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抗鸡白痢沙门氏菌单抗及其在鸡白痢病检疫中的应用研究 总被引：1，自引：0，他引：1
本研究应用淋巴细胞杂交瘤技术制备了一组针对鸡白痢沙门氏菌O_9抗原的单抗。以单抗3-47-26酶结合物和鸡白痢沙门氏菌脂多糖抗原建立了一种抗体竞争ELISA试验以检疫鸡白痢病,该法通过样品抑制酶标单抗与LPS的结合,以检测鸡白痢抗体。试验结果表明,79份鸡白痢阳性血清具有显著抑制作用(95.0±4.3％),而130份鸡白痢阴性血清以及48份SPF鸡血清抑制不明显,它们的抑制率分别为12.3±10.6％和6.2±5.5％。对94份种鸡血清的检疫结果表明,抗体竞争ELISA比PAT、AGPT、PHA敏感和特异,并进一步讨论了该法在血清流行病学调查方面的应用前景。 相似文献
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酶标单抗阻断ELISA检测鸡白痢和鸡伤寒抗体 总被引：3，自引：0，他引：3
以辣根过氧化物酶标记的沙门氏菌O9单抗3-47-0与包被的鸡白痢沙门氏菌脂多糖抗原建立了一种抗体阻断EL ISA以检测鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌感染。该方法基于待检血清样品抑制酶标单抗与脂多糖的结合,以检测鸡白痢和鸡伤寒特异性抗体。对72份已知鸡白痢阳性血清(抑制率为(98.5±4.0)%)、54份已知鸡白痢阴性血清(抑制率为(15.3±8.0)%)、42份SPF鸡血清(抑制率为(0.8±7.2)%)检测的结果表明,该方法具有很强的区分能力。在人工感染试验中,从第2周开始,该方法能从全部鸡只中检测到特异性抗体,比全血玻板凝集试验(PAT)早1周时间。对344份种鸡血清的检测结果表明,单抗阻断EL ISA比PAT特异性好、敏感性高。另外,该方法也能检测出与鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌有共同抗原的沙门氏菌感染产生的抗体。 相似文献
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斑点免疫金渗滤法检测鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌抗体的应用研究 总被引：2，自引：0，他引：2
将鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原包被于渗滤盒检测区（T区），针对沙门氏菌O9抗原单克隆抗体3-47-0包被在质控区（C区），用胶体金标记鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原，建立了一种抗原夹心法快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌抗体的斑点免疫金渗滤法（DIGFA）。DIGFA比玻板凝集试验（PAT）灵敏度高，人工感染鸡试验表明在感染后第7d即可从32只鸡中的7只检测到抗体，在时间上早于PAT。722份现场血清样品的检疫结果表明，DIGFA的阳性检出率稍高于PAT，阳性样品抗体几何平均滴度DIGFA大于PAT法（P〈0．05）。DIGFA的结果得到细菌分离试验的验证。这些结果表明DIGFA快速、灵敏、准确，为鸡伤寒和鸡白痢的检疫提供了一个新的有效手段。 相似文献
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单抗竞争ELISA检测猪沙门氏菌感染方法的建立与应用 总被引：5，自引：0，他引：5
以猪霍乱沙门氏菌作为包被抗原 ,利用沙门氏菌O7单克隆抗体酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪霍乱沙门氏菌抗体。经过研究确定抗原包被浓度为 2×1 0 8CFU/ml,血清检测稀释度为 1∶1 6,酶标抗体浓度为 1∶70 0 ,包被液为碳酸盐缓冲液 ( 0 .0 5MpH9.6)。应用单抗竞争ELISA和平板凝集试验 (PAT)同时对 5 0 6份血清进行猪霍乱抗体检测 ,PAT的检出率为 3 .60 % ,ELISA检出率为 5 .75 % ,两者符合率达 96.4%。试验结果表明 ,ELISA方法敏感性高 ,特异性强 ,稳定性和重复性好 ,操作简便。本方法的建立在猪群沙门氏菌感染的检疫、实验室诊断的标准化及流行病学调查方面具有应用价值。 相似文献
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为了制备鸡白痢沙门氏菌阳性血清标准型国家标准品及鸡白痢沙门氏菌阳性血清变异型国家标准品,对中国兽医微生物菌种保藏管理中心保藏的10株来源背景清晰的鸡白痢沙门氏菌菌株的形态、生化特性、培养特性、血清学特性、抗原性进行了鉴定,并进行了变异检查及沙门氏菌基于inv A基因的PCR检测。结果表明,CVCC79201株及CVCC79207株分别符合鸡白痢沙门氏菌标准型菌株及变异型菌株的特性,CVCC79201株菌制备的抗原与WHO标准实验室提供的AntiS.Pullorum Serum(S)及Anti-S.Pullorum Serum(V)国际标准品的强阳性血清和弱阳性血清均能发生100%凝集,CVCC79207株菌制备的抗原与Anti-S.Pullorum Serum(S)国际标准品的弱阳性血清发生75%凝集,与Anti-S.Pullorum Serum(S)国际标准品的强阳性血清及Anti-S.Pullorum Serum(V)国际标准品的强阳性血清和弱阳性血清均能发生100%凝集。用其制备免疫抗原免疫家兔后获得的阳性血清效价较高于鸡白痢沙门氏菌阳性血清国际标准品。结果证明,CVCC79201株及CVCC79207株可分别用于制备鸡白痢沙门氏菌阳性血清标准型国家标准品及鸡白痢沙门氏菌阳性血清变异型国家标准品。 相似文献
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从郑州某鸡场死亡雏鸡的肝脏、脾脏和肾脏中分离纯化细茵,通过致病性试验、生化试验,并结合临床症状、病理变化和培养特性鉴定为鸡白痢沙门氏菌.经传代分离株、培养细菌、收集细菌、灭活细菌、浓缩抗原、调整抗原浓度、无菌检查及染色制备鸡白痢沙门氏菌平板凝集抗原,建立了检测鸡白痢血清抗体的微量平板凝集法.该方法具有特异性强、操作简便快速的优点. 相似文献
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银川地区部分鸡场鸡白痢的流行病学调查 总被引：3，自引：2，他引：1
为了解银川地区鸡白痢沙门氏菌病的感染现状,于2007-2009年间,随机选择不同鸡场和农户的鸡1 702只,进行采血并分离血清,采用鸡白痢血清平板凝集试验进行检测.结果表明,1 702份血清中,检出阳性血清110份,平均阳性率为6.46%,统计结果显示,该次调查中较大规模的鸡场鸡白痢的感染率小于小型养鸡场和农户(P<0.05):鸡白痢的感染率与鸡的品种、日龄、饲养方式无关.3年间,鸡白痢的感染率呈现递减趋势(P<0.05).结合调查结果分析了发病原因.并提出了综合防治意见和措施. 相似文献
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从郑州某鸡场死亡雏鸡的肝脏、脾脏和肾脏中分离纯化细菌，通过致病性试验、生化试验，并结合临床症状、病理变化和培养特性鉴定为鸡白痢沙门氏菌。经传代分离株、培养细菌、收集细菌、灭活细菌、浓缩抗原、调整抗原浓度、无菌检查及染色制备鸡白痢沙门氏菌平板凝集抗原，建立了检测鸡白痢血清抗体的微量平板凝集法。该方法具有特异性强、操作简便快速的优点。 相似文献
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本研究旨在建立猪水肿毒素抗体的快速检测方法.以纯化的猪水肿毒素A亚基基因片段的原核表达产物作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单抗,并利用表达蛋白和猪水肿毒素A亚基单抗酶结合物建立了竞争ELISA方法检测猪水肿毒索抗体.经过研究确定抗原包被浓度为0.32 btg·mL-1,待检血清最佳稀释度为1:2,酶标单抗工作浓度为1:3 200,血清抑制率大于40 %为阳性.应用单抗竞争ELISA和细胞毒性中和试验同时对60份血清进行猪水肿毒素抗体检测,竞争ELISA的检出率为33.8%,细胞毒性中和试验检出率为30.9%,两者符合率达88.2 %.试验结果表明,该ELISA方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性好,操作简便.本方法的建立在实验室诊断的标准化、猪水肿病疫苗免疫效果的评价及流行病学调查方面具有较高的应用价值. 相似文献
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鸡白钢是由沙门氏菌引起的一种传染性鸡病，发生本病会给养鸡业造成严重威胁和巨大经济损失。因家禽的卵黄中存在母体抗体，据报道卵黄中免疫球蛋白IgG的含量等于或高于母鸡血清中的含量。所以可应用卵黄代替血清来检测鸡白痢。为了调查卵黄与血清内抗鸡白痢沙门氏菌抗体阳性率的关系，笔者在某鸡场进行了鸡白痢杆菌病全血平板凝集试验和卵黄平板凝集试验的比较试验。1材料鸡白痢沙门氏杆菌全血凝集反应多价抗原与阳性血清由长春制品厂生产。灭菌缓冲生理盐水、丙同、平皿、注射器、吸管、剪刀、银子、平面玻璃、牙签等均系市售品。试验母… 相似文献
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为比较不同方法检测鸡白痢沙门氏菌抗体消长的规律,以便为种鸡场净化提供科学指导,本研究以鸡白痢沙门氏菌活菌和灭活免疫原分别接种SPF鸡,采用平板凝集、微量凝集和ELISA试验定期检测血清中的特异性抗体,并以Kappa检验判定不同检测方法之间的一致性程度。结果显示,平板凝集试验在接种后检出抗体阳转的时间早于ELISA,但ELISA检出抗体阳性的持续时间更长,且更符合抗体消长规律;3种检测方法的结果之间仅具有微弱一致性(Kappa系数为0.002~0.295)。本研究结果表明,不同鸡白痢沙门氏菌抗体检测方法之间存在较大差异,但从总体来看,ELISA无假阳性干扰,检出抗体的持续时间较长,更符合抗体消长规律,在单一鸡白痢沙门氏菌感染的情况下,更有利于种鸡场对该病进行净化。 相似文献
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用热酚-水法提取沙门氏菌O抗原,包被酶标板,建立了一种检测鸡沙门氏菌血清抗体的ELISA方法。包被抗原浓度为500ng/孔～32μg/孔,均可取得满意结果。提纯抗原与鸡的其他几种病原的抗血清不发生交叉反应。与直接凝集法(DA)比较,检测352份血清样品,ELISA阳性170份,占48％,DA阳性56份,占16％。 相似文献
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为比较不同方法检测鸡白痢沙门氏菌抗体消长的规律，以便为种鸡场净化提供科学指导，本研究以鸡白痢沙门氏菌活菌和灭活免疫原分别接种SPF鸡，采用平板凝集、微量凝集和ELISA试验定期检测血清中的特异性抗体，并以Kappa检验判定不同检测方法之间的一致性程度。结果显示，平板凝集试验在接种后检出抗体阳转的时间早于ELISA，但ELISA检出抗体阳性的持续时间更长，且更符合抗体消长规律；3种检测方法的结果之间仅具有微弱一致性（Kappa系数为0.002~0.295）。本研究结果表明，不同鸡白痢沙门氏菌抗体检测方法之间存在较大差异，但从总体来看，ELISA无假阳性干扰，检出抗体的持续时间较长，更符合抗体消长规律，在单一鸡白痢沙门氏菌感染的情况下，更有利于种鸡场对该病进行净化。 相似文献
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我国鸡白痢沙门氏菌的血清学分型 总被引：5，自引：0，他引：5
鸡白痢沙门氏菌是肠杆菌科沙门氏菌属中的一个成员，按照Ｋａｕｆｍａｎｎ－Ｗｈｉｔｅ体系，鸡白痢沙门氏菌属于Ｄ血清群，其抗原结构式为１，９，１２：－：－。Ｙｏｕｎｉｅ（１９４１）首次发现用通常的标准抗原对正在流行鸡白痢的鸡群采用标准凝集试验检疫时呈阴性；... 相似文献
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琼脂扩散法排除平板凝集法中的假阳性鸡白痢 总被引：1，自引：0，他引：1
<正> 一、全血平板凝集不但能检出鸡白痢特异性抗体而且也能检出非异性抗体(类属抗体)。上表说明鸡白痢全血平板凝集阳性血清不但能凝集白痢沙门氏菌,而且也能凝集大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、葡萄球菌。因为这些细菌具有和鸡白痢沙门氏菌抗原中相同或相近似的抗原,白痢鸡血清中有特 相似文献
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<正>黄芩为唇形科植物黄芩的根,具有清热燥湿、泻火解毒、抗病原体、抗炎、调节免疫功能、镇静、保肝、利胆、促凝血、安胎等功效。1对鸡白痢的治疗试验1.1鸡白痢沙门氏菌标准血清、鸡白痢沙门氏菌标准抗原(作对照用)。1.2亚硒酸钠增菌培养基、三糖铁培养斜面、S.S.培养基自备。1.3黄芩提取物由华北制药有限公司提供。 相似文献