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细菌内毒素检查法在我国兽用注射药品质量控制中的应用 总被引：1，自引：0，他引：1
细菌内毒素检查法是利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应,以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种体外检测方法.与传统家兔热原检查法相比,该法具有简便、快速、灵敏、准确、重现性好、经济等优点.细菌内毒素检查法在国内外人用注射药品及兽用注射药品质量控制中的应用越来越广泛.目前,我国只有部分兽用注射药品采用该法进行细菌内毒素检测.随着研究的进一步深入,该方法必将成为我国兽用注射药品中检测细菌内毒素的主要方法,在兽用注射药品质量控制中具有广阔的应用前景. 相似文献
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[目的 ]比较气相色谱-串联质谱法(GC-MSMS)与鲎试验(LAL)在检测畜禽舍空气内毒素中的应用效果及相关性,以及气载内毒素是否对环境和饲养人员健康构成危害。[方法 ]通过国际标准AGI-30液体冲击式空气采样器,在4个养殖场16个畜禽舍采集空气样品,采用GC-MSMS与LAL测定空气细菌内毒素浓度。[结果 ]LAL测定的牛舍、猪舍、羊舍和禽舍空气细菌内毒素浓度中间值分别为1.85×10~5 EU/m~3、2.76×10~6 EU/m~3、4.82×10~5 EU/m~3、6.55×10~6 EU/m~3;而GC-MSMS测定的分别为3.3×10~4 EU/m~3、1.26×10~5 EU/m~3、2.4×10~4EU/m~3和8.21×10~5 EU/m~3。GC-MSMS在禽舍检测出的空气内毒素浓度显著大于其他畜舍(p0.05)。用LAL和GC-MSMS分析测定的空气中内毒素浓度超过了对大多数动物和人体有威胁的阈限值1.0×10~3EU/m~3。用GCMSMS与LAL测定的禽舍和羊舍空气样品中细菌内毒素浓度之间存在显著相关(p0.05),而牛舍和猪舍之间浓度没有显著相关性。GC-MSMS主要检测存在于动物舍空气内毒素中含有C_(14)-C_(18)链的3-羟基脂肪酸。LAL测定的内毒素浓度与含有C_(14)-C_(16)链3-羟基脂肪酸量之间有显著相关(p0.05)。[结论 ]GC-MSMS与LAL联合应用可以提高检测气载内毒素的准确性,且本研究表明畜禽舍中检测到的空气细菌内毒素浓度可以危害人类和家畜动物健康。 相似文献
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鲎血液中因含有铜离子而成蓝色,鲎试剂是从蓝色血液中分离出的变形细胞,再提取细胞溶解物经低温冷冻干燥而成的生物试剂,专用于细菌内毒素检测.鲎试验法可准确、快速地检测人体内部组织是否因细菌感染而致病. 相似文献
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为调查我国当前主流饲喂方式下奶牛静脉血内毒素浓度的范围及内毒素浓度与产奶量的相关性,本试验首先验证了应用鲎试剂法定量奶牛静脉血中内毒素浓度的可行性,在此基础上,分别检测了安徽牧场1(60头,饲粮精粗比45∶55)、江苏牧场(15头,按产奶量高低精粗比分别为20∶80、45∶55、50∶50)和安徽牧场2(14头,饲粮精粗比70∶30)共89头奶牛的尾静脉血中内毒素浓度,并进行了内毒素浓度与产奶量的相关性分析.结果表明:鲎试剂法可有效检测奶牛静脉血中内毒素浓度,3个牧场奶牛静脉血中内毒素浓度高低不等,在0～ 1.50 EU/mL范围内.奶牛静脉血中内毒素浓度与产奶量之间的相关性皆不显著(P＞0.05),但安徽牧场2的相关系数(0.195 2)大于安徽牧场1(0.020 5)和江苏牧场(0.037 6).结果提示,鲎试剂法可用于定量检测奶牛血中内毒素浓度,在我国当前的饲喂方式下,奶牛血液中普遍含有内毒素,静脉血内毒素浓度与产奶量无显著相关性. 相似文献
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为调查我国当前主流饲喂方式下奶牛静脉血内毒素浓度的范围及内毒素浓度与产奶量的相关性,本试验首先验证了应用鲎试剂法定量奶牛静脉血中内毒素浓度的可行性,在此基础上,分别检测了安徽牧场 １（６０头,饲粮精粗比 ４５∶５５）、江苏牧场（１５头,按产奶量高低精粗比分别为 ２０∶８０、４５∶５５、５０∶５０）和安徽牧场 ２（１４头,饲粮精粗比 ７０∶３０）共 ８９头奶牛的尾静脉血中内毒素浓度,并进行了内毒素浓度与产奶量的相关性分析。结果表明：鲎试剂法可有效检测奶牛静脉血中内毒素浓度,３个牧场奶牛静脉血中内毒素浓度高低不等,在 ０～１．５０ＥＵ／ｍＬ范围内。奶牛静脉血中内毒素浓度与产奶量之间的相关性皆不显著（Ｐ＞０．０５）,但安徽牧场 ２的相关系数（０．１９５２）大于安徽牧场 １（０．０２０５）和江苏牧场（０．０３７６）。结果提示,鲎试剂法可用于定量检测奶牛血中内毒素浓度,在我国当前的饲喂方式下,奶牛血液中普遍含有内毒素,静脉血内毒素浓度与产奶量无显著相关性。 相似文献
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对不同鲜度的猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉和鱼肉进行活菌总数、革兰氏阴性菌数、大肠菌群数及挥发性直基氮（TVB－N）测定，并与LAL试验（鲎变形细胞溶解物试验）进行平行对比研究，证实肉品的鲜度与其细菌总数、革兰氏阴性菌数及LAL指数呈负相关性。应用LAL试验可在短时间（1－2小时）内快速判定肉品的细菌污染程度及鲜度，比传统的细菌培养计数法大大缩短了时间，适合现场大批量肉品细菌污染程度及鲜度的快速检测。 相似文献
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《中国畜牧兽医文摘》2012,(11)
目的:验证鲎试验检查脂肪乳注射液中细菌内毒素的可行性。方法:按照2010年版《中国药典》细菌内毒素检查方法,用2个厂家的鲎试剂对脂肪乳注射液进行研究。结果:用λ为0.5EU/ml的鲎试剂检测细菌内毒素可行、有效。结论:细菌内毒素检查法(凝胶法)可代替兔热原法控制脂肪乳注射液的产品质量。 相似文献
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杨秀玉 《中国预防兽医学报》2009,31(12)
为检测转移因子(TF)注射液中细菌内毒素,本研究采用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的凝胶法对国内1个生物制品厂的TF注射液样品进行了检测,实验结果表明当TF注射液稀释至0.025 mg/mL时,对鲎试剂的凝集反应无干扰作用.因此,该方法适用于TF注射液中细菌内毒素检测,并可以用于该项生物制品的质量监控. 相似文献
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动物用质粒DNA内毒素去除方法的建立及其质量检验 总被引：5，自引：0，他引：5
用自行改进设计的TritonX-114方法去除动物用重组质粒DNA中的内毒素,鲎试剂检测方法确定每毫克质粒DNA中内毒素的含量为50 EU.将3种不同方法制备的重组质粒pEGFPNl包裹后转染COS-7、MDCK和Marc145细胞,结果表明,经TritonX-114去除内毒素后的质粒DNA(A)与无热源质粒提取试剂盒制备的质粒DNA(B)的转染效率相当,比未经内毒素去除的质粒DNA(C)的转染效率高.将上述3种方法制备的pcDNAlacZ经PEI包裹后尾静脉注射小鼠.注射后每隔2 d扑杀小鼠,取其心、肝、脾、肺和肾组织,定量检测β-半乳糖苷酶的表达和持续时间,结果显示报告基因仅在小鼠的心、脾和肝组织中表达至第8天,A与B的表达水平接近,且明显高于C制备的pcDNALacZ的表达水平,提示经TritonX-114去除内毒素后的质枉DNA可提高转染效率和表达水平.多种动物体内注射重组质粒后,无体温升高等异常-临床表征,进一步说明了使用经TritonX-114去除内毒素的质粒DNA具备良好的安全性. 相似文献
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《养猪》2015,(2)
前腔静脉采集试验组(腹泻组)与对照组(不腹泻组)母猪和仔猪血液,用LAL试剂(鲎试剂)测定血液内毒素含量,用分光光度法测定D-乳酸浓度和二胺氧化酶活性。结果表明,试验组母猪血液内毒素含量平均为1.978 EU/m L,比对照组1.007 EU/m L高96.43%,说明母猪体内高含量的内毒素是引起新生仔猪腹泻的原因之一。试验组仔猪血液内毒素含量为1.125 EU/m L,比对照组0.276 EU/m L高307.61%,说明仔猪体内较高含量的内毒素是引起仔猪腹泻的直接原因。试验组仔猪血浆D-乳酸含量达12.33μg/m L,比对照组仔猪血浆D-乳酸含量8.17μg/m L高4.16μg/m L。试验组仔猪血浆二胺氧化酶活性9.12 U/L,比对照组仔猪血浆二胺氧化酶活性5.63 U/L高3.49 U/L,说明腹泻仔猪肠黏膜屏障受到一定程度的破坏。 相似文献
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参照《中国兽药典》2000版收载的细菌内毒素检查法，验证了硫酸卡那霉素注射液的细菌内毒素检查法。通过干扰试验证明，硫酸卡那霉素注射液对鲎试剂的凝集反应无干扰作用，用灵敏度为0．25EU／mL的鲎试剂检查细菌内毒素的方法可行、有效。可以用细菌内毒素检查法替代家兔热原检查法来检测硫酸卡那霉素注射液的热原。 相似文献
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葛宝伟 《中国预防兽医学报》1991,(6)
经东方鲎试剂检测,在X结肠炎马(10匹)或骡(5匹)的血清及血中“X原虫”的裂解物内均含有内毒素,且阳性稀释倍数均在10倍以上;在健康带“X原虫”马(3匹)或骡(3匹)血中未检测到内毒素,虽然在有的健康带“X原虫”马或骡血中“X原虫”的裂解物内检测到内毒素,但经10倍稀释后即变为阴性。由此可见,经东方鲎试乳检测,血中“X原虫”的裂解物稀释10倍以上为阳性,同时血清检测也为阳性的马或骡,即为X结肠炎患畜。 相似文献
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为研究乳品中内毒素的浓度范围,本研究检测了不同牛奶样品中内毒素的浓度和细菌总数,分析了牛奶中内毒素的浓度及其与细菌污染的关系,并对来自牛场的107份鲜奶样品和市售的乳制品进行了检测。结果表明,鲎试剂检测法可用于牛奶内毒素的检测,但不能用于判断牛奶中细菌含量的高低;85.1%(87/107)的鲜奶样品的内毒素浓度低于300EU/mL,5.6%(6/107)的鲜奶样品内毒素浓度超过500EU/mL;不同厂家、不同类别的乳制品内毒素浓度差异较大。本研究为奶制品的安全检验提供了参考。 相似文献