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1.
应用生长良好的第２４～４３代ＭＡ１０４传代细胞接种兔轮状病毒（ＬａＲＶ），待出现９０％以上细胞脱落时收获病毒液．制作纯化抗原。用混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体．制备检测ＬａＲＶ抗体的快速诊断膜，进行Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ试验，检查１０只人工感染兔血清．于感染后第１０天出现阳性反应，２１天全部阳转。应用该方法做了ＬａＲＶ阳性血清阻断试验、其它病的兔血清排除试验，对３８只健康兔血清的检查均为阴性。利用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对１３１６份兔血清的检查中．群养兔阳性率８３．５９％，散养兔为２７．５％。试验结果证明本法特异性强、敏感性高，操作简便、快速．适于现地ＬａＲＶ免疫监测及流行病学调查。 相似文献
2.
从哈尔宾自然腹泻幼兔的粪样中，成功地分离出一株兔轮状病毒（ＬａＲＶ，Ｎ５），经（ＭＡ１０４）细胞适应继代２４代，２４代细胞培养养蚀病斑滴度为１０＾９ＰＦｕ／ｍｌ蚀斑试验培养瓶在３７℃培养５天，形成直径为１～５ｍｍ的圆形蚀斑。 相似文献
3.
某商业兔场已４年未发生兔病毒性出血症（ＲＨＤ），在对２３８只兔的ＲＨＤＶ抗体普查中发现兔血清转化现象，且其原因是由一株与ＲＨＤＶ抗原性相关、但无致病性的嵌杯病毒所致。３１日龄断奶仔兔的阳性率为３３．３％，断奶后５～７天、１３～１４天、１９～２０天、３２～３３天的阳性率分别为２７．６％、５６．１％、９０．３％、１００％。种兔血清全为阳性。种兔和刚奶仔兔的ＲＨＤＶ抗体主要是ＩｇＧ。然而，在断奶后１３～１４天却主要是ＩｇＭ和ＩｇＡ。大龄育肥兔ＩｇＭ和ＩｇＡ减少，ＩｇＧ增多。血清转化时未出现ＲＨＤ特异症状。由此可知，肉兔在断奶后不久就感染了这种非致病性病毒。 相似文献
4.
猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗免疫程序研究 总被引：4，自引：0，他引：4
给空怀母猪免疫接种猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗１５００个兔感染量，以ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ监测其血清抗体。结果，ＥＬＩＳＡ效价ＯＤ值保护率６～７个月为１００％，８个月为７７．５％，表明１５００个兔感染量免疫母猪，一年应免疫接种２次，才能避免非免空隙，保持坚强免疫力。给怀孕母猪免疫，所产亲代仔猪的母源抗体消失很快，ＥＬＩＳＡ效价ＯＤ值保护率，１０日龄为９６．５％，２０日龄为７１．６％，３０日龄为４０％，４０日龄为１２．５％。给３０日龄仔猪免疫接种１５００个兔感染量，以ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测其免疫后６、７、８、９、１０个月的血清抗体，结果其ＥＬＩＳＡ效价ＯＤ值保护率６～９个月均为１００％，１０个月为９４％；攻ＨＣＶ强毒，６～１０个月均１００％保护。综上试验证明，仔猪３０日龄、母猪空怀免疫接种猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗１５００个兔感染量，是最佳的免疫程序。 相似文献
5.
应用单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验检测兔出血症病毒 总被引：3，自引：0，他引：3
应用建立的单克隆抗体夹心酶联兔疫吸附试验（ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）,检测了人工感染兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）ＤＪＲＫ细胞毒、肝毒的兔以及自然感染ＲＨＤＶ的兔的组织样品。结果表明,感染死亡兔的肝、脾、肾、骨髓样品病毒抗原的检出率为１００％,淋巴结和肌肉的检出率分别为９７．５％和７９．５％。ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ能检出肌肉中血凝试验不能检出的ＲＨＤＶ抗原。此外,还用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测了肝毒人工感染兔血中ＲＨＤＶ的动态,并对１０份兔出血症脏器灭活苗的效价作了滴定。 相似文献
6.
用兔大肠杆菌（ＲＣ８９１１２４）制备包抗原，建立了检测兔抗大肠杆菌血清抗体的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法，抗原最佳稀释度为１：５，待检务清最佳释度为１：１０，酶标记山羊抗兔ＩｇＧ最佳稀释度为１：４０００。对３０只大肠杆菌菌苗免疫兔进行检测，免疫后８天血清抗体即全部阳转，敏感性为１００％，分别对２３只兔轮状病毒，２０只病毒性出血症，２２只巴氏杆菌，７天波氏杆菌，１８只链球菌，２１只葡萄球菌感染兔进行血清检 相似文献
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兔轮状病毒的流行病学调查徐玉崔尚金刘焕奇毕可东（山东莱阳农学院动物科学系，莱阳２６５２００）兔轮状病毒（ＬａＲＶ）是呼肠孤病毒科轮状病毒属的成员，是引起幼兔腹泻的重要病原之一。在未曾感染过ＬａＲＶ的兔群中有较高的致死率，已引起国内外学者的广泛重视。... 相似文献
8.
用兔大肠杆菌（ＲＣ８９１１２４）制备包被抗原，建立了检测兔抗大肠杆菌血清抗体的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法，抗原最佳稀释度为１∶５，待检血清最佳稀释度为１∶１０，酶标记山羊抗兔ＩｇＧ最佳稀释度为１∶４０００。对３０只大肠杆菌菌苗免疫兔进行检测，免疫后８天血清抗体即全部阳转，敏感性为１００％。分别对２３只兔轮状病毒、２０只病毒性出血症、２２只巴氏杆菌、７只波氏杆菌、１８只链球菌、２１只葡萄球菌感染兔进行血清检测，大多数均呈阴性反应，其特异性为９３．７％；２０只健康兔血清，均为阴性。对现地采集的４５２份兔血清进行检测，污染率平均为４８．２％。试验证明，本方法敏感性高、特异性好、操作简便快速、具有良好的重复性，适用于现地检疫。 相似文献
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ELISA检测兔巴氏杆菌病抗体的研究 总被引：3，自引：0，他引：3
应用ＥＤＴＡ处理和超声波裂解法提取多杀性巴氏杆菌的荚膜多糖和外膜蛋白抗原，包被酶标板，用ＨＲＰ－ＳＰＡ代替酶标抗体，建立了检测兔多杀性巴氏杆菌病抗体的间接法ＥＬＩＳＡ。试验确定抗原的包被浓度为６．０５μｇ／ｍｌ，ＨＲＰ－ＳＰＡ的适宜稀释度为１１００００，血清ＥＬＩＳＡ滴度在１４００以上判为阳性。测定了多杀性巴氏杆菌灭活菌苗免疫兔血清１０份，均呈阳性，抗体滴度在１１２８０～１４０９６０范围内呈正态分布；血清几何平均效价为１５１２０。重复４次测定１０份阳性血清，其ＯＤ值之标准差（ＳＤ）＜０．１０，变异系数（ＣＶ）＜１０．０％。本法与琼脂扩散沉淀试验相比，敏感度提高约１５７５倍。ＥＬＩＳＡ不仅敏感、特异、快速、简便，而且经济、易于重复，适于推广应用。 相似文献
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应用间接免疫荧光法检测禽网状内皮组织增生病病毒抗体的研究 总被引：5，自引：0，他引：5
用禽网状内皮组织增生病病毒（ＲＥＶ）感染ＳＰＦ鸡胚次代成纤维细胞涂片为抗原，建立了检测ＲＥＶ抗体的间接免疫荧光法（ＩＦＡ）。确定了待检血清稀释度１：６４和兔抗鸡ＩｇＧ荧光抗体的稀释度１：３２的工作浓度。应用该ＩＦＡ方法对人工感染ＲＥＶ的２０只３０日龄ＳＰＦ鸡进行了检测，接种后４天时均呈阴性反应，７天时８只鸡呈阳性反应，１４天２０只全部呈阳性的反应。通过对ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＡＬＶ、ＭＤＶ、ＣＩＡＶ、 相似文献
11.
用禽网状内皮组织增生病病毒（ＲＥＶ）感染ＳＰＦ鸡胚次代成纤维细胞涂片为抗原,建立了检测ＲＥＶ抗体的间接免疫荧光法（ＩＦＡ）。确定了待检血清稀释度１∶６４和兔抗鸡ＩｇＧ荧光抗体的稀释度１∶３２的工作浓度。应用该ＩＦＡ方法对人工感染ＲＥＶ的２０只３０日龄ＳＰＦ鸡进行了检测,接种后４天时均呈阴性反应,７天时８只鸡呈阳性反应,１４天２０只全部呈阳性的反应。通过对ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＡＬＶ、ＭＤＶ、ＣＩＡＶ、ＡＩＶ等标准阳性血清的交叉试验,证明该方法特异性强。应用该ＩＦＡ方法对我国辽宁、山东、黑龙江省部分鸡群进行ＲＥＶ抗体检测,证明该方法特异性强、敏感性高,适于在生产中推广应用。 相似文献
12.
旋毛虫感染兔血清抗体消长规律的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
应用旋毛虫肌幼虫干燥冷浸可溶性抗原与聚醛化聚苯乙烯（ＰＡＰＳ）载体微球共价交联制成快诊试剂,对旋毛虫感染兔血清进行检测,初步探明其血清抗体的消长规律。实验显示,以１６０００条肌幼虫／只经口饲喂感染１０只兔,于第７天可检出抗体,并分别于感染后第４５￣４９天先后达到抗体最高水平,然后维持一段时间（２０￣３０天左右）,以后逐渐缓缓下降。此结果与旋毛虫肌幼虫感染宿主后的生活周期相吻合。肌幼虫在肠道内发育为 相似文献
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用单抗２Ｂ４包被ＥＬＩＳＡ微孔反应板，将处理后的粪样和酶标兔抗ＬａＲＶＩｇＧ同时加入包被孔内孵育，置微型振荡器上振摇，建立了检测粪样中兔轮状病毒（ＬａＲＶ）抗原的单抗－ＥＬＩＳＡ一步法快速诊断技术，与常规ＥＬＳＩＡ、病毒分离培养、电镜、荧光抗体等作了实验室和临床应用比较，结果证明单抗－ＥＬＩＳＡ一步法敏感、特异、快速、简便、适于基层临床推广应用 相似文献
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同一克隆两个不同变异体的伊氏锥虫在兔体内抗原变异研究 总被引：4，自引：0，他引：4
为了解伊氏锥虫在兔体内感染后期抗原变异的情况及较同一克隆不同变异体锥虫在兔体内抗原变异情况,用伊氏锥虫安徽株单虫克隆ＳｈＴａｔ１．２感染兔,在兔体３０天中每隔３天及感染后５１、５４、５７天（兔５８天死亡）分离兔血中锥虫并克隆,获得１３个克隆锥虫群体,经间接免疫荧光试验和ＡＢＣ酶标记试验鉴定为１０个抗原性互不相同的抗原变异体（Ｖａｒｉａｂｌｅ Ａｎｔｉｇｅｎ Ｔｙｐｅ,ＶＡＴ）,其中早期（感染锥虫３ 相似文献
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用ＭＡ－１０４细胞培养，结合电镜和ＲＮＡ电泳检查，自幼兔腹泻粪便中分离鉴定出一株致细胞病变的兔轮状病毒ＡＤ７．４株，该株传至第４代时，于３６小时开始出现细胞病变效应（ＣＰＥ）；传至第７代时，于２４小时ＣＰＥ达７５％，以上，且病毒滴度为１０＾５．０ＴＣＩＤ５０／０．１ｍｌ。 相似文献
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免疫鸡MDV感染后羽毛根HVT的分离及HVT免疫对MDV抗原检测的影响 总被引：3，自引：0，他引：3
５只ＨＶＴ免疫鸡,实验感染ＭＤＶ后的第１～１０周期间,分别采用初次细胞分离培养物上清中的自由病毒粒子鉴定,ｄｏｔ－ｂｌｏｔＤＮＡ杂交和常规ＡＧＰ试验等方法,对并发感染鸡羽毛根进行了病毒及病毒抗原的动态检测与比较。结果显示,在上述羽毛根中可同时存在ＨＶＴ粒子和ＭＤＶＤＮＡ。ＨＶＴ可分离时间为ＭＤＶ攻毒后１～７周;ＭＤＶＤＮＡ最早检出时间为ＭＤＶ攻毒后的第１８～２２天,并达到其持续性（２２～７０ｄ）的检出率最高峰（１００％）;而ＡＧＰ法对此期间鸡只羽毛根ＭＤＶ抗原的最早检出时间在第２２天,且检出率很低。因此,羽毛病毒抗原ＡＧＰ检测法,对免疫鸡只或鸡群ＭＤＶ感染的诊断仍然是特异的,但较单纯感染的检测,其检出率更低,因而更难以反映出免疫鸡群中ＭＤＶ感染的真实状况。 相似文献
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以纯化的兔出血症病毒免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，应用杂交瘤技术获得了分泌抗ＲＨＤＶ单抗杂交瘤细胞１７株，其中有３株杂交瘤细胞分泌单抗的ＥＬＩＳＡ效价为１：４０９６００，１：４０９６；５株单抗具有血凝抑制活性。兔抗ＲＨＤＶ高兔血清对１７株ＭｃＡｂ的ＥＬＩＳＡ抑株为ＩｇＧ２ｂ。各株ＭｃＡｂ与欧洲棕色兔病病毒无抗原交叉反应，也无沉淀反应特性。 相似文献
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刘长明 《中国预防兽医学报》1996,(1)
采用弗里昂１１３抽提结合蔗糖梯度密度离心法从人工感染兔出血症（ＲＨＤ）病兔肚脏组织中纯化ＲＨＤ病毒，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，ＲＨＤＶ由一种结构蛋白构成，分子量为６０ＫＤ，称为ＶＰ６０。应用抗ＲＨＤＶ单克隆抗体进行免疫印迹试验表明，ＶＰ６０可发生蛋白降解，其产物有３８ＫＤ、２８ＫＤ和２６ＫＤ几种多肽成分． 相似文献
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兔出血症病毒结构蛋白及其降解产物的分析 总被引：2，自引：0，他引：2
采用弗里昂１１３抽提结合庶糖梯度密度离心法从人工感染兔出血症病兔肚脏组织中纯化ＲＨＤ病毒，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，ＲＨＤＶ由一种结构蛋白构成，分子量为６０ＫＤ，称为ＶＰ６０。应用抗ＲＨＤＶ单克隆抗体进行免疫印迹试验表明，ＶＰ６０可发生蛋白降解，其产物有３８ＫＤ、２８ＫＤ和２６ＫＤ几种多肽成分。 相似文献