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在对ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒进行血清学鉴定之后，于鸭胚（ＤＥ）、鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）、鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚肝细胞（ＥＣＬ）上适应培养。结果表明，ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒，该病毒能在ＤＥ、ＤＥＦ、ＣＥＬ上增殖，在ＤＥ上增殖，尿囊液的血凝价（ＨＡ）可达１：２０４８０－１：３２７６８０倍。 相似文献
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将火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）接种于鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）后,用显微镜观察病变（ＣＰＥ）达５０％时添加等量的健康ＣＥＦ,继续培养至ＣＰＥ达８０％时收获培养物,此时病毒蚀斑数最高。 相似文献
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ＡＥＶＶａｎＲｏｅｋｅｌ鸡胚适应株在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚神经胶质细胞（ＣＥＢ）传代,用盲传至第６代的ＣＥＦ、ＣＥＢ制成荧光标本。建立了ＡＥＶ荧光抗体检测方法,确定了待检血清稀释度１∶１０和荧光抗体ＦＩＴＣ羊抗鸡ＩｇＧ的稀释度１∶１０的工作浓度。通过对ＮＤＶ、ＭＤＶ、ＩＢＤＶ、ＡＩＶ、Ｒｅｏ等标准阳性血清的交叉试验,证实该法特异性强,且简单、方便、经济,适合于鸡群ＡＥＶ抗体的检测。 相似文献
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本试验对鸡传染性法氏囊炎（ＩＢＤ）二价细胞苗在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上培养所用条件进行了系统研究。对ＣＥＦ的制作，抗生素的选用，血清的浓度，接毒时间，接毒量，收获时间等进行了测定，其最佳条件为：用０．２５％的胰蛋白酶消化１０分钟制得的ＣＥＦ最好；在使用的ＰＢＳ缓冲液中加入１０００Ｕ／ｍｌ的庆大霉素可有效地防止污染；生长液用５％的小牛血清、维持液用１％的小牛血清最佳；接毒时间为生长２４小时的ＣＥＦ 相似文献
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磷酸钙介导马立克氏病病毒DNA转染鸡胚成纤维细胞 总被引：2，自引：0，他引：2
提取马立克氏病病毒（ＭＤＶ）Ｒｉｓｐｅｎｓｅ株感染的鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）总ＤＮＡ，运用磷酸钙－ＤＮＡ沉淀转染ＣＥＦ，可以成功地得到ＭＤＶ的病变空斑。用每份沉淀含２０μｇ的ＭＤＶ和细胞总ＤＮＡ转染次代ＣＥＦ，其转染形成空斑的数量为４－２２１个，转染频率约为１－０＾－６＝１０＾－５；将磷酸钙－ＤＮＡ沉淀加入到ＣＥＦ中，于３７℃５％ＣＯ２培养箱中培养４ｈ后，室温下用１５％甘油休克２ｍｉｎ，由此可以提 相似文献
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作者建立了两种抗原捕捉酶联免疫吸附试验方法（多抗和单抗ＡＣ－ＥＬＩＳＡ），用于滴定用不同宿主系统增殖的传染性氏囊毒病，这些宿主系统包括ＢＧＭ－７０传代细胞系。鸡胚成纤维细胞和鸡法氏囊，两种检测方法都有较高的特异性，但是多克隆ＡＣ－ＥＬＩＳＡ比单克ＡＣ－ＥＬＩＳＡ更加敏感（Ｐ〈０．０５），结果还表明，滴定ＩＢＤＶ抗原的常规方法（细胞培养物和鸡胚）比多抗ＡＣ－ＥＬＩＳＡ更敏感。 相似文献
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间接免疫荧光检测禽脑脊髓炎病毒抗体 总被引：3，自引：0，他引：3
ＡＥＶ Ｖａｎ Ｒｏｅｋｅｌ鸡胚适应株在鸡胚成纤维细胞和鸡胚神经胶质细胞传代，用盲传至第６代的ＣＥＦ，ＣＥＢ制成荧光标本。建立了ＡＥＶ荧光抗体检测方法，确定了待检血清稀释度１：１０和荧光抗体ＦＩＴＣ羊抗鸡ＩｇＧ的稀释率１：１０的工作浓度。通过对ＮＤＶ，ＭＤＶ，ＩＢＤＶ，ＡＩＶ，Ｒｅｏ等标准阳性血清的交叉试验，证实该法特性强且简单，方便经济，适合于鸡群ＡＥＶ抗体的检测。 相似文献
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提高鸡马立克氏病活疫苗蚀斑计数准确性的几点体会 总被引：1，自引：0，他引：1
提高鸡马立克氏病活疫苗蚀斑计数准确性的几点体会张勇强，侯军（南京药械厂南京，２１００１２）鸡马立克氏病火鸡疤疹病毒活疫苗是利用火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上培养，产生细胞病变（ＣＰＥ）形成蚀斑单位）（ＰＦＵ）这一指标进行出厂羽份的... 相似文献
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将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）Ａ６６侏接种于鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）进行细胞培养,通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查,证明了ＤＨＶＡ６６毒株能够在ＣＥＦ上增殖。试验还表明,犊牛血清对ＤＨＶ增殖具有明显的抑制作用。此外,还根据细胞培养物病毒滴度毒滴度测定结果绘制出了病毒在ＣＥＦ上的生长曲线。 相似文献
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同步与异步接毒法在鸡痘鹌鹑化弱毒细胞苗生产中的比较 总被引：3，自引：1，他引：2
在应用鸡胚原代成纤维细胞（ＣＥＦ）培养鸡辣鹌鹑化弱毒（简称鹌系毒）细胞苗生产中,试验在制备ＣＥＦ同时接入种毒（简称同步法）,与细胞形成单层后再接毒（简称异步法）,两种方法相比较,结果同步法缩短了培养时间,简化了生产工艺。 相似文献
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应用鸡胚法氏囊原代细胞培养鸡IBDV的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
试用鸡胚法氏囊奈代细胞传代，增殖鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），均不同程度地产生特征性细胞病变效应，采用双抗体夹心法ＥＬＩＳＡ和细胞毒回归鸡试验证实，ＩＢＤＶＨ株组织感毒适应于鸡胚法氏囊细胞，并随传代次数增加，病毒增殖能力增强，而在鸡胚成纤维细胞上盲传２代之后才开始出现细胞病变效应，比较了ＩＢＤＶ在鸡胚法氏囊细胞和鸡胚成纤维细胞上增殖能力的差异，讨论了培养基ＰＨ值，小牛血清浓度对鸡胚法氏囊细胞培 相似文献
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将亚克隆获得的分别含有鸡痘病毒（ Ｆ Ｐ Ｖ） Ｂａｍ Ｈ Ｉ相应片段的 ｐ Ｕ Ｆａ、ｐ Ｕ Ｆｃ 和 ｐ Ｕ Ｆｄ ３ 个质粒的单酶切位点,插入 Ｐ１１ Ｐ７．５ Ｌａｃ Ｚ报告基因盒,构建成 ｐ Ｕ Ｆａ１、ｐ Ｕ Ｆｃ１ 和 ｐ Ｕ Ｆｄ１ ３ 个重组载体质粒,在脂质体存在条件下,同 Ｆ Ｐ Ｖ 共同转染鸡胚成纤维细胞（ Ｃ Ｅ Ｆ）,９６ ｈ 后在 Ｘｇａ１ 存在条件下挑选蓝色重组病毒空斑,经３ 次空斑纯化和传代,获得 １ 株可稳定表达 β半乳糖苷酶的重组病毒,并对该重组用质粒作了序列分析。 相似文献
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现在国内外只有少数几家兽医生物药品厂采用ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞 (ＳＰＦ＿ＣＥＦ)来生产鸡马立克氏病疫苗。目前国内只有几家ＳＰＦ种蛋鸡群 ,而ＳＰＦ种蛋数量少 ,成本高 ,满足不了广大兽医生物制品厂的大量需求 ,所以大多数兽医生物制品厂都采用普通的鸡胚成纤维细胞 (ｃｏｍｍｏｎ＿ＣＥＦ)来生产疫苗 ,而普通种蛋常受禽源致病微生物的污染 ,使其疫苗质量不高 ,免疫效果不好 ,给养鸡业带来很大的经济损失。犊牛睾丸细胞已用来生产猪瘟、狂犬病等家畜疫苗 ,此种细胞来源广泛 ,生产性能良好 ,且不受禽源致病微生物的污染 ,能否替代ＳＰＦ… 相似文献
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鸡副嗜血杆菌（HPG—A221.C668）对10个家系BWEL—SPF鸡胚的感？… 总被引：1，自引：1，他引：0
用鸡副嗜血杆菌国际标准株（ＨＰＧ－Ａ２２１．Ｃ６６８０分别接种１－１０个家系的ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡６月龄鸡胚,观察攻毒后１６－３０小时鸡胚死亡的情况。结果,第５,７,８家系死亡率为１００％,１,４,６家系死亡率为９０％;２,３,９,１０家第死亡率为８０％。８５％,１０个家系ＨＰＧ平均死亡率为９０．５％。对照组（ＨＷＬ－ＳＰＦ鸡胚）平均死亡率为９０％。 相似文献
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ＭＤＶＣＶＩ９８８株是由Ｒｉｓｐｅｎｓ等人（１９７２）采用原代鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）健康白色来航鸡中分离得到的,其第３５代细胞培养毒是目前荷兰使用最为广泛的ＭＤ疫苗。１９８３年荷兰约有４７６０多万只蛋鸡接种过该疫苗;约有９７０万只蛋鸡接种了火鸡疤疹病毒（ＨＶＴ）Ｆｃ１２６疫苗。这段时间因ＭＤ造成的损失相对较低,死亡率不超过２．５％。在特定条件下（通常是环境卫生较好的农场）,ＭＤＶＣＶＩ９８８疫苗第３５代细胞培养物传代病毒能表现出令人满意的保护效力,对生产鸡只也很安全。关于ＭＤ疫苗,特别是ＣＶＩ… 相似文献
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应用间接荧光抗体染色法监测鸡传染性支气管炎抗体的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
本文对间接荧光抗体染色法监测鸡传性支气管炎抗体进行了研究。试验结果表明感染鸡性染性支气管炎病毒的鸡成纤维细胞（ＣＥＦ）不适宜做ＩＦＡ方法的抗原，而感染ＩＢＶ后３６－４８小量的鸡胚肾细胞制做ＩＦＡ抗原效果很好。应用１０％犊牛血清封闭并适当改进洗涤条件要非特异性荧光。本试验将所建立的ＩＦＡ方法与美国ＫＰＬ生产的ＩＢＶ－ＥＬＩＳＡ进行了比较。应用ＩＦＡ方法第七天查出血清抗体。通过对十二个鸡群进行流行病调 相似文献
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传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的培育 总被引：3，自引：0，他引：3
传染性法氏囊病病毒３个变异野毒株ＪＤ１、ＪＤ２、ＨＢ）和２个经验血清型１毒株、ＳＣ）直接在鸡胚成纤维细胞上传代,均能不同程度地产生细胞病毒效应（ＣＰＥ）。将５个毒株２１代细胞毒连续回归鸡体５代,除ＪＤ１外,其余毒株均能不同程度导致法氏囊病谱。ＨＺ１４１、ＪＤ１３６、ＳＣ３８、ＪＤ２３７、ＮＢ３８代细胞毒在鸡体内回归５代,均未见法氏囊的眼观病变和组织学变化,囊指数保持稳定,说明ＨＺ１、ＳＣ、ＪＤ１、 相似文献