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相似文献
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1.
用新城疫(ND)单抗酶联试剂盒检测从疑有新城疫病毒强毒感染的鸡群中采集泄殖腔棉拭样品68份,检出阳性20份。随机对其中15份样品进行病毒分离,结果阳性符合率为100%(15/15)。结果表明,该试剂盒特异性强,灵敏度高,诊断快速,易于基层推广应用。为ND的确诊和免疫鸡群中NDV强毒感染的监测提供了新方法。  相似文献   

2.
SPF试验鸡在8、25日龄时接受了2次新城疫(ND)基础免疫,60日龄时分别以标准新城疫病毒(NDV)强毒株、中等毒力和弱毒疫苗株人工感染攻毒。应用单抗ELISA试剂盒,对所有试验鸡泄殖腔棉拭样品进行了30d的连续检测。结果表明:从攻毒后第3d起强毒株试验组检测出多例阳性,检出高峰分别在攻毒后第4~6d和11~15d,与鸡群症状表现的时间相一致;中等毒力和弱毒疫苗株对照组均呈检测阴性。本研究证明单抗ELISA试剂盒可以检测免疫鸡群中NDV强毒感染,为ND的监测提供了新手段。  相似文献   

3.
单克隆抗体夹心ELISA试验检测鸡新城疫病毒抗原的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
从10株抗鸡新城疫病毒(NDV)特异性单克隆抗体(MAbs) 中筛选出2株MAbs—M22和F23,分别用作包被抗体和酶标抗体而建立的MAbs—夹心ELISA试验,对提纯NDV的最小检出量为25ng/ml病毒蛋白.NDV鸡阳性血清对本试验的特异性阻断作用和与其他禽类病毒交叉反应的阴性结果,证明本试验对NDV的特异性。从临床疑为鸡新城疫的724只病鸡的口腔棉试样品中共检出阳性502只,其中200个样品与病毒分离试验结果完全一致,两者均查出阳性鸡176只。  相似文献   

4.
根据临床症状、病理变化,采用新城疫单抗酶联免疫试剂盒对病死鸵鸟的泄殖腔及喉气管黏膜刮取样品进行快速检验,初步确诊为新城疫(ND)病毒感染。因此,对患病鸵鸟及未发病的鸵鸟分别按治疗量和预防量注射提纯的山羊抗鸡新城疫血清,配合抗生素治疗,使病鸵鸟康复,控制了疫情。通过进一步的病毒分离培养,新城疫标准阳性血清、鸡法氏袭及禽流感标准阳性血清的中和试验确诊为鸵鸟新城疫。  相似文献   

5.
本文研究了用金色葡萄球菌A旦白协同凝集试验检出新城疫病毒,并首次利用Vero细胞系代替鸡胚成纤维细胞复制新城疫强毒,解决了排除非特异性抗体干扰的疑难问题。用金色葡萄球菌A旦白协同凝集试验检验感染新城疫病毒的鸡和鹌鹑脏器混合病料,以及新城疫病鸡口鼻分泌物,结果均出现典型的阳性反应;用该试验检测新城疫病鸡和病鹌鹑的各脏器的新城疫病毒的含毒量,结果表明肺含毒量最高,脾,脑、肝、心,肾依次减少。本文认为用金色葡萄球菌A旦白协同凝集试验检出新城疫病毒是一种特异性较强、敏感度较高、快速简便、易于推广的新方法。  相似文献   

6.
【背景】副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是猪的上呼吸道病原菌,引起格拉瑟氏病,主要引起断奶前后和保育阶段的猪发病,通常见于5—8周龄的青年猪,发病率一般为10%—15%。该菌有15种血清型,目前主要养猪国家流行的血清型为4型、5型、12型和13型,是严重危害养猪业发展的主要细菌性病原之一。目前国内还没有检测该菌抗体的商品化试剂盒。【目的】研制一种针对副猪嗜血杆菌的快速、敏感和特异性强的抗体检测试剂盒,为格拉瑟氏病的有效防控提供技术支持。【方法】表达并纯化OppA、DppA、HbpA 3种不同的副猪嗜血杆菌ABC转运体周质底物结合蛋白,使用副猪嗜血杆菌阴、阳性参考血清筛选以上3种蛋白中免疫反应性和反应特异性好的蛋白。以筛选的蛋白为包被抗原,建立检测HPS抗体的间接ELISA方法,优化间接ELISA反应条件,并组装试剂盒。在此基础上,确定该试剂盒的敏感性、特异性;通过对不同时间、不同猪场采集的2 000份临床猪血清样本进行检测,评价该试剂盒的实用性;在以上临床血清样本中随机选取200份,分别以研制的试剂盒、间接血凝试验以及进口商品化试剂盒进行检测,比较检测结...  相似文献   

7.
为筛选抗鸡新城疫中药复方并观察中药复方对雏鸡免疫内分泌调节的影响,将152羽30日龄健康免疫雏鸡随机分为5组:3个中药复方组(方1、方2、方3)、病毒对照组和空白对照组.人工感染鸡新城疫病毒(NDV)后,观察鸡群的发病情况,并于试验各期随机心脏采血,测定外周血淋巴细胞转化和血清抗体、白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、甲状腺素(T4)及胰高血糖素(Glu)的水平.结果表明:中药复方能延缓鸡新城疫的发病时间,减轻病理损伤,促进病鸡康复,有效降低鸡的死亡率,尤以方3效果最好.方1和方3能快速提高抗体水平;方1能提升血清IFN-γ和T4的水平,方2能提高血清IL-2的含量,方3则可提高血清IL-2、IL-6和T4的水平,3个中药复方都可降低鸡死亡高峰期血清IL-6和Glu的水平.研究表明,中药复方能快速刺激免疫鸡体内体液免疫应答,并通过免疫内分泌整体调节途径以抵抗NDV感染,不同组方原则的复方调节途径可能也不一致,但方3的效果整体上优于方1和方2.  相似文献   

8.
绵羊肺炎支原体间接血凝诊断方法的建立   总被引:3,自引:1,他引:2  
用绵羊肺炎支原体抗原致敏经戊二醛处理的绵羊红细胞,制备成间接血凝试验抗原,通过IHA来检测绵羊支原体性肺炎血清抗体.致敏绵羊红细胞的最佳抗原浓度为100μg/mL,血清效价≥1∶8即为阳性,效价≤1∶4者判为阴性.该方法具有很好的敏感性、特异性和可重复性,而且操作简单,适合大范围推广应用.  相似文献   

9.
应用新城疫单抗酶联试剂对一群发生疑似新城疫的绿孔雀群进行快速诊断,采用肛门泄殖腔棉拭取样方法对病孔雀取样,应用双单抗夹心ELISA试验检出多数病死孔雀新城疫强毒抗原阳性,诊断该群绿孔雀发生了新城疫。用流行病学调查、临床症状观察、病理剖检、病毒分离、鉴定和毒力试验的经典诊断方法及新城疫疫苗紧急防疫效果观察验证表明,新城疫单抗酶联试剂盒诊断孔雀新城疫简便、快速、准确。  相似文献   

10.
本试验用鸡胚大量繁殖鸡传染性支气管炎病毒(IBV),收集尿囊液,用1%胰蛋白酶处理制备IBV血凝抗原,建立了血凝—血凝抑制(HA—HI)检测IBV抗体的方法,其特异性强、操作简便。另外,本试验建立Dot—ELISA方法用于检测IBV,病料经处理后,点样于硝酸纤维素膜,加兔抗IBV抗体,经PPA—DAB—H_2O_2系统显色,其检测结果与双抗体夹心ELISA的检测结果一致。两种诊断方法的建立为临床上检测病原和监测抗体提供了便捷的手段。  相似文献   

11.
为了比较研究红细胞吸附释放法、PEG-6000沉淀法和超速离心法对新城疫病毒的纯化效果,将含有NDV的鸡胚尿囊液分别用上述3种方法处理,并测定血凝(HA)效价。结果表明,红细胞吸附释放法中采用50%的醛化红细胞纯化病毒效果最佳;PEG-6000沉淀法中,用9%的PEG-6000加1%NaCl处理病毒后再沉淀2~4 h效果最佳;采用超速离心法纯化的病毒主要分布在40%和50%蔗糖区带之间。3种方法比较,以超速离心法效果最好,红细胞吸附释放法和PEG-6000沉淀法纯化效果差异不大。  相似文献   

12.
卵黄抗体测定与鸡新城疫免疫接种的应用研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
利用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验,对来自同一机体和同一鸡群非同一机体的2796只罗曼蛋鸡血样及蛋样进行了鸡新城疫血清和卵黄抗体水平的检测。结果表明:血清和卵黄无论来自同一机体,还是来自同一鸡群,所测抗体效价基本一致。对610枚入孵种蛋不同时间卵黄抗体和该批种蛋孵出的610只雏鸡不同日龄血清抗体水平进行了检测,发现种蛋卵黄抗体效价与雏鸡血清抗体效价有一定的相关性,用卵黄监测种蛋的抗体水平可以得知雏鸡出壳后首免时间。  相似文献   

13.
鸡新城疫免疫胶体金诊断技术的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
为了建立一种快速、简便的检测鸡新城疫病毒(NDV)的胶体金免疫层析法(GICA),采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的ND抗体,并包被在玻璃纤维素膜上,另外将纯化的ND抗体和纯化的兔抗鸡抗体包被在硝酸纤维素膜上,组装成ND快速检测试纸条.用本试验研制的ND快速检测试纸条检测收集的24份样品,其结果与HA结果一致,符合率100%;当病毒HA效价在1∶40以上时,试纸条均能检测为阳性;ND快速检测试纸条与已知的马立克病(MD)病料和鸡传染性法氏囊病(IBD)病料的上清液无交叉反应出现,且保存6个月后重复性100%.试验证明,建立的GICA是一种快速、灵敏、特异的抗原检测方法,可用于鸡新城疫诊断,具有广泛应用价值.  相似文献   

14.
In order to develop an ELISA assay with synthetic peptides for the detection of antibody to the nonstructural proteins of foot-and-mouth disease virus, specific peptides were synthesized by a solid-phase method according to FMDV NSPs B-cell epitopes, and were conjugated to carrier protein BSA. An ELISA system was developed to detect FMDV NSPs antibody with the conjugated proteins as the coating antigen. The optimal coating concentration of the antigen was determined as 2.5 μg mL-1. The comparative study of this assay with UBI NSP ELISA kit and national commercial 3ABC ELISA kit in the detection of 199 serum samples showed that they were very coincident, and the identity rates were 96.48 and 97.48%, respectively. The development of ELISA using the synthetic peptides as coating antigen is specific, reproducible, stable, and easy, and can be used to differentiate FMDV infected pigs from immunized pigs.  相似文献   

15.
副猪嗜血杆菌间接血凝诊断液的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
将分离纯化的副猪嗜血杆菌5型超声裂解后,和致敏双醛处理的健康绵羊红细胞,制成副猪嗜血杆菌5型间接血凝诊断液,用于检测血清中的抗副猪嗜血杆菌抗体的效价。实验表明该法操作简便,特异性强,不与其他传染病阳性血清发生交叉凝集。  相似文献   

16.
某鹌鹑养殖场有部分产蛋鹌鹑发病,病鹌鹑在死前无特别明显的临床症状。对病(死)鹌鹑作病理剖检后取9羽鹌鹑内脏及脑进行实验室诊断,分别做细菌学检验和病毒学检验,结果显示:通过细菌学检验从病料中分离的分离物多为大肠杆菌,另外分离到少数克雷伯氏菌;通过病毒学检验分离到的病毒能与鸡红细胞发生血凝并能被新城疫病毒阳性血清所抑制。因此,该次病例由病毒与细菌混合感染所致。  相似文献   

17.
An antibody detection procedure based on agglutination of autologous red cells has been developed for samples of whole blood. A nonagglutinating monoclonal antibody to human red blood cells conjugated to a synthetic peptide antigen (in this case residues 579 to 601 of the HIV-1 envelope precursor, Arg-Ile-Leu-Ala-Val-Glu-Arg-Tyr-Leu-Lys-Asp-Gln-Gln-Leu-Leu-Gly-Ile-Trp- Gly-Cys - Ser-Gly-Lys) permitted the detection of antibodies to the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) in 10 microliters of whole blood within 2 minutes. Agglutination was specifically inhibited by addition of synthetic peptide antigen but not by unrelated peptides. The frequency of false positive results was 0.1% with HIV-1 seronegative blood donors (n = 874). The false negative results were approximately 1% (n = 81). The autologous red cell agglutination test is potentially suitable for simple, rapid, qualitative screening for antibodies to a variety of antigens of medical and veterinary diagnostic significance.  相似文献   

18.
To determine if the maternal antibody from breeders vaccinated with cell culture-adapted reticuloendotheliosis virus (REV) could protect chicks from early REV infection, one-day-old chicks with or without anti-REV maternal antibodies were inoculated with REV, and then their growth rates and antibody titers to Newcastle disease virus (NDV) and avian influenza virus (AIV), after vaccination with inactivated vaccines, were compared. This study indicated that REV infection could cause growth retardation and severely inhibit immune reactions to inactivated vaccines against NDV and Avian influenza virus (AIV, H9 and H5) in one-day-old broilers without maternal antibodies specific to REV. Maternal antibody from breeders vaccinated with an attenuated REV vaccine effectively protected REV-challenged birds from growth retardation and immunosuppression on antibody reactions to NDV and AIV vaccines. Four weeks after vaccination, the HI titers to NDV, AIV-H9, and AIV-H5 in maternal antibody positive and negative groups were 3.36 +- 2.04 versus 1.58± 1.69 (P〈0.01), 6.27±3.87 versus 0.71 ± 1.60 (P〈0.01), and 6.72±3.92 versus 0.54± 1.44 (P〈0.01). Maternal antibodies from breeders vaccinated with REV vaccine could successfully protect chicks from REV infection and effectively prevent REV-induced growth retardation and immunosuppression in antibody responses to NDV and AIV.  相似文献   

19.
新城疫是由新城疫病毒引起的一种高度接触性传染病,严重危害全球养禽业.DNA疫苗因其独特的安全、有效等特点将会是解决传统疫苗不足的新途径.为了评价NDV保护性抗原F、HN融合基因的效果,以PBS作为空白对照,将pVAX Ⅰ、pVAX Ⅰ-F、pVAX Ⅰ-HN和pVAXⅠ-F-HN四种质粒肌肉注射2周龄雏鸡,一免后二免.IHA检测免疫期血清样本(1次/7d)抗体效价;二免后,FCM检测外周血淋巴细胞亚群,淋巴细胞增殖实验检测脾细胞淋巴细胞增殖情况;免疫完毕14d后用105 EID50的lasota株NDV滴鼻攻毒,统计发病率、死亡率.结果:F、HN融合基因诱导机体体液免疫和细胞免疫水平显著提高,攻毒后pVAX Ⅰ-F组保护率为30%,pVAX Ⅰ-HN组为46.7%,pVAX Ⅰ-F-HN组保护率为93.3%,表明F、HN融合基因DNA疫苗具有明显的免疫效果.  相似文献   

20.
检测了56例马骡大肠阻塞时12项血液指标的变化。结果表明,病畜血糖、血液乳酸、齿龈毛细血管再充盈时问显著升高(P<0.05),红细胞总数、血红蛋白、红细胞压积均有不同程度升高,但差异不显著(P>0.05),血浆总蛋白、白细胞总数、血清钠、钾、氯及血清转氨酶均在正常范围内(P>0.05)。表明大肠阻塞马骡存在酸中毒、高血糖及轻度脱水。  相似文献   

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