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结合流行病学、临床症状、病理变化,采用PCR技术,对2005年1~6月间广西36个发生疫病的规模猪场提供的肝、脾、淋巴结、脑等84份组织病料进行猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)、猪瘟(CSFV)、猪伪狂犬病(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)检测。结果,检出PRRS阳性病料37份,阳性率44%,阳性场17个,场阳性率47%;CSFV阳性病料16份,阳性率11.9%,阳性场6个,场阳性率22.2%;PRV阳性病料27份,阳性率32.1%,阳性场12个,场阳性率33.3%;PCV-2阳性病料44份,阳性率52.3%,阳性场21个,场阳性率58.3%。同时还发现组织病料和发病猪场中存在猪繁殖与呼吸综合症、猪瘟、猪伪狂犬病、猪圆环病毒2型不同程度的混合感染现象,其中PRRS、PCV-2混合感染最为严重,样品阳性率33.3%,场阳性率25%。表明广西规模猪场主要疫病十分复杂,混合感染现象比较普遍,对广西养猪业带来巨大威胁,应加强疫病的防控工作。 相似文献
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参考GenBank已发表的PCV-2基因序列,根据PCV-2(AFff27217)和PCV-1(U49186)全基因序列设计合成-对引物,进行PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳,呈现一条大小约1 154 bp的特异条带,经条件优化,建立了猪病料中PCV-2感染的PCR检测方法.采用建立的PCR方法对江西各地猪场133份猪的病料进行PCV-2检测,结果表明,受检猪的组织及血清样品中PCV-2的总检出率为53.38%,证实江西各地猪场存在PCV-2感染. 相似文献
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《中国畜禽种业》2016,(5)
对广西某市以发热、咳嗽、呼吸困难、皮肤及耳朵发绀和高发病率及高病死率等为主要临床特征的39个发病猪场所采集的53份病料进行了主要病毒病的检测。检测结果显示,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性30份,阳性率56.60%(30/53);猪2型圆环病毒(PCV2)阳性25份,阳性率47.17%(25/53);猪流感病毒(SIV)阳性21份,阳性率39.62%(21/53);猪瘟病毒(CSFV)未检出阳性;其中可检出两种以上病原的有29份病料,占54.72%(26/53)。检测结果与调查分析表明,猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪2型圆环病毒(PCV-2)和猪流感(SI)是导致该市猪场疾病发生流行的主要病种,而且PRRS、PCV2和SIV常呈多重感染,这为该市发病猪场针对性地做好疫病的防控提供了科学依据。 相似文献
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通过对河南省不同规模猪场问卷调查、现场问询调查和采样检测,获取有关猪瘟(CSF)、猪繁殖障碍与呼吸综合征(PRRS)、圆环病毒病(PCV-Ⅱ)等疫病流行病学的相关情况。结果表明,PRRSV阳性猪场为34.4%,CSFV阳性猪场为41.7%,PCV-Ⅱ阳性猪场为36.2%;CSFV与PRRSV、PCV-Ⅱ混合感染分别占CSFV感染的24.54%和37.79%;PRRSV与PCV-Ⅱ混合感染占PRRSV感染的36.87%。提示猪群中三种疫病感染严重,CSFV、PRRSV与PCV-Ⅱ混合感染比较普遍。 相似文献
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为摸清贵州地区猪场猪传染性胸膜肺炎及其他疫病感染情况,对来自全省9个地区251个猪场的2 635份血清进行APP、PRRS、CSF、PRV、PCV-2、PPV、JEV、TOX、Mhyo、TGEV、PRCV等11种疫病的血清学检测.结果表明,共有198个猪场的974份血清出现APP抗体阳性,猪场阳性率为78.88%,血清阳性率为36.96%.对APP抗体阳性的198个猪场进行其他疫病检测,发现所有猪场均存在与其他疫病不同程度的混合感染,其中3种混合感染类型(APP/PRV/PCV -2/PPV/JE V/TOX/Mhyo、APP/PRV/PCV-2/PPV/JEV/TOX,APP/PC V-2/PPV/JEV/TOX)较为严重,猪场混合感染率分别为23.74%、17.68%和12.12%;974份APP阳性血清中有968份血清发生APP与其他疫病不同程度的混合感染,混合感染率为99.38%,其中4种混合感染类型(APP/PCV-2/PPV/JEV/TOX、APP/PRV/PCV-2/PPV/JEV/TOX/Mhyo、APP/PRV/PCV-2PPVJEVTOX、APP/PPV/JEV/TOX)较为严重,血清混合感染率分别为12.22%、11.91%、9.24%和8.32%. 相似文献
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《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》2014,(3)
2006年在中国暴发了空前规模的猪高热症,200多万头猪感染,死亡40万头以上,造成中国重大经济损失,严重威胁着养猪业的健康发展。本研究为了分析猪高热症的原因,通过对北京及其周边地区19个猪场61个病例进行发病情况调查和病理学检查,实验室对冰冻病料和血清做了核酸和抗体检测,并对阳性片段进行测序分析。研究结果表明:PRRSV核酸阳性率为55.7%,PCV-2核酸阳性率为31.1%,PRRSV和PCV-2混合感染率为16.4%;此次猪高热症的主要病原是PRRSV,发病特点不同于典型PRRS,同时有PCV-2的混合感染。本研究对当前猪病诊断、防控具有一定指导意义。 相似文献
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猪病毒病抗体及病原的检测及分析 总被引:2,自引:1,他引:1
[目的]研究猪场猪病毒病的抗体水平及感染情况,为猪病的防制提供理论依据。[方法]抽样采集各类猪只血液和组织样品,分别应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链式反应(PCR)及反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)及猪圆环病毒病(PCV-2)的抗体、病原进行检测分析。[结果]结果表明,猪场存在CSF、PR野毒感染;PRRS免疫抗体水平不太理想,阳性感染率为3.3%~17.3%;PCV-2阳性感染率为0~9.6%。[结论]试验猪场病毒病,应采取完善的综合措施才能获得理想的效果。 相似文献
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Wang Shuai ZHang Meng LIU Xin-chao LIn Tao Yang Han-chun YUan Shi-shan ZHao guang-wei Ia Hassan Yan Ruo-feng Song Xiao-kai XU Li-xin LI Xiang-rui 《农业科学学报》2015,14(9):1838-1844
The objective of the present investigation was to estimate the prevalence of Toxoplasma gondii infection and co-infection with porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV), classical swine fever virus(CSFV) and porcine circovirus type 2(PCV-2) in pigs in China. A total of 372 tissues or serum samples collected from pigs distributed in 9 provinces/municipalities of China during the period from February 2011 to November 2012 were assayed for T. gondii antigens and antibodies using enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) technique, while the PCR was designed for the detection of the PRRSV, CSFV and PCV-2, respectively. The total positive rate of T. gondii, PRSSV, CSFV and PCV-2 was 9.14%(34/372), 50.00%(186/372), 37.10%(138/372) and 3.23%(12/372), respectively. Among the 34 T. gondii positive samples, 26 samples were simultaneously infected with T. gondii and viruses, while the remaining eight samples were infected with T. gondii alone. In addition, the co-infection rate of T. gondii with PRSSV, T. gondii with PRSSV and CSFV, T. gondii with PRSSV and PCV-2, T. gondii with CSFV and PCV-2, T. gondii with PRSSV, CSFV and PCV-2 was 1.61%(6/372), 4.03%(15/372), 0.27%(1/372), 0.27%(1/372) and 0.81%(3/372), respectively. The results of the present survey revealed that PRRSV and CSFV were the common pathogens co-existing with porcine toxoplasmosis in China, and both of them could increase the chances of T. gondii infection in pig. This is the first report of T. gondii co-infections with viruses in pigs. It is very important to understand the interactions of parasite and virus, and can be used as reference data for the control and prevention of co-infections of T. gondii and viruses in pigs. 相似文献
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检测猪圆环病毒2型PCR方法的建立 总被引:5,自引:0,他引:5
[目的]为快速诊断猪圆环病毒病提供参考。[方法]根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,建立诊断PCV-2地方分离株的PCR方法。[结果]各物质在PCR反应中最佳浓度分别为:dNTP 220 pmol/ml,Taq酶0.1 U/μl,引物20 pmol/μl。从PCV-2阳性病料中提取DNA,在优化条件下进行PCR扩增,获得预期的494 bp特异性条带。用该PCR方法对PCV-2、PRRSV、HCVS、IV、PPV进行检测,PCV-2为阳性,而PRRSV、HCV、SIV、PPV检测均为阴性,未出现交叉反应,说明该PCR方法对PCV-2具有良好的特异性。该PCR方法可检出1.25 ng模板DNA,具备较高的敏感性。[结论]使用该PCR方法检测PCV-2是切实可行的。 相似文献
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云南地区部分猪场猪呼吸道疾病综合症(PRDC)患病猪群中PRRSV,PCV-2,CSFV,PRV混合感染调查 总被引:2,自引:0,他引:2
针对云南省不同地区不同季节猪呼吸道疾病综合征进行流行病学调查,根据其临床特征,在不同规模养殖场共采集1164份血清样品,利用ELISA和RT-PCR方法检测其猪瘟抗原CSFV,猪繁殖与呼吸综合征抗原PRRSV,猪伪狂犬病PRV gE抗体及猪圆环病毒2型PCV-2特异抗体。结果表明:各季节和不同生长阶段猪群存在一种及两种以上的病毒混合感染,四重感染相对较少。从全年看单独感染占39.10%,PCV-2感染率最高,其次是PRV,PRRSV和CSFV;二重感染占26.13%,以PCV-2+PRV最常见,其次是PCV-2+ PRRSV、PRV+PRRSV;三重感染占8.05%,PCV-2+ PRRSV+PRV最常见;有四重感染出现,仅占1.57%。从季节来看,春季和夏季混合感染最高,分别为76.53%和60.74%,冬季和秋季的混合感染率分别为59.50%和53.55%。从年龄和性别看,育肥猪的混合感染率高于仔猪,分别为68.66%和61.11%,种公猪的感染率高于母猪,分别为70.00%和55.51%。说明4种病毒有单独感染或混合感染,推测其中PCV-2在混合感染中可能充当免疫抑制的角色,混合感染使PRDC症状更明显,死亡率增高。 相似文献
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根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2基因序列设计特异性引物,进行PCR反应,回收PCR产物,将其克隆入pMD18-T载体,再定向克隆到表达载体pET-32a中并转化大肠杆菌Rosetta,进行原核表达.表达产物经His-Bind蛋白纯化试剂盒纯化,平均浓度为1.10 mg/ml.以1.8 μg/ml蛋白包被酶标板,建立ELISA检测方法.建立的ELISA方法与北京世纪元亨公司试剂盒比较,两者检测结果符合率达85%以上.用该方法对常州某猪场36份母猪和156份10~160日龄猪群血清样品进行了检测,检测结果显示母猪阳性率为81.4%,仔猪阳性率随着日龄的增加而逐渐降低,之后由于受PCV-2的感染,阳性率逐渐升高.本试验建立的ELISA方法,具有较好的特异性、重复性和敏感性,可用于猪群PCV-2抗体的大规模检测. 相似文献
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猪环状病毒2型的PCR检测方法的建立及应用 总被引:48,自引:0,他引:48
根据国外已发表的猪环状病毒2型(PCV-2)的全基因组序列,设计一对2型特异性引物,对可疑病料进行PCR扩增。将扩增产物连接到pMD18-T载体上并克隆到大肠杆菌DH5α中,经提取质粒进行PCR、酶切、测序鉴定,证明扩增出了PCV-2的目的片段。将测序结果与GenBank收录的PCV-2序列进行比较,发现同源性均在90%以上。用该PCR方法在43份可疑病料中检测到了12分PCV-2阳性病料,表明该病在我国已有流行。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病复合PCR诊断方法的建立及应用 总被引:5,自引:0,他引:5
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株(ATCC VR-2332)的部分ORF6及ORF7保守序列和已发表的猪圆环病毒株PCV-2(DQ195679)的ORF-2基因保守序列,设计合成了2对特异引物,分别扩增出大小为426 bp和631 bp特异性基因片段,通过优化RT-PCR和PCR条件,最终建立了可同时检测PRRSV和PCV-2的复合PCR诊断方法。应用此方法分别对河南省不同地区送检的15头份病、死猪的血清、淋巴结、肺、肝等组织进行检测,结果8头份PRRSV阳性,5头份PCV-2阳性,其中3头份PCV-2和PRRSV同时为阳性,其余猪为阴性,健康猪对照样品全部阴性。结果表明,PRRSV和PCV-2复合PCR诊断方法具有高度特异性和敏感性,可用于兽医临床诊断。 相似文献