猪繁殖与呼吸综合征病毒强/弱毒感染PAM细胞生物学特性比较分析     

朱建平  周艳君  王亚欣  虞凌雪  吴玉璐  童武  姜一峰  朱礼倩  于海  童光志 《中国动物传染病学报》2012,(1):32-37

为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)强、弱毒株在PAM细胞上的增殖特性,本研究在体外分离培养了健康猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM),然后分别用高致病性PRRSV强毒HuN4株和弱毒疫苗HuN4-F112株感染PAM细胞,细胞病变观察和间接免疫荧光检测结果显示,二者在体外均可以感染PAM细胞,其中强毒HuN4株感染PAM细胞CPE较为明显。在两个毒株感染PAM细胞后12、24、36、48、60h分别收获病毒感染的细胞,利用抗PRRSV N蛋白单抗进行Western blot分析检测病毒核蛋白在不同时间表达量的变化,结果表明,强毒株在感染PAM细胞的早期,N蛋白合成表达量明显高于弱毒疫苗株,而弱毒疫苗株在感染Macr-145细胞早期,N蛋白的合成量则明显优于强毒株。比较HuN4株与HuN4-F112株在PAM细胞和Marc-145细胞的生长曲线,结果显示强、弱毒在PAM细胞和Marc-145细胞生长趋势存在明显差异,其中强毒HuN4株在PAM细胞上增殖能力明显强于弱毒株,而弱毒HuN4-F112株在Marc-145细胞上的增殖能力明显强于其在PAM细胞上的增殖能力,表明PRRSV强毒株对靶细胞PAM的感染能力较强,弱毒疫苗株对其感染能力相对较弱。本研究为深入了解PRRSV强毒株与弱毒疫苗株的致病性差异提供了理论依据。  相似文献   

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株及其致弱过程中的不同代次病毒的分子特征分析     

周艳君  田志军  郝晓芳  安同庆  于海  李国新  陈瑾  彭金美  童光志 《中国兽医寄生虫病》2011,19(1):1-10

为了追踪高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syn-drome virus,HP-PRRSV）毒力逐渐减弱的分子轨迹,我们以HP-PRRSV亲本毒HuN4株及其系列传代致弱毒株为研究对象,对HuN4株及其不同代次毒株其全基因序列进行了序列比较分析。结果显示由高致病性的亲本毒HuN4株到无致病性的F112代的疫苗毒,共有65个核苷酸发生突变,其中导致41个氨基酸发生突变,这些突变的氨基酸分散性的存在于不同基因区域。与已经报道的高致病性JXA1株及其致弱毒株JXA80株相比较,可以看到两个强毒株毒力致弱的演变轨迹并不完全相同,二者之间不仅氨基酸突变数量不一致,而且突变氨基酸的位置也不完全相同,但其共同特点是由强毒株到弱毒株的变化过程中,突变率较高的结构蛋白相一致,突变率较高的非结构蛋白基本一致。分析结果提示我们决定高HP-PRRSV毒力强弱的因素可能不是由单个氨基酸的突变来决定的,推测是由一个基因或多个基因或多种因素共同造成的,同时也使我们认识到PRRSV的非结构蛋白区在病毒毒力变化中可能发挥重要作用。  相似文献   

应用灭光定量RT-PCR方法检测PRRSV变异株在仔猪体内动态分布   总被引：1，自引：0，他引：1  

荣福龙  刘永刚  孙广力  王淑杰  王洪峰  石文达  李丽琴  徐明明  孙刚  田志军  蔡雪辉 《中国预防兽医学报》2010,11(9)

为进一步了解高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株(HuN4株)在体内的动态分布规律和特点,探讨病毒对组织器官的嗜性,本研究将HuN4株和细胞传代致弱毒株HuN4-F65人工感染40日龄健康仔猪,分别于感染后1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、21 d和28 d各迫杀2头,并应用建立的荧光定量RT-PCR方法对脑、颌下淋巴结、扁桃体、肺脏、肝脏和十二指肠等组织及血清中的PRRSV进行定量检测.结果显示:感染后HuN4组各器官病毒载量比HuN4-F65组高100倍,病毒栽量峰值期出现在感染后7 d,随后呈下降趋势.HuN4株在仔猪体内分布广泛,在21 d的试验期内持续存在,并且各器官的病毒载量呈正态分布规律;而HuN4-F65株血清病毒载量较低,并且集中在单核巨噬细胞相对密集的扁桃体和颌下淋巴结,与HuN4株主要嗜性器官肺脏相比发生了改变.  相似文献   

高致病性PRRS活疫苗(HuN4-F112株)抗体对Ⅱ型不同亚群PRRSV的中和效果   总被引：2，自引：0，他引：2  

孟甄祥  安同庆  陈家锃  宫大庆  冷超粮  刘飞  李登云  彭金美  孙艳  吴玉全  吴江  郭娟娟  杨永倩  童光志  田志军 《中国预防兽医学报》2012,(5):401-404

为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)活疫苗(HuN4-F112株)诱导的抗体对II型不同亚群PRRSV的中和作用,本研究将10头PRRSV抗原、抗体阴性的6周龄仔猪,每头仔猪肌肉注射1头份疫苗(106.0TCID50/mL),每周采血并分离血清,检测该血清对II型PRRSV第1、2、4亚群的代表病毒株勃林格PRRSV活疫苗(VR-2332株)、PRRSV活疫苗(CH-1R株)和HP-PRRSV活疫苗(HuN4-F112株)的中和效价。实验结果显示,仔猪免疫3周后开始产生针对HuN4-F112的中和抗体,11周至22周抗体水平达到高峰,抗体持续至少25周,但只有少数免疫猪在几个时间点的血清对VR-2332和CH-1R疫苗株具有血清交叉中和作用,而且中和效价较低。  相似文献   

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株致弱毒株特异性抗原表位的鉴定     

姜一峰  周艳君  田志军  安同庆  肖燕  韦天超  王瑜  彭金美  于海  李国新  闫丽萍  张善瑞  童光志 《中国兽医寄生虫病》2009,17(3):1-7

通过对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virtls,Hp-PRRSV）HuN4株亲本毒及其不同代次传代毒株Nsp2（Nonstnduralprotein2）蛋白氨基酸序列比较分析,发现不同代次的Nsp2蛋白存在4处氨基酸点突变,针对每个突变点分别人工合成编码短肽的核苷酸序列,经原核表达后进行Western blot分析。结果表明表达的融合蛋白F65-11（^749KGEPvsdqpak^759）能够特异性的与HuN4-F40、HuN4-F65和HuN4-F112感染猪的血清发生反应,而与HuN4 F5感染猪的阳性血清和CH-1a株阳性血清不发生反应,证实第4个氨基酸点突变（S754）处存在一个免疫优势抗原表位。将该表位肽段由N端和C端逐步缩短继续鉴定,当N端缩短到第5个氨基酸（^754SDQPAK^759）C端缩短到第3个氨基酸（^749KGEPVSDQ^757）时,表达的融合蛋白不能与PRRSV阳性血清反应,最终推测该抗原表位必需氨基酸为^753VSDQ^756。选取GenBank中提交的部分高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的Nsp2氨基酸序列,对该表位氨基酸所在位置进行序列比较,分析结果显示位于Nsp2蛋白749→759位氨基酸序列高度保守,F65—11变异位点C^754→7^754为HuN4株系列传代毒株所特有。本研究结果证实抗原表位F65—11可以作为鉴别HuN4-F112弱毒疫苗所诱导产生的特异性抗体的候选抗原。  相似文献   

高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(HuN4-F112株)诱导特异性IFN-γ~+T细胞反应的研究     

吴玉全  孟甄祥  杨永倩  陈家锃  吴江  冷超粮  孙艳  彭金美  安同庆  童光志  田志军 《中国预防兽医学报》2012,(6):476-479

为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)活疫苗(HuN4-F112株)诱导的特异性IFN-γ+T细胞反应与其保护作用的相关性,本研究将25头45日龄PRRSV阴性健康仔猪随机均分为5组,第1～3组分别于0 d、7 d、14 d免疫HuN4-F112疫苗(1头份/头,106.0TCID50),第4组为攻毒对照组,第1～4组于21 d用PRRSV强毒株HuN4-F5攻毒(3 mL/头,104.0TCID50),第5组为空白对照组。疫苗免疫后1周～2周产生部分保护,3周产生完全保护,第1～4组保护率分别为5/5、2/5、2/5和0/5。中和抗体检测显示免疫组免疫后7 d和14 d所有猪只均未检测到中和抗体,免疫后第21 d第1组4头猪检测到低效价(≤1∶8)的中和抗体。疫苗免疫后血清中IFN-γ含量略有升高,但变化不大,整体都处于较低的水平。采用酶联免疫斑点技术(ELISpot)检测PRRSV特异性IFN-γ+T细胞反应。免疫组免疫后7 d、14 d、21 d百万外周血单个核细胞中IFN-γ+T细胞频数分别为0±0、0±2、5±8,组间和组内统计分析显示差异不显著。结果表明在HuN4-F112株疫苗早期保护中,IFN-γ参与的特异性细胞免疫反应较弱,在早期免疫阶段难以发挥主要作用。本研究为了解PRRSV疫苗免疫保护机制提供参考,同时,也提示需要采用更多的指标和方法来评价该疫苗诱导的免疫反应。  相似文献   

表达猪瘟病毒E2蛋白重组猪繁殖与呼吸道综合征病毒的研究     

童武  周艳君  徐彦召  姜一峰  王亚欣  张善瑞  朱建平  虞凌雪  孙晶  陈焕春  童光志 《中国预防兽医学报》2012,(7):505-509

为构建表达猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白重组猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRSV),本研究首先利用高致病性PRRSV弱毒疫苗HuN4-F112株的感染性分子克隆作为平台,构建了一个在nsp2区有缺失的感染性分子克隆,命名为pHuN4-F112-△480-620。以pHuN4-F112-△480-620作为载体,采用突变PCR的方法将CSFV的主要保护性抗原E2基因1 bp～9 99 bp,1 bp～600 bp,1 bp～330 bp及256 bp～330 bp基因片段分别插到nsp2中aa 480～aa 620位氨基酸缺失编码区域。结果显示,插入完整E2基因或较大E2基因片段的重组PRRSV cDNA质粒均未能拯救出病毒,只有插入较小的E2基因片段(256 bp～330 bp)的重组病毒cDNA质粒成功地拯救出了重组病毒rPRRSV-F112-E2(256-330),拯救的病毒能够在MARC-145细胞上引起明显的细胞病变,而且生长速度明显高于其亲本病毒,间接荧光检测表明该重组病毒能够表达外源基因。  相似文献   

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒ORF1a、ORF1b、ORF2-ORF7片段互换嵌合病毒的构建及其生物学特性的分析     

姜一峰  周艳君  王亚欣  朱建平  徐彦召  童武  虞凌雪  童光志 《中国预防兽医学报》2012,34(1):1-5

为研究高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)强弱毒之间毒力差异的分子基础,本实验分别以HP-PRRSV强毒HuN-F5株及其传代致弱的疫苗病毒株HuN4-F112为亲本病毒,利用反向遗传操作技术分别将ORF1a、ORF1b或ORF2-7编码序列在强弱毒之间互换。将6种含有不同嵌合基因的全长病毒基因组的重组质粒体外转录后转染BHK-21细胞,然后在Marc-145细胞中传代,拯救的重组病毒经RT-PCR、测序和免疫荧光鉴定,并分别命名为rHuN4-F5-ORF1a、rHuN4-F5-ORF1b、rHuN4-F5-ORF2-7(以强毒为骨架)和rHuN4-F112-ORF1a、rHuN4-F112-ORF1b、rHuN4-F112-ORF2-7(以弱毒为骨架)。进一步测定这些病毒在Marc-145上的生长曲线,结果显示:以强毒为骨架的嵌合病毒rHuN4-F5-ORF1a生长滴度显著高于亲本强毒rHuN4-F5,而以弱毒为骨架的嵌合病毒rHuN4-F112-ORF1a在细胞上的生长滴度低于其亲本弱毒rHuN4-F112,其他片段替换对病毒在细胞上的生长没有明显影响。本实验结果提示ORF1a对于PRRSV在体外细胞培养上的生长调节起重要作用。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染肺泡巨噬细胞后差异表达膜蛋白的鉴定与分析     

张玉娇  高飞  曲泽慧  姜一峰  周艳君  虞凌雪  李丽薇  赵款  童光志 《中国动物传染病学报》2019,(3):1-8

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是危害养猪业发展的重要传染病之一。2006年我国首次爆发高致病性PRRS(highly-pathogenicPRRS,HP-PRRS),与经典的PRRS相比,HP-PRRS发病率和死亡率均显著升高。目前,对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(highly-pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus,HP-PRRSV)引起的高发病率和高死亡率的机制仍不清楚。本研究利用1MOI的EGFP标记的HP-PRRSV毒株HuN4(rHuN4-EGFP)和其体外传代致弱毒株HuN4-F112(rHuN4-F112-EGFP)分别感染肺泡巨噬细胞(pulmonaryalveolarmacrophage,PAM),24h后通过流式细胞术,从FITC通道收集被PRRSV强弱毒感染的PAM,提取膜蛋白进行Shotgun质谱分析。试验最终获得82个在强弱毒感染PAM过程中存在差异表达的膜蛋白。感染rHuN4-EGFP的样品与未感染样品相比,有72个蛋白特异表达;感染rHuN4-F112-EGFP的样品与未感染样品相比,有12个蛋白特异表达。通过GO分析发现,这些蛋白主要参与代谢、生物调节与细胞加工过程,大多数蛋白具有结合、催化活性。进一步在MARC-145细胞上过表达部分差异膜蛋白,发现其中前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9(proprotein coverteases subtilism/kexin 9,PCSK9)能明显抑制PRRSV强毒株和弱毒株的复制,Clusterin、Apoliprotein C-II能促进PRRSV强毒株复制。本研究表明利用Shotgun质谱技术鉴定出的差异表达膜蛋白对PRRSV复制有影响,深入分析PRRSV感染后差异表达的膜蛋白变化将有利于进一步明确其致病机制。  相似文献   

猪繁殖和呼吸综合征病毒HuN4株nsp9、nsp10、nsp11对毒力影响的研究     

姜一峰  周艳君  王亚欣  朱建平  虞凌雪  徐彦召  童武  童光志 《中国兽医寄生虫病》2011,19(6):1-6

为研究高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒非结构蛋白对病毒毒力的影响,本研究通过反向遗传操作技术将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株的非结构蛋白编码区nsp9、nsp10、nsp11分别置换弱毒疫苗株HuN4-F112中的相应片段,经间接免疫荧光鉴定拯救的重组病毒,分别命名为rHuN4-F112-nsp9、rHuN4-F112-nsp10、rHuN4-F112-nsp11,测序证实HuN4强毒nsp9、nsp10、nsp11片段正确替换入HuN4-F112骨架。拯救病毒在Marc-145细胞上的生长曲线显示,rHuN4-F112-nsp9和rHuN4-F112-nsp10在前24 h的复制速度明显高于rHuN4-F112-nsp11和拯救的母源毒rHuN4-F112,36 h后无明显差别。将拯救病毒以105TCID50剂量接种仔猪,对体温、临床症状、病毒血症、组织器官病变情况进行观察和检测。结果显示,拯救病毒rHuN4-F112-nsp9、rHuN4-F112 nsp10、rHuN4-F112 nsp11在致病性、发热以及病毒血症强度上与rHuN4-F112无显著差异,提示单独nsp9、nsp10、nsp11对病毒致病性以及病毒在体内的复制无影响。  相似文献   

Complete Genome Comparison and Analysis between Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Parental and Its Attenuated Strains     

WANG Ye-hua  ZHANG Xin-xin  SONG Qing-qing  LI Yu-he  GONG Li-na  GUAN Ping-yuan 《中国畜牧兽医》2016,43(7):1709-1716

To study the attenuation molecular basis of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV),whole genomes of PRRSV JXA1-5 (parental strain) and JXA1-86 (attenuated strain) were sequenced,compared and analyzed.And genomic sequences of JXA1/JXA1-86 were compared with the other two pairs of virulent parental/attenuated vaccine strains.The results showed that there was higher amino acid mutation rate in structural proteins among the three pairs of strains indicating that PRRSV JXA1 strain virulence changes were more related to structure proteins variations.Compared with JXA1,the amino acids encoding Nsp5,Nsp6,Nsp8,Nsp12,M and N proteins of JXA1-86 strain did not change,suggesting that virulence attenuating might not be relevant to those proteins.The genomic sequences of each generation PRRSV sequence were compared and analyzed,and the results showed that the variations among A₉₂₈V,I₁₁₅₅M,E₁₆₂₉D in ORF1a,I₁₁₈V in GP2,H₇₉N in GP3,I₁₂₄V in GP4 and K₅₉N in GP5 between 70th and 86th generations were found,which turned out that virulence attenuating might be associate with those variations.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒株全基因序列比对分析     

王业华  张欣欣  宋庆庆  李玉和  宫利娜  关平原 《中国畜牧兽医》2016,43(7):1709-1716

为了解猪繁殖与呼吸综合病毒（PRRSV）致弱的分子学基础,对PRRSV JXA1株第5代（强毒）与第86代毒株（致弱毒）进行全基因组测序,将JXA1原始毒株和JXA1致弱毒株与其他2对PRRSV原始毒株/弱毒疫苗株进行基因序列比对分析。结果显示,这3对毒株（1对JXA1原始毒株/致弱毒株、2对PRRSV原始毒株/弱毒疫苗株）中结构蛋白的氨基酸突变率较高,表明毒力的改变与结构蛋白的改变关系更大;将JXA1株与JXA1-86株序列比对分析,发现编码Nsp5、Nsp6、Nsp8、Nsp12、M、N蛋白的氨基酸未发生变化,表明JXA1株毒力的降低可能与这些蛋白无关;将各代次PRRSV序列比对分析,发现在第70代到第86代序列之间,ORF1a中A₉₂₈V、I₁₁₅₅M、E₁₆₂₉D,GP2中I₁₁₈V,GP3中H₇₉N,GP4中I₁₂₄V,GP5中K₅₉N发生了改变,表明其毒力的减弱可能与以上几处变异有关。  相似文献   

Stable expression of foreign gene in nonessential region of nonstructural protein 2 (nsp2) of porcine reproductive and respiratory syndrome virus: applications for marker vaccine design     

Xu YZ  Zhou YJ  Zhang SR  Jiang YF  Tong W  Yu H  Tong GZ 《Veterinary microbiology》2012,159(1-2):1-10

The nonstructural protein 2 (nsp2) of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) has been shown to be highly heterogeneous and variable among PRRSV strains and some sequences in the middle region of the nsp2 are not essential to viral replication. Recent studies have attempted to insert foreign genes in the nsp2 nonessential regions but the foreign genes were not stably expressed by recombinant viruses in vitro. In the present study, we first constructed an infectious cDNA clone with deletion of 75 nucleotides (25 amino acids) in the nsp2 region (rHuN4-F112-Δ508-532) of the attenuated vaccine virus HuN4-F112 derived from a highly pathogenic PRRSV HuN4 and then inserted a gene fragment encoding a immunodominant B-cell epitope (49 amino acids) of Newcastle disease virus (NDV) nucleoprotein (NP) in-frame into the deletion site. The viable recombinant virus was rescued from the full-length cDNA infectious clone in vitro. The engineered viruses rescued from the cDNA clone indicated that the deletions of 75 nucleotides and insertion of NDV NP gene in the nsp2 region did not affect viral replication; they had similar growth kinetics to its parental virus. The inserting gene could be expressed consistently when the recombinant virus was passaged up to twenty times in cell cultures as determined by immunofluorescence assay (IFA) and genomic sequencing. To investigate the potential application of the NDV NP gene-inserted PRRSV as a marker vaccine, piglets were immunized with the recombinant virus and then challenged with lethal dose of highly pathogenic PRRSV. The immunized piglets produced specific antibodies against both the NDV NP and PRRSV, and lacked antibodies against the deleted 25aa nsp2 epitope. After challenge, all immunized piglets were protected from clinical disease or death, while all piglets in control group died (5/5) by ten days post challenge. The results of the present study indicated that the recombinant PRRSV (rHuN4-F112-Δ508-532) could be used as a potential marker vaccine against PRRS.  相似文献   

An attenuated live vaccine based on highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus (HP-PRRSV) protects piglets against HP-PRRS   总被引：4，自引：0，他引：4  

Zhi-Jun Tian  Tong-Qing An  Yan-Jun Zhou  Jin-Mei Peng  Shou-Ping Hu  Tian-Chao Wei  Yi-Feng Jiang  Yan Xiao  Guang-Zhi Tong   《Veterinary microbiology》2009,138(1-2):34-40

Porcine infections with highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus (HP-PRRSV) cause significant morbidity and mortality and currently there are no effective vaccines for disease prevention. An attenuated strain, HuN4-F112, was obtained by passaging the HP-PRRSV HuN4 on Marc-145 cells (112th-passage). PRRSV-free pigs were inoculated intramuscularly with HuN4-F112 (10^2.0, 10^3.0, 10^4.0, 10^5.0 and 10^6.0 TCID₅₀ for groups 1–5, respectively). The groups 3–5 could resist the lethal challenge and did not show any obvious changes in body temperature nor clinical signs throughout the experiment, the pathological lesions were milder and the gained weight at a greater rate (P < 0.05), compared to group 1 and control. Sequence analysis of the HuN4 passages showed a conserved epitope in GP5 protein was mutated (¹⁹⁶QWGRL/P²⁰⁰ → ¹⁹⁶RWGRL/P²⁰⁰), as a result the monoclonal antibody could not recognize the HuN4-F112 any more. These results suggested that the HuN4-F112 could protect piglets from lethal challenge and might be a candidate vaccine against the HP-PRRSV.  相似文献   

猪繁殖和呼吸综合征病毒GP3蛋白糖基化位点突变株的构建及其生物学特性分析     

刘欢欢  周艳君  姜一峰  张善瑞  童光志 《中国兽医寄生虫病》2011,19(3):1-8

为研究猪繁殖与呼吸系统综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）GP3蛋白糖基化位点的作用,在弱毒疫苗株HuN4-F112感染性克隆的基础上,采用点突变的方法对GP3蛋白N29、N42、N50、N131位进行单点或多点组合突变去糖基化,构建了不同糖基化位点的单点和多点突变的PRRSV全长cDNA克隆,最终成功救获N29Q、N42Q、N50Q、N131Q、N29Q/N50Q、N29Q/N195Q六株含糖基化位点突变的病毒,而其余几种糖基化位点突变组合的全长cDNA未能拯救出病毒。对拯救毒株进行滴度测定及多步生长曲线绘制等特性分析,结果显示N29Q、N42Q、N50Q、N131Q位单个糖基化位点的缺失虽不影响子代病毒的产生但会不同程度地降低PRRSV感染细胞的能力,其中N50Q突变体较亲本下降6个滴度且生长明显延迟。多个糖基化位点同时缺失则会影响病毒的拯救,推测这些糖基化位点可能是产生具有感染性病毒粒子所不可或缺的。  相似文献   

Research Progress on the Nonstructural Proteins of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus     

LIU Ya-li  DING Yao-zhong  ZHANG Jie 《中国畜牧兽医》2016,43(8):2183-2189

Porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) is a highly contagious disease that spreads all over the world.It is caused by porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV).Once infected with PRRSV,NSPs (nonstructural proteins) were expressed firstly.At least 14 kinds of NSPs,including NSP1α,NSP1β,NSP2,NSP3,NSP4,NSP5,NSP6,NSP7a,NSP7b,NSP8,NSP9,NSP10,NSP11 and NSP12,were produced during PRRSV life,which plays an important role in virus proliferation,virus virulence,immunological characteristics and so on.In this paper,we make a brief overview in terms of the research progress on NSPs to make a basis for the prevention of PRRS.  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白研究进展     

刘亚丽  丁耀忠  张杰 《中国畜牧兽医》2016,43(8):2183-2189

猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS）是一种遍布于全世界的高度传染性疾病,其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）。感染PRRSV后,最先在机体内进行表达的是非结构蛋白（nonstructural proteins, NSPs）,PRRSV基因组编码区经翻译后至少产生14种NSPs（NSP1α、NSP1β、NSP2、NSP3、NSP4、NSP5、NSP6、NSP7a、NSP7b、NSP8、NSP9、NSP10、NSP11、NSP12）,这些NSPs在病毒增殖、病毒毒力、免疫学特性等方面都发挥着重要作用。作者就NSPs的研究进展进行简要概述,以期为PRRS疫苗研发及技术防控奠定基础。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)协同感染细菌性疾病的分析研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

李明波  库旭钢  赵海忠  宋忠旭  孙华  梅书棋 《中国畜牧兽医》2018,45(3):781-789

为了解湖北某养殖场猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）流行毒株的遗传变异和临床感染情况,试验采集10份疑似PRRS发病仔猪的肺脏、淋巴结等临床样品,应用RT-PCR方法扩增PRRSV的Nsp2部分基因用于定性检测分析,并对扩增的其中2份PRRSV阳性样品进行ORF5基因核苷酸序列测定,结合不同疫苗毒株开展同源性比对分析。为进一步揭示病因,通过多重PCR方法对10份发病猪的肺脏和12份鼻拭子样品进行了相关致病菌的鉴定,并对其中的2株不同病原菌开展药敏试验。结果显示,10份临床样品中有5份检测到美洲型变异PRRSV,病原阳性率为50%。ORF5全基因序列分析表明,2个流行毒株间的核苷酸同源性为99.7%,与以TJM-F92、JXA1-R、HuN4-F112等为代表的高致病性致弱疫苗毒株核苷酸同源性最高,为96.7%~97.0%;与美洲型标准毒株VR2332的同源性分别为87.6%和87.9%;与国内较早分离的经典毒株（CH-1R和R98株）的核苷酸同源性分别为92.9%和87.4%、87.7%。患病猪临床常见感染模式为PRRSV+PM+SS、PRRSV+PM或PRRSV+HPS,2株主要致病菌药敏试验表明,多杀性巴氏杆菌对头孢曲松、阿莫西林等药物高度敏感,猪链球菌对阿莫西林、氨苄西林、阿奇霉素等药物高度敏感。本研究揭示了该场保育猪的发病病原,并从分子水平明确了临床PRRSV与不同疫苗毒株的亲缘关系,为弱毒疫苗的合理选择使用和综合防控PRRS提供了实践依据。  相似文献   

高致病性PRRSV（HuN株）NSP2基因的扩增与分析     

刘业兵  郑杰  宁宜宝 《中国兽药杂志》2007,41(10):10-12

从2006年高热病病料中分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒（HuN株），利用RT-PCR扩增其NSP2基因，通过与标准毒株VR-2332进行比较，发现共有30个氨基酸缺失，其中29个为连续缺失，缺少氨基酸分别位于481、532～560位。将分离株与同时期分离自不同地区高热病毒株的基因序列（EF112445、EF112446、EF112447）相比较，发现全部都具有相同的缺失，这说明引起猪高热病的病原变异不大；与较早期分离的AY150312、AY262352毒株进行比较，发现缺失部位不同。该研究补充和丰富了PRRSV毒株的基因组信息数据，为深入研究该毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。  相似文献   

Identification of porcine serum proteins modified in response to HP-PRRSV HuN4 infection by two-dimensional differential gel electrophoresis     

Yang Y  An T  Gong D  Li D  Peng J  Leng C  Yuan Z  Tong G  Tian Z  Zhang D 《Veterinary microbiology》2012,158(3-4):237-246

Since 2006, highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus (HP-PRRSV) has become the major pathogen attributed to the prevalent porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) in China. The present study aims to identify serum proteins modified in response to infection of HuN4, a HP-PRRSV strain isolated from a farm in 2006. 2-D DIGE analysis allowed for the detection of 19 differentially expressed protein spots, of which 18 were identified by MALDI-TOF/TOF MS. These 18 spots represented for a total of 9 proteins (6 up-regulated and 3 down-regulated), most of which belonged to the acute phase proteins in swine and showed a trend of regression in the late phase of the experiment. One of a series of AGP spots was identified for the first time to be decreased in acute phase of PRRSV infection in swine. But the whole level of the protein in the serum did not show significant changes by Western blot. The rising tendency of Hp was confirmed by Western blot and ELISA. These altered proteins were probably involved in the inflammatory process triggered by HuN4 and in alleviating the oxidative damage occurring in the process. In summary, these results may provide new insights into understanding the mechanisms of HP-PRRSV infection.  相似文献