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1.
为提高新城疫临床诊断的准确率,建立了新城疫病毒浓缩方法,将粪便及脑、肺等器官组织病料中的新城疫病毒经特异性抗体致敏的金黄色葡萄球菌(SPA菌)吸附浓缩后,用RT-PCR进行检测。结果表明,所建立的新城疫病毒浓缩方法应用于临床诊断后,可显著提高检测敏感性,从而提高临床诊断的准确率。 相似文献
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为建立一种快速的新城疫病毒抗体检测方法,本研究以原核表达的重组HN蛋白作为诊断抗原,建立了检测新城疫病毒抗体的间接ELISA诊断方法.该方法检测AIV(H9亚型)、IBV、IBDV、EDSV 4种常见禽病病原的阳性血清均为阴性;检测灵敏度为1:12 800;批内重复性试验、批间重复性试验的变异系数分别小于5%和10%;与血凝抑制试验(HI)符合率为96.1%.本研究建立的NDV HN间接ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,为NDV的抗体检测及流行病学调查等快速诊断提供一种技术手段. 相似文献
3.
为了对目前流行的鸭新城疫进行快速诊断,应用蔗糖密度梯度离心纯化后的鸭新城疫病毒免疫6周龄雌性Balb/c小鼠,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合.采用ELISA方法筛选阳性细胞克隆,经3次亚克隆后获得一株能稳定分泌鸭新城疫病毒特异性单克隆抗体的细胞株2C1.以PEG纯化后的2C1腹水为捕获抗体,辛酸-硫酸铵纯化的兔抗鸭新城疫病毒多克隆抗体为第二抗体,HRP标记的羊抗兔抗体作为酶标抗体,建立了检测鸭新城疫病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法.结果表明,当2C1包被量为4μg/孔,鸭新城疫病毒1:10稀释,兔抗鸭新城疫病毒多抗作用量为0.1 μg/孔,HRP标记的羊抗兔二抗1:10 000倍稀释,每次作用时间为1h时,P/N比值最高,且阳性OD值最接近1.0.试验表明,该方法特异性好,不与IBV、ARV、GPV、DPV、DHV尿囊液及H5、H9标准阳性抗原发生反应;可以检测出0.2 μg纯化病毒,比传统的HA试验的敏感性至少高64倍;批间和批内变异系数均小于10%.本研究建立的双抗体夹心ELISA方法为鸭新城疫病毒的快速诊断奠定了基础. 相似文献
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《河南畜牧兽医(综合版)》1999,(12)
鸡新城疫病毒单抗及强毒感染快速诊断技术新城疫强毒感染的快速诊断成为多年未解决的世界性难题。本项目以3种不同毒力型的新城疫病毒为免疫原研制出多种单抗,从中筛选出两株单抗,建立单抗夹心聚乙二醇—酶联免疫吸附试验,可用于检测现场样品中存在的微量新城疫病病毒抗原,可以替代鉴定新城疫病毒毒力型所用的费时、费钱的常规生物试验。研制出的快速检测新城疫强毒感染的单抗诊断试剂盒已在6省市400多个鸡场几千万只鸡的群体中应用,挽回经济损失近亿元。该项目建立的快速检测新城疫强毒的单抗夹心聚乙二醇—酶联免疫吸附试验在程… 相似文献
5.
乳胶凝集试验检测鸡新城疫病毒血清抗体的研究 总被引:13,自引:1,他引:12
用硫酸铵沉淀、透析浓缩的鸡新城疫病毒(NDV)抗原致敏乳胶,然后所鸡新城疫阳性血清进行方阵滴定,选择出最佳致敏条件并制成新城疫病毒乳胶抗原,由此建立超乳胶凝集试验(LAT),用来检测新城疫血清抗体;用所建立的乳胶凝集试验(LAT)和血凝抑制试验(HI)同步检测69份鸡血清,结果乳胶凝集试验阳性62份,阴性7份;血凝抑制试验阳性66份,阴性3份,两者的总符合率为94.2%(65/69),且两者的检出率基本一致。结果表明,乳胶凝集试验具有操作简便、快速、敏感性高、特异性强且可用于现场检测等优点,是一种适合基层单位用来检测鸡新城疫病毒血清抗体的新方法。 相似文献
6.
ELISA检测鸡新城疫病毒特异性IgM抗体的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
以新城疫病毒单克隆抗体包被板,用10%小牛血清-PBS封闭后,捕获尿囊液中的新城疫病毒作固相抗原.在此板上应用酶标抗鸡IgM单克隆抗体进行间接ELISA试验检侧鸡血清中新城疫病毒的特异性IgM抗体.试验证明该方法特异性强、敏惑性高.兔抗新城疫病毒阳性血清可特异性阻断反应,将新城疫病IgM阳性血清用2-ME处理可使ELISA反应呈阴性,与禽源多杀性巴氏杆菌鸡IgM阳性血清、鸡传染性支气管炎病毒IgM阳性血清无交叉反应.该试验可检测到La Sota免疫后3天鸡血清中的特异性IgM,对鸡新城疫病毒IgM阳性血清的检测效价可达1:320以上,并可检测到临床新城疫病鸡血清中的特异性IgM抗体. 相似文献
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