大肠杆菌F41菌株的分离鉴定和F41与K99纤毛抗原的特性观察   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈太平  郭景煜 《中国农业科学》1986,19(6):77-84

与大肠杆菌致病有关的纤毛抗原最早发现于1961年,到目前从腹泻幼畜的大肠杆菌中已发现有K88,K99、987P和F41等纤毛抗原。各国学者对这一类抗原的理化特性、粘着性和血凝性做了大量研究,具有纤毛的肠毒大肠杆菌的致病作用和免疫防制也有许多报道。  相似文献   

检测产肠毒素性大肠杆菌粘附素抗体间接ELISA的建立   总被引：3，自引：0，他引：3  

袁万哲  何孔旺  陆承平 《河北农业大学学报》2005,28(1):79-82

为了评价仔猪大肠杆菌病K88-K99-987P-F41 四价亚单位疫苗的免疫效果,利用纯化粘附素为包被抗原,建立了检测产肠毒素性大肠杆菌粘附素抗体的间接ELISA。初步确定了各种反应条件: K88、K99、987P、F41粘附素抗原最适包被浓度依次为1∶400、1∶80、1∶40、1∶40,相应粘附素抗体最佳稀释度依次为1∶400、1∶200、1∶200、1∶200。经交叉试验、阻断试验和重复试验证实,本方法具有良好的特异性和重复性。  相似文献   

肠可净推广前景暨肠可净推广试验报告     

吴章才  章光华  郦光初 《中国畜禽种业》2009,5(11):47-48

肠可净通用名是仔猪大肠埃希氏菌病三价灭活疫苗,由上海海利生物公司生产。本品含灭活的分别带有K88、K99、987P纤毛抗原的大肠杆菌,灭活前3种纤毛抗原含量每毫升均不少于250个抗原单位。在静置时,上层为白色的澄明液体,下层为乳白色沉淀物,振摇后呈均匀混悬液。  相似文献   

一株不表达K88、K99、987P粘附因子牦牛肠毒素型大肠杆菌的分离鉴定     

陈明勇  曾群辉等 《华中农业大学学报》2001,20(3):265-267

从西藏地区腹泻死亡牦牛中分离出一株肠毒素型大肠杆菌，该菌在形态特征，培养特笥和生化特性方面与大肠杆菌基本一致，血清学试验表明，该菌原O抗原属O148，K88，K99，987P单因子血清均不能凝集本菌，在MSHA反应中，木菌能凝集绵羊、豚鼠、马、鸡的红细胞，而K88、K99、987P抗血清均不能抑制其对绵羊、豚鼠、马、鸡红细胞的凝集，用腔接种对小白鼠具有太原市 致病性，乳鼠胃内投服试验和兔回肠结所试验证明，该菌能产生热稳定肠毒素和热敏性肠毒素，总之，该功得一株不表达K88、K99、987P的、能产生ST和LT的肠毒素型大肠杆菌，  相似文献   

抗大肠埃希氏菌K_(99)和987P粘着素单克隆抗体研究进展     

江扬 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》1986,(4)

引起初生幼畜腹泻的重要病原之一是肠毒素性大肠杆菌(ETEC),它们都具备两类致病因子即粘着素和肠毒素,在ETEC中,迄今已发现的粘着素有K88、K99、987P和F41四种。鉴于ETEC的血清型较复杂,加之粘着素种类的多样性和抗原性的彼比不同,采用淋巴细胞杂交瘤技术,研制纯净、匀质、高效价的抗大肠杆菌粘着素单克隆抗体,并形成诊断试剂盒,已成为大肠杆菌病的快速诊断及流行病学研究的重要手段。继成功地研制出抗大肠杆菌K88单抗之后,最近,我们又用提纯的K99和987P抗原分别免疫BALB/C小鼠,以免疫小鼠  相似文献   

河南省猪致病性大肠杆菌分离株的鉴定   总被引：3，自引：0，他引：3  

李文刚  杨治田  兰尊海  唐桂芬 《河南农业科学》2001,(11):28-29

从河南省 2 3个规模化猪场发生仔猪黄痢、白痢、水肿病的猪只十二指肠、小肠前端、心血和肝脏中分离出的致病性大肠杆菌 2 79株 ,用大肠杆菌 3 0种O抗原和K抗原 (K88、K99、987P)进行了血清型鉴定。用 2 0种抗生素对分离株进行了药敏试验。结果表明 :( 1)同一地区的不同猪场流行的主要血清型一般不同 ;( 2 )用单因子定型血清鉴定 ,大多数分离株为K88型 ,8种优势血清型占定型菌株的 69.3 5 % ;( 3 )致病性大肠杆菌存在着广泛的耐药性 ,敏感药物是头孢曲松、头孢唑啉。  相似文献   

抗猪大肠杆菌卵黄抗体的研制及其高免蛋白粉生产技术     

中国农业大学农业部饲料工业中心 《农业科技通讯》2003,(3):44-44

本项目以含有K88、K99和987P的猪大肠杆菌免疫健康蛋鸡,制备含有鸡抗猪大肠杆菌的卵黄抗体.免疫后的蛋鸡体内的特异性抗体水平能保持较长时间,水平稳定.  相似文献   

仔猪大肠杆菌性腹泻的病原检测与免疫防制   总被引：2，自引：1，他引：1  

成大荣  高小攀  朱善元  牟志霞  宿志瑞 《甘肃农业大学学报》2010,45(2)

以江苏姜曲海种猪场的仔猪腹泻病症为研究对象,研究合成了检测肠毒素(ST1、ST2、LT1)、菌毛(K88、K99、987P、F41)以及耶尔森氏菌强毒力岛(high pathogenicity island,HPI)核心基因的特异性引物,用PCR方法对产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenicE.coli,ETEC)和HPI+大肠杆菌进行检测,并对致病性大肠杆菌的免疫防治进行了研究.结果表明:该猪场62.5%的病例存在HPI+大肠杆菌感染,12.5%的病例存在HPI+大肠杆菌及ETEC感染,仅有5%的病例与ETEC感染相关.取分离鉴定的2株大肠杆菌制备灭活抗原,并以氢氧化铝胶为佐剂免疫接种母猪,结果表明,其所产仔猪的腹泻发病率为15.2%,保护率高于仔猪大肠杆菌三价灭活疫苗.  相似文献   

鸡抗猪大肠杆菌卵黄抗体的研制与应用   总被引：9，自引：0，他引：9  

李国平  周伦江  姚金水  李沁光  李孟潮  黄沧海 《福建农林大学学报(自然科学版)》2002,31(1):89-91

用猪致病性大肠杆菌 K88、K99、987P、F4 1 标准菌株制成的灭活油佐剂作为免疫原 ,待产蛋鸡免疫后收集高免卵黄 ,然后提取、纯化 ,精制成鸡抗猪大肠杆菌特异性高免卵黄抗体并用于临床 .结果表明该制剂安全性好 ,每头仔猪注射或口服 2-4m L剂量预防仔猪大肠杆菌性腹泻 ,效果明显  相似文献   

绵羊肺炎支原体间接血凝诊断方法的建立   总被引：3，自引：1，他引：2  

赵萍  逯忠新  储岳峰  高鹏程  贺英  石琴 《甘肃农业大学学报》2008,43(1):29-32

用绵羊肺炎支原体抗原致敏经戊二醛处理的绵羊红细胞,制备成间接血凝试验抗原,通过IHA来检测绵羊支原体性肺炎血清抗体.致敏绵羊红细胞的最佳抗原浓度为100μg/mL,血清效价≥1∶8即为阳性,效价≤1∶4者判为阴性.该方法具有很好的敏感性、特异性和可重复性,而且操作简单,适合大范围推广应用.  相似文献   

大肠杆菌987 P基因工程菌苗预防实验性仔猪黄痢试验     

于涟  王淦  蔡渭明  丁荣法 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》1992,(4)

用基因工程技术构建的大肠杆菌HB101/pBP52菌株能产生987 P型菌毛,但不产生热稳定肠毒素(ST),用该茵株制备灭活苗,在产前21天免疫18头第一胎怀孕母猪.在分娩后24～48小时内,用产热稳定肠毒素(ST)大肠杆菌987菌株(O9:K103,987P:NM)人工感染所产仔猪102头,88头仔猪在观察期(攻毒后7天)结束时安全无恙,保护率达86.27％.结果表明:用无毒大肠杆菌HB 101/pBP 52菌株制备的灭活苗可以有效地预防987P菌毛型致病性大肠杆菌引起的仔猪黄痢.  相似文献   

猪产肠毒素大肠杆菌_（987）P菌毛卵黄抗体的研究     

谢志恒  赛金  张开宇  张卉  王士长 《广西农业科学》2011,(10):1284-1287

【目的】探索产肠毒素大肠杆菌（ETEC）987P菌株培养的最佳条件及987P菌毛诱发蛋鸡制备卵黄抗体（IgY）的最佳免疫程序,为IgY的工业化、规模化生产提供参考。【方法】扩大培养987P菌株,抽提层析纯化987P菌毛蛋白,然后以其为抗原免疫20周龄开产海兰蛋鸡,采用间接ELISA检测987P菌毛蛋白免疫IgY效价。【结果】987P菌株的最佳培养条件为37℃下Slanctz固体培养基培养24h;以纯化987P菌毛蛋白为抗原免疫20周龄开产蛋鸡,发现987P菌毛蛋白二免、三免IgY效价总体趋势基本一致,均在第3周达到峰值并维持1周,二免抗体峰值为213,三免抗体峰值是二免峰值的2倍（214）,但第4周过后三免IgY效价仍保持在213,且持续时间长,一般维持2～3周。【结论】以纯化987P菌毛蛋白为抗原免疫蛋鸡,能获得较高效价的IgY,且适当增加免疫次数能有效提高抗体水平和延长持续时间。  相似文献   

大肠杆菌野生株K99菌毛蛋白结构基因的克隆与序列分析     

栗庆丰  庞岩  鲁晶红  赵鹏  魏广丽  余丽芸 《黑龙江八一农垦大学学报》2007,19(2):46-50

根据产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K99菌毛蛋白的全基因序列设计产肠毒素大肠杆菌主要菌毛K99的一对引物。PCR扩增K99菌毛蛋白的全基因序列大小为546bp。将PCR扩增的目的片断克隆于pMD18-T载体、pET-32a载体中,分别转化大肠杆菌,经酶切鉴定、PCR鉴定及DNA序列分析,筛选出阳性克隆。经过序列比对,所克隆的外源基因与报道的K99菌毛蛋白结构基因序列同源性达99.3%。成功克隆分离到的产肠毒素大肠杆菌菌毛的K99基因,为当地产肠毒素性大肠杆菌病疫苗的选择及基因疫苗的研制提供了坚实的理论基础,为产肠毒素性大肠杆菌病检测、预防及基因工程疫苗的研制开辟新的途径。  相似文献   

猪产肠毒素大肠杆菌987P菌毛卵黄抗体的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

谢志恒  赛金  张开宇  张卉  王士长 《南方农业学报》2012,42(10):1284-1287

【目的】探索产肠毒素大肠杆菌（ETEC）987P菌株培养的最佳条件及987P菌毛诱发蛋鸡制备卵黄抗体（IgY）的最佳免疫程序,为IgY的工业化、规模化生产提供参考。【方法】扩大培养987P菌株,抽提层析纯化987P菌毛蛋白,然后以其为抗原免疫20周龄开产海兰蛋鸡,采用间接ELISA检测987P菌毛蛋白免疫IgY效价。【结果】987P菌株的最佳培养条件为37℃下Slanctz固体培养基培养24 h;以纯化987P菌毛蛋白为抗原免疫20周龄开产蛋鸡,发现987P菌毛蛋白二免、三免IgY效价总体趋势基本一致,均在第3周达到峰值并维持1周,二免抗体峰值为213,三免抗体峰值是二免峰值的2倍（214）,但第4周过后三免IgY效价仍保持在213,且持续时间长,一般维持2～3周。【结论】以纯化987P菌毛蛋白为抗原免疫蛋鸡,能获得较高效价的IgY,且适当增加免疫次数能有效提高抗体水平和延长持续时间。  相似文献   

鸡致病性大肠埃希氏菌的菌毛血清型检测     

黄炯  徐定法  成进 《西北农业学报》1992,1(2):30-32

使用透射电镜对3株鸡致病性大肠埃希氏菌(E.coii)的菌型进行了形态观察,发现其中2株菌具有纤细、中空、挺直的菌毛,另外1株未见菌毛。有菌毛的2株菌与K88、K99、987P和F41单因子兔高免血清的玻片凝集反应阴性,而与2株兔源的具菌毛的E.coli菌的兔高免血清呈强阳性。未见菌毛的那株菌与上述所有血清的玻片凝集反应均呈阴性。  相似文献   

牛病毒性腹泻病毒夹心ELISA快速检测方法的建立与初步应用     

李倬  马省强  陈文芳  石真真  平玲 《甘肃农业大学学报》2012,47(3):13-19,24

用增殖与浓缩后的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)分别免疫健康牛犊和家兔,制备牛抗BVDV和兔抗BVDV超免疫血清,并用层析法纯化牛抗BVDV IgG和兔抗BVDV IgG,建立了检测BVDV的双抗体夹心ELISA快速检测方法.结果表明:该检测方法的最佳反应条件为:牛抗BVDV IgG包被浓度为100μg/mL,兔抗BVDV IgG最佳工作浓度为50μg/mL,样品反应时间为90min,酶标抗体工作浓度为1∶8 000,以D490nm≥0.177作为阳性判定标准.该ELISA检测方法的重复性CV小于10%,最低检测限为1.87μg/mL,与牛轮状病毒、牛冠状病毒、猪瘟病毒、犊牛大肠杆菌和沙门菌等病原无交叉反应,该ELISA试剂在室温下至少可保存6个月.用该ELISA方法和IDEXX公司抗原检测试剂盒对甘肃省不同地区牛场156份临床粪便样品进行了检测,阳性检出率分别为17.3%和16.7%.表明本试验建立的ELISA方法特异性强、敏感性高且重复性好,可用于BVDV的快速检测.  相似文献   

乌桕根皮醇提物萃取部位抗猪大肠杆菌活性分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈国华  何晓雯  彭元丽  邹坤  周媛 《安徽农业科学》2008,36(18)

[目的]探讨乌桕根皮醇提物各部位对猪大肠杆菌4种血清型的抗菌活性。[方法]用95%乙醇80℃回流提取乌桕根皮,将醇提液浓缩后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,最后得到萃余的水相,测试各部位的抗菌活性。[结果]醇提物的石油醚部位、正丁醇部位和水部位没有抑制作用,乙酸乙酯部位对血清型K88F、41和987P具有抑制效果,而对血清型K99无效。因此,用中药材防治猪大肠杆菌疾病时,应该考虑到血清型差异。[结论]乌桕根皮提取物可以在一定程度上防治大肠杆菌引起的猪病。  相似文献