌液浓度。笔者对发酵罐培养的5批无乳链球菌菌液进行了吸光度测定和传统平板计数方法的比较及验证,证明了吸光度测定法优于平板计数法,具有简单、快速、准确的特点。 相似文献
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《中国兽医杂志》2020,(5)
为了更加客观、科学地评价猪丹毒活疫苗活菌计数检验结果,在活菌计数检验中引入了参考品。研制并标定了一批猪丹毒活疫苗活菌计数的参考品,从性状、纯粹性、均一性、加速稳定性、运输稳定性、剩余水分测定、真空度等方面对参考品进行了评价,并对参考品的保存期限进行了探索。结果显示:参考品的性状、纯粹性、活菌计数、剩余水分含量、真空度均符合《中国兽药典》中猪丹毒活疫苗质量标准。通过协作标定,对参考品赋值为每头份含活菌数为8.5×10~8～12.5×10~8 CFU。均一性检验变异系数分别为7%和6%。参考品在夏季和冬季由泡沫盒加冰袋的方式进行运输不超过48 h,计数结果稳定。对参考品的保存期进行探索,发现参考品于-70℃保存时可在18个月内保持稳定。表明猪丹毒活疫苗活菌计数参考品符合国家标准物质的要求,可应用于检验。 相似文献
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通过对首届兽药职业技能大赛62名参赛选手大肠杆菌活菌计数结果进行分析,了解我国兽用生物制品生产企业活菌计数能力的整体水平。每名参赛选手发放大肠杆菌菌液1支．要求参赛选手在规定时间内进行活菌计数并提交计数结果。40％参赛选手活菌计数检验结果满意（25／62）;60％检验结果不满意（37／62）。此次技能大赛体现出我国兽用生物制品生产企业检验人员的活菌计数水平参差不齐,部分检验人员活菌计数能力有待进一步提高。 相似文献
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为比较检验员活菌计数能力及常量法和微量法在活菌计数应用中是否存在差异,8名检验员于同时、同环境中对同一细菌培养物采用常量法和微量法进行活菌计数,采用稳健统计方法对不同人员相同方法的计数结果进行统计,将检验结果分为“满意”、“可疑”和“不满意”;采用t检验法对使用不同方法对同一样品的计数结果进行统计,将结果分为“差异显著”和“差异不显著”。稳健统计方法表明,用常量法进行检测,有6名检验员的检验结果全部满意,而微量法的结果中只有2名检验员获得了全部满意的结果;t检验法表明常量法和微量法之间存在显著差异。稳健统计方法及t检验法统计结果显示,不能用微量法代替常量法进行检验,个别检验员的活菌计数能力有待进一步提高。 相似文献
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在猪丹毒、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗的效力检验中,需要进行动物攻毒保护试验。传统方法使用的是2~8 ℃保存的新鲜菌液对试验动物进行攻毒。本研究中使用的是低温保存的冻干菌液,并对冻干保存的菌数进行了测定和优化。结果表明,冻干保存的菌液能达到新鲜菌液同等的检验结果。同时,对冻干菌液保存期进行试验验证,发现细菌存活状态稳定。因此,在猪丹毒、多杀性巴氏杆菌病二联灭活疫苗效力检验中,可将新鲜的攻毒菌液冻干保存,用于攻毒保护试验,以避免每次繁重的新鲜菌液前期准备工作,并克服活菌数衰减所造成的检验结果不准确等问题。 相似文献
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《中国兽医杂志》2019,(9)
为了研制多杀性巴氏杆菌类活疫苗活菌计数的参考品,以期更科学的评价活菌计数结果的有效性。制备一批猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗为参考品候选物,对其性状、纯粹、真空度、剩余水分进行检测,对其运输稳定性、均一性进行测定,组织协作标定对参考品候选物进行定值,用协作标定的方法统计参考品候选物24个月的保存期,将参考品应用于多杀性巴氏杆菌类活疫苗活菌计数的检验。结果表明,参考品的性状、纯粹检验、剩余水分和真空度测定均符合《中国兽药典》的规定,均一性试验结果显示,10瓶参考品候选物计数结果的变异系数为5.4%,小于10%,说明其均一性良好。协作标定的赋值范围为(4.2～5.6)×10~8CFU/头份,保存期试验结果显示,参考品候选物在-70℃以下保存24个月菌数稳定。参考品的初步应用显示本参考品不仅可以为多杀性巴氏杆菌类活疫苗活菌计数提供参照物,而且可以用于控制多杀性巴氏杆菌类疫苗检验用马丁琼脂培养基的质量。 相似文献
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为建立一种快速测定副鸡禽杆菌菌液浓度的方法,本研究选取副鸡禽杆菌血清A、B、C型代表性菌株（CVCC254株、CVCC257株和CVCC256株）,培养制备菌液,分别在450nm、540nm、600nm、650nm波长测定其吸光度值（OD值）,同时测定活菌计数值。回归分析两组数据,获取回归方程及标准曲线,分析回归方程的测定系数（R2）和标准曲线的点线离散度,确定最适测定波长。再选取不同培养时间点（10h、12h、14h、16h、18h、20h）的菌液,在最适波长下测定其OD值并代入回归方程获取活菌数,同时采用活菌计数法获取活菌计数值,将两组数据使用SPSS 17.0软件进行统计分析,进一步验证分光光度法与活菌计数法测定菌液浓度的相关性。结果显示,3株菌液在600nm波长测定的OD值与活菌计数值之间均呈最佳的线性关系,确定其菌液浓度最适测定波长均为600nm,其回归方程分别为y=14.302x－0.1441（R2=0.9962）、y=14.464x－0.2746（R2=0.995）和y=14.681x－0.01326（R2=0.9989）,y为活菌计数值（×108 CFU/mL）,x为OD600值。3株培养至衰退期前的菌液在600nm波长测定的OD值代入回归方程计算获得的活菌数值与其活菌计数值无显著差异（P＞0.05）。研究结果表明,衰退期前副鸡禽杆菌菌液的分光光度法与活菌计数法具有良好的相关性。因此,该分光光度法可用于快速测定衰退期前副鸡禽杆菌菌液浓度。 相似文献
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在猪丹毒活疫苗生产中,笔者用氨水和氢氧化钠溶液分别控制猪丹毒杆菌培养液的pH值变化,同时设同条件,不调pH值组。用3种不同工艺分别生产3批制苗菌液。用活菌涂布计数法对9批菌液进行了活菌数比较,调节pH值的两组,菌液浓度有了较大的提高。用氨水溶液控制培养基的pH值较优于用氢氧化钠溶液控制培养基的pH值。将两种增菌方法制备6批菌液制成疫苗,经质量检验全部合格。 相似文献
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[目的]分析规模化驴场空气环境中细菌数量与种类,指导驴场防御和控制细菌性疾病的方向。[方法]从不同开放模式的驴舍用自然沉降法收集其内部空气中细菌样本及场区周边不同距离的空气细菌样本,使用平皿法对采集的细菌进行培养、计数、鉴别。[结果]驴场内空气中细菌总数的范围8.39×10~3~3.43×10~4CFU/m~3,保育驴舍（封闭式驴舍）的细菌总数高于分娩驴舍（半开放式驴舍）及种公驴舍（开放式驴舍）,其中种公驴舍细菌总数最低。驴场对周边空气环境的污染范围为200 m。主要优势菌落是葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌等。[结论]规模化驴场空气环境中的细菌种类繁多,驴舍内细菌数量与其开放方式有关,且细菌数量随距驴场距离的增加而减少。 相似文献
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建立Soleris微生物实时光电检测法检测生乳中菌落总数的快速测定方法,并将该方法与国标的平板计数法进行比较。结果表明：Soleris法检测生乳中菌落总数的标准曲线为y=－0.651 5x＋8.263 9（y为菌落总数（lg（CFU/mL））,x为胶体栓变色时间（h））,相关系数R2=－0.939 6,表明标准曲线相关性良好;重复性实验结果的相对标准偏差均小于5%;Soleris法与平板计数法测定结果的比较表明,2 种方法之间没有显著性差异（P＞0.05）。在本研究的实验条件下,Soleris法检测生乳中 相似文献
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The national standard pinella mildew element biological detection method was improved, using dry filter paper method instead of cylinder plate method, the potassium content of different samples of pinella mold were determined,and the extract composition, extraction time, the concentration of bacteria test and other factors influence on the test results of the established enramycin between concentration and the antibacterial circle diameter of linear equations was studied. The results showed that using acetone extraction liquid acetone (A:1 mol/mL HCl:water =35:12:56, pH value was adjusted to 3.0 with 1 mol/mL HCl) leaching provided sample, extraction time of 3.5 h could fully immersed test of enramycin. Use of biological indicator bacteria CMCC (B) 63501 spore count of 3.4×107 per mL of the measurement of living flat dish, the formation of the inhibitory circle edge rule was clear, good accuracy. Using dry filter paper method could effectively eliminate the extraction or dilute acidic fluid itself to detect strains inhibitory effect, and the utility model had the advantages of simple operation, good repeatability. It could be used for large quantities of samples of enramycin content determination.Enramycin standard solution at concentrations for 150~500 U/mL and its bacteriostatic circle diameter and valence have good linear regression.The resulting regression equation was Y=0.00944X+11.55344, the correlation coefficient was R=0.9962, the final effective range was 0.75~2.5 U, the measured results were more close to the true value.It could be used as an efficient enduracidin determination method, worthy of promotion and use. 相似文献
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试验对国家标准中恩拉霉素的生物检测方法进行了改进,以干燥滤纸片法代替管碟法对不同样品中的恩拉霉素含量进行了测定;并研究了浸提液组成、浸提时间、检定菌浓度等因素对检测结果的影响,建立了恩拉霉素浓度与抑菌圈直径之间的线性方程。研究结果表明,利用丙酮浸提液A（丙酮：1 mol/mL HCl：水=35：12：56,用1 mol/mL HCl将pH调至3.0）浸提供试品,浸提时间3.5 h,可以充分浸提供试品中的恩拉霉素;使用生物测定指示菌CMCC（B）63501芽孢数为3.4×107个/mL的平皿,形成的抑菌圈边缘规则清晰,准确度好;使用干燥滤纸片法可有效消除浸提液或酸性稀释液本身对检测菌株的抑制作用,且操作简单、重复性好,可以同时对大批量的样品进行恩拉霉素含量的测定。恩拉霉素标准溶液在浓度为150~500 U/mL的范围内,其产生的抑菌圈直径与效价有较好的线性回归性,所得回归方程：Y=0.00944X+11.55344,相关系数R=0.9962,最终有效区间是0.75~2.5 U,测得的结果更接近真实值,可作为一种高效、快速的恩拉霉素含量测定方法,值得推广和使用。 相似文献
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WANG Ling GUO Zhi-ting YANG Feng LI Hong-sheng WEI Xiao-juan ZHOU Xu-zheng 《中国畜牧兽医》2017,44(11):3365-3371
The purpose of this study was to validate the microbial limit test method for anticoccidial drug Dichroa febrifuga oral liquid (DFOL),and provide data base for its quality control and researching the new veterinary drug. The direct inoculation method was used to validate the antibacterial activity for DFOL, and the bacterial counting,determination of recovery rate and inspection of control bacteria were measured using a validated test condition and method (conventional method).The results showed that DFOL had no or faint bacteriostasis verified by validated test method, the determination and inspection of bacteria could be determined by conventional method. The normal plate counting were used to detect the amount of Escherichia coli,Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Candida albicans and Aspergillus niger in DFOL in which the recovery rate were all more than 70%,and the results were not disturbed by sample and diluents. The control bacteria including Escherichia coli,Salmonella paratyphi B,Staphylococcus aureus,and Pseudomonas aeruginosa were tested according to conventional method,whose growth were detected in the test group and positive control group, while no growth were detected in the negative control group and sample group. In conclusion,the microbial limit test method for DFOL had been validated in this study,and the conventional method could be applied to DFOL for bacteria,moulds and yeast counting as well as the inspection for control bacteria. The process of test was in accordance with the regulations of microbial limits test method,the method was convenient and simple,and the results was reliable. 相似文献
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本研究旨在验证抗球虫中药常山口服液的微生物限度检查法,为其质量控制、研发新兽药奠定基础。试验通过直接接种法考察常山口服液的抑菌活性,并采用验证过的试验条件和方法（常规法）进行细菌计数、回收率测定及控制菌的检查,建立常山口服液微生物限度检查方法,并进行验证试验。结果证实常山口服液无抑菌作用或抑菌作用极其微弱,可采用常规法建立检查方法。常山口服液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌及黑曲霉的加菌回收率均大于70%,且供试品和所用稀释剂对此结果无干扰。按常规方法对大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌进行控制菌验证检查发现,试验组、阳性对照组均检出相应的试验菌,阴性对照组和供试液组均未检出相应的试验菌。综上所述,常规法可用于常山口服液细菌、霉菌和酵母菌的计数检验,控制菌检查及微生物限度检查,试验过程符合微生物限度检查法规定,且方法简便,可操作性强,结果准确可靠。 相似文献
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猪胸膜肺炎放线杆菌浊度与细菌计数的关系 总被引：2，自引：0，他引：2
为了弄清猪胸膜肺炎放线杆菌生长特性、细菌悬液浊度与细菌计数的关系,从而也为探讨细菌致病机理及指导临床上细菌疫苗的生产等提供参考依据,利用地方流行优势菌株APP-7型,将其于TSB液体培养基中培养14 h,按1 h间隔动态取样,测定菌悬液的浊度值(OD630)并用平板法进行活菌计数。结果表明:细菌在接种后2 h进入对数生长期,并持续约3 h,然后进入稳定期。对细菌浊度和细菌计数进行相关性统计分析,发现两变量间存在着极显著相关(P<0.01),以细菌浊度为X,细菌数为Y,建立了曲线回归方程,即:Y=9.817×1014X5.817。 相似文献
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为探究辽宁省西丰县鹿场环境中细菌的分布及耐药性情况,本试验采集了鹿场粪便、饮水、空气、饲料等样品,进行了细菌的分离培养及鉴定,对分离到的菌株16S rDNA基因进行PCR扩增、测序分析,并对分选出的致病菌和条件致病菌进行药敏试验。结果显示,所测样品共分离纯化出27株菌,公鹿精饲料、母鹿精饲料、粗饲料和水的含菌量分别为1.0×105、8.7×104、2.7×107 CFU/g和2.9×104 CFU/mL,表明水和粗饲料不符合国家规定的养殖场环境卫生要求;16S rDNA基因序列在NCBI比对后,鉴定出有大肠埃希菌、志贺氏菌等15种不同菌株,其中致病菌和条件致病菌共13种,这13种细菌对呋喃唑酮、多黏菌素B和头孢氨苄等耐药,对头孢曲松、环丙沙星和丁胺卡那等药物敏感。本试验结果可为鹿场细菌性疾病的防控及用药提供参考依据。 相似文献
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van Overbeke I Chiers K Donne E Ducatelle R Haesebrouck F 《Journal of veterinary medicine. B, Infectious diseases and veterinary public health》2003,50(6):289-293
The efficacy of two bacterins containing an Actinobacillus pleuropneumoniae serotype 10 strain was evaluated. The bacterial cells constituting bacterin 1 and 2 were grown under nicotinamide adenine dinucleotide (NAD)-rich (low-adherence capacity to alveolar epithelial cell cultures) and NAD-restricted (high-adherence capacity to alveolar epithelial cell cultures) conditions, respectively. Ten pigs were vaccinated twice with the bacterin 1 and nine pigs with the bacterin 2. Ten control animals were injected twice with a saline solution. Three weeks after the second vaccination, all pigs were endobronchially inoculated with 106.5 colony-forming units (CFU) of an A. pleuropneumoniae serotype 10 strain. In the bacterin 1 and 2 group, three and two pigs died after inoculation, respectively. Only two pigs of the control group survived challenge. Surviving pigs were killed at 7 days after challenge. The percentage of pigs with severe lung lesions (> 10% of the lung affected) was 100% in the control group, 70% in the bacterin 1 group and 22% in the bacterin 2 group. Actinobacillus pleuropneumoniae was isolated from the lungs of all animals. The mean bacterial titres of the caudal lung lobes were 7.0 x 10(6) CFU/g in the control group, 6.3 x 10(5) CFU/g in the bacterin 1 group and 1.3 x 10(6) CFU/g in the bacterin 2 group. It was concluded that both bacterins induced partial protection against severe challenge. Furthermore, there are indications that the bacterin 2, containing A. pleuropneumoniae bacteria grown under conditions resulting in high in vitro adhesin, induced better protection than the bacterin 1. 相似文献
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通过将兔多杀性巴氏杆菌C51—17株菌液分装后置-80℃冻存的方法对菌液浓度进行预数,并与传统方法采用的将菌液置4℃保存过夜计算菌存率或通过测定菌液吸光值推算攻毒菌液浓度相比较。结果表明。用-80℃冻存保存方法估算的菌液浓度与实际浓度更接近,采用这种方法进行疫苗的效力检验,能确保对照成立,在兔多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗效力检验中可以采用-80℃冻存的方法进行攻毒菌液的预数。 相似文献