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1.
以自然海水为基础溶液,用二甲亚砜、乙二醇、甘油分别配制不同体积分数的抗冻保护剂溶液,用以激活虾夷马粪海胆精子并且观察其精子活力、受精率及其形态学上的改变。结果表明,经4%~18%的抗冻保护剂处理过的样本精子皆可被激活,并具有受精能力,若抗冻保护剂浓度达到18%以上,则精子全部失活。经4%乙二醇处理过的样本精子活力为最高,平均可达到76.44%(P≤0.05),但在各浓度梯度的样本中均以二甲亚砜处理过的样本受精率最高。这3种抗冻保护剂均对虾夷马粪海胆精子有毒害作用,并且对其精子的活力和受精率有一定的影响。 相似文献
2.
【目的】确定萨罗罗非鱼精子活力最高时各因子的最佳参数,进一步提高尼罗罗非鱼♀×萨罗罗非鱼♂的受精率。【方法】利用显微镜观察对比不同梯度pH、盐度、离子及葡萄糖溶液中萨罗罗非鱼精子的活力状况,考察指标包括精子快速运动时间、寿命及激活率。【结果】pH 7.5~8.0时,萨罗罗非鱼精子激活率最高,达90%;在pH 7.5的条件下,精子快速运动时间和寿命最长,为66.33±2.25和933.17±25.79 s。在25‰~32‰的盐度范围内,萨罗罗非鱼精子活力较强,其中以30‰的精子活力最高,快速运动时间和寿命分别为63.50±2.35和402.50±7.31 s,激活率达90%。随K+浓度的增加,萨罗罗非鱼精子的快速运动时间、寿命及激活率均呈先升高后降低的变化趋势,其中以75 mmol/L的精子活力最高,精子寿命为500.33±8.69 s,激活率为90%。Ca2+对萨罗罗非鱼精子活力有明显抑制作用,其浓度为37.8 mmol/L时精子快速运动时间和寿命最长,分别为38.50±2.43和117.50±3.21 s,精子激活率为80%;而后随Ca2+浓度的增加,精子开始出现聚集现象,活力明显下降,Ca2+浓度增至151.2 mmol/L时,精子已完全失活。相对于K+和Ca2+,葡萄糖可适当延长萨罗罗非鱼精子寿命,其浓度为150 mmol/L时,精子寿命最长,为281.00±5.90 s,激活率达90%。【结论】针对尼罗罗非鱼♀×萨罗罗非鱼♂人工繁殖中受精率低的问题,生产上除了选择优质尼罗罗非鱼卵细胞、优化孵化环境及人工繁殖技术外,还可通过适宜游动介质参数(pH 7.5~8.0、盐度30‰~32‰、75~100 mmol/L K+、37.8 mmol/L Ca2+、100~125mmol/L葡萄糖)激活萨罗罗非鱼精子活力,进而提高其杂交受精率。 相似文献
3.
通过添加不同浓度的甘油、乙二醇、二甲基亚砜(DMSO)和N,N-二甲基乙酰胺(DMA)作为抗冻剂,研究单一抗冻剂和联合抗冻剂对鸡精液冷冻的影响.每个抗冻剂设置4个浓度梯度进行添加--甘油、DMSO和乙二醇为2%、4%、6%、8%;DMA为6%、8%、10%、12%,然后将冷冻效果较好的抗冻剂组合,研究联合抗冻剂对鸡精液冷冻的影响.试验结果表明,这4种抗冻剂中以浓度为6%的甘油对冷冻过程中鸡精子的保护效果最好,其冻后活力达到0.68,精子复苏率达到97.5%,极显著地高于其他各组(P<0.01);抗冻剂组合甘油+DMSO、甘油+乙二醇和甘油+DMA中,甘油+DMSO组精子的冻后活力和复苏率比其他2组略好一些,但差异不显著(P>0.05). 相似文献
4.
【目的】优化大鳞副泥鳅精液超低温冷冻保存方法。【方法】以解冻后的精子活力为参数,调控试验条件,筛选最佳精液稀释液和最佳抗冻剂,优化抗冻剂体积分数和精液稀释比例。【结果】5种稀释液中,稀释液Ⅳ效果最好,冻精活力为35.5(±2.7)%;甘油(GLY)、甲醇(METH)、二甲基亚砜(DMSO)等3种抗冻剂中,5%(V/V)DMSO处理的冻精活力为40.7(±2.5)%,显著高于5%GLY和METH处理的冻精活力;优化DMSO的体积分数发现,10%终浓度的DMSO对精液保护效果较好,冻精活力为54.6(±1.5)%;优化稀释液Ⅳ与精液稀释比例发现,稀释液Ⅳ与精液以3∶1体积比稀释时能达到良好效果,冻精活力可达65.4(±2.3)%。【结论】精液稀释液Ⅳ与精液体积比为3∶1,终浓度10% DMSO为抗冻剂,对大鳞副泥鳅精液超低温冷冻保存的效果最佳。 相似文献
5.
高体革鯻精子超低温保存方法研究 总被引：1，自引：0，他引：1
[目的]对高体革鯻（Scortum barcoo）精子的超低温保存技术进行研究。[方法]首先,用精子活力为标准确定稀释液中NaCl和KCl的最佳浓度;然后,使用二甲亚砜和甘油分别作为抗冻剂,进行超低温保存试验,测定高体革鯻精子复活率和活力。[结果]稀释液中含0.750%NaCl和0.025%KCl时,效果最佳。当二甲亚砜浓度为10%,葡萄糖为5%时,精子复活率和活力分别达到了68.2%和60.7%,保存效果最佳。[结论]稀释液中NaCl和KCl的浓度,对精子活力有明显影响;使用二甲亚砜作为抗冻剂进行低温保存的效果优于甘油;在抗冻保护剂中加入适量葡萄糖会提高保存效果。 相似文献
6.
采用试验生态——显微观察方法对翘嘴鲌精子的生理特性进行了研究,并用两步降温法超低温冷冻保存翘嘴鲌精子,筛选出适宜的稀释液与抗冻剂配方。结果表明,翘嘴鲌适宜的盐度范围为0～0.4%,pH值为5.5～8.0时,精子激活率较高,其中pH值为5.5时,精子运动时间与寿命最长;翘嘴鲌精子在4℃条件下保存84 h仍有48.33%的激活率,在25℃条件下保存84 h时精子死亡。以D-15为稀释液、10%乙二醇(EG)为抗冻剂,采用两步降温法超低温冷冻保存翘嘴鲌精子,解冻后精子活力最高。 相似文献
7.
《江苏农业科学》2016,(1)
研究了不同浓度Na+、K+、Mg2+、Ca2+和葡萄糖溶液对子一代达氏鲟(Acipenser dabryanus Dumeril)精子的影响。结果表明:在Na+浓度为0.25%时,精子寿命(life time,LT)最长,为219.67 s,在浓度为0.20%时精子的快速运动时间(fast movement time,FT)最长,为66.67 s;精子对K+浓度在0.000 4%时LT和FT最长,分别为124.67 s、52.67 s。而后随着浓度升高活力明显受到抑制;与Na+、K+相反,随着Mg2+、Ca2+浓度升高,分别超过0.30%、0.10%浓度后精子产生聚集现象;随着葡萄糖浓度升高,精子LT和FT逐渐延长。研究表明Na+、K+溶液可以延长精子的FT和LT,在Mg2+、Ca2+较低浓度下都表现出对精子产生较强的抑制作用,外源性葡萄糖可被精子利用,适量的浓度提高精子活力,延长精子LT。 相似文献
8.
9.
不同抗冻剂及初冻和解冻温度对鸡精液冷冻保存的影响 总被引：1，自引：0，他引：1
【目的】研究对不同抗冻剂及初冻和解冻温度在鸡精液冷冻保存中的效果.【方法】以‘海兰褐’种公鸡为试验材料,利用液氮制作颗粒冷冻精液,研究不同抗冻剂及初冻和解冻温度对鸡精液冻后活率、复苏率及存活时间的影响,并筛选出最佳的抗冻剂种类、浓度和初冻、解冻温度组合.【结果】3种抗冻剂组合的冷冻效果优于单一及两种抗冻剂组合,且GL 8%+DMA 6%+EG 6%组合的冻后活率、精子复苏率最高,分别为0.46和57.50%,为最佳抗冻剂组合;在此基础上,筛选出最佳初冻和解冻温度组合为-140℃和50℃,其冻后活率和复苏率最高,分别达到0.57和71.40%,并在15～25℃条件下精子存活时间为160min;在鸡精液冷冻保存中快速冷冻要对应快速解冻,慢速冷冻要对应慢速解冻,且前者精液冷冻保存效果较好.【结论】筛选出了最佳的抗冻剂组合及初冻和解冻温度,发现快速冷冻和解冻的鸡精液保存效果较好. 相似文献
10.
为了解北方须鳅 Barbatula barbatula nuda精子的生理特性, 研究了不同离子浓度、葡萄糖浓度、pH、温度等因子的变化对性成熟北方须鳅 (体质量为10～38 g) 精子活力的影响.结果表明: Na+浓度为68 mmol/L时, 北方须鳅精子活力最强, 快速运动时间 ( FT)、寿命 ( LT)、激活率分别为 ( 77± 23) s、(495±154) s、 95%; K+浓度为80 mmol/L时, 精子活力最强, FT、 LT和激活率分别为 (68±10) s、 (412± 162) s和95%; Ca2+浓度为50 mmol/L时, 精子活力最强, FT、 LT和激活率分别为 (77± 13) s、 ( 281± 26) s和95%; 葡萄糖浓度为180 mmol/L时, 北方须鳅精子活力最强, FT、 LT 和激活率分别为 ( 88 ± 11) s、 (272±34) s和90%; 在Tris或甘油溶液中, FT、 LT和激活率均小于对照组; pH 为3. 0～5. 0时精子不运动, pH为7. 0时精子活力最强, FT、 LT和激活率分别为 (87±11) s、 (128±17) s、 90%; 温度为5～20 ℃时, 精子活力变化不显著; 混合激活液A ( Na+ 68 mmol/L、 K+ 80 mmol/L 2种离子溶液的体积比为1 ∶ 1) 及激活液B (Na+ 68 mmol/L、 K+ 80 mmol/L、 Ca2+ 50 mmol/L、葡萄糖180 mmol/L 4种离子溶液的体积比为1 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 1) 皆能提高精子活力, 其FT、 LT、精子激活率分别为 (91±16) s、 (552±90) s、95%, 以及 (112±17) s、 (707±60) s、 95%.研究表明, 北方须鳅精子适宜的温度为5～20 ℃, 适宜pH为7. 0～8. 0, Na+、 K+、 Ca2+、葡萄糖对北方须鳅精子活力有增强效果, 混合激活液B ( Na+ 68 mmol/L、K+80 mmol/L、 Ca2+50 mmol/L、葡萄糖180 mmol/L 4种离子溶液的体积比为1 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 1) 效果最佳. 相似文献
11.
对褐牙鲆精子部分生理特性进行了研究,结果表明,褐牙鲆精浆pH值为(7.90±0.26),精子密度为(1.03×1010)/mL,精浆渗透压为(308.50±7.85) m Osm/kg,K+在精浆中的浓度为 (27±3) mmol/L,Na+在精浆中的浓度为(71±5) mmol/L.对不同盐度和pH与褐牙鲆精子活力和寿命的关系进行了研究,结果表明,在盐度为35,pH为8.0时,精子的活力最高,分别达到(93.33±5.67)%和(89±3.33)%,与其生活环境相适应;褐牙鲆精子寿命为(23±2) min,与已报道其它海水鱼精子寿命相近.分别采用室温(25 ℃)和低温(4 ℃)保存精子,发现精子在室温条件下,可存活4 d,在低温条件下可以存活7 d,证明低温可有效延长精子存活时间.另外,分别采用4种不同稀释液(S1、S2、S3、S4)与4种不同抗冻剂(DMSO、EG、Gly、PG)配制成冷冻保存液对褐牙鲆精子进行超低温冷冻保存研究.结果表明,以S3液作为稀释液,16%的DMSO作为抗冻剂,利用快速降温法对精子进行超低温冷冻保存,38 ℃水浴快速解冻,解冻后的精子获得最高的活力为(84±3.67)%,此方法可用于褐牙鲆精子的长期保存. 相似文献
12.
[目的]明确水体介质参数与高体雅罗鱼精子活力的关系,解决高体雅罗鱼人工繁殖受精率低及鱼苗鱼种生产效率低的技术难题.[方法]以快速运动时间(FT)、寿命时间(LT)和精子激活率为评价指标,探究Na+、K+、葡萄糖及甘油对高体雅罗鱼精子活力的影响.[结果]Na+浓度为135 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为71 s,LT为1020 s,精子激活率为95%;K+浓度为5 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为52 s,LT为280 s,精子激活率为80%;葡萄糖浓度为180 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为78 s,LT为1200 s,精子激活率为95%;甘油浓度为180 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为79 s,LT为1380 s,精子激活率为90%.[结论]适宜浓度的Na+、K+、葡萄糖及甘油具有单独提高高体雅罗鱼精子活力的作用,但高浓度Na+、K+、葡萄糖及甘油对高体雅罗鱼精子的激活率呈明显抑制作用.实际生产中,可选择135 mmol/L Na+、5 mmol/L K+、180 mmol/L葡萄糖或180 mmol/L甘油作为高体雅罗鱼精子的激活液,提高其人工繁殖生产效率. 相似文献
13.
《贵州农业科学》2015,(10)
为提高江鳕的受精率,进行了Na+、Ca2+、pH和葡萄糖溶液对额尔齐斯河江鳕精子活力的影响试验。结果表明:在Na+溶液中,浓度为45mmol/L时精子激活率达90%,且精子快速运动时间(FT)、精子寿命时间(LT)均最高,分别为(44.25±1.72)s和(77.42±1.55)s。在Ca2+溶液中精子活力最高值出现在30mmol/L,其激活率为90%,FT、LT分别为(35.43±3.1)s、(59.98±2.2)s。在葡萄糖135mmol/L溶液中精子FT、LT最高,分别为(80.05±3.7)s和(120.09±5.33)s,精子激活率为90%。pH 8~8.5时,精子激活率高于80%;pH 8.5时FT最高,为(31.53±1.7)s;LT最高值出现在pH 7.5时,为(41.26±2.99)s。江鳕精子适宜存活于pH 8~8.5弱碱性环境中,葡萄糖溶液作为激活介质的精子活力好于Na+和Ca2+。 相似文献
14.
[目的]确定萨罗罗非鱼精子活力最高时各因子的最佳参数,进一步提高尼罗罗非鱼♀×萨罗罗非鱼♂的受精率.[方法]利用显微镜观察对比不同梯度pH、盐度、离子及葡萄糖溶液中萨罗罗非鱼精子的活力状况,考察指标包括精子快速运动时间、寿命及激活率.[结果]pH 7.5～8.0时,萨罗罗非鱼精子激活率最高,达90％;在pH 7.5的条件下,精子快速运动时间和寿命最长,为66.33±2.25和933.17±25.79 s.在25‰～32‰的盐度范围内,萨罗罗非鱼精子活力较强,其中以30‰的精子活力最高,快速运动时间和寿命分别为63.50±2.35和402.50±7.31 s,激活率达90％.随K+浓度的增加,萨罗罗非鱼精子的快速运动时间、寿命及激活率均呈先升高后降低的变化趋势,其中以75mmol/L的精子活力最高,精子寿命为500.33±8.69 s,激活率为90％.Ca2+对萨罗罗非鱼精子活力有明显抑制作用,其浓度为37.8 mmol/L时精子快速运动时间和寿命最长,分别为38.50±2.43和117.50±3.21 s,精子激活率为80％;而后随Ca2+浓度的增加,精子开始出现聚集现象,活力明显下降,Ca2+浓度增至151.2mmol/L时,精子已完全失活.相对于K+和Ca2+,葡萄糖可适当延长萨罗罗非鱼精子寿命,其浓度为150mmol/L时,精子寿命最长,为281.00±5.90 s,激活率达90％.[结论]针对尼罗罗非鱼♀×萨罗罗非鱼♂人工繁殖中受精率低的问题,生产上除了选择优质尼罗罗非鱼卵细胞、优化孵化环境及人工繁殖技术外,还可通过适宜游动介质参数(pH 7.5～8.0、盐度30‰～32‰、75～100mmol/LK+、37.8 mmol/L Ca2+、100～125mmol/L葡萄糖)激活萨罗罗非鱼精子活力,进而提高其杂交受精率. 相似文献
15.
【目的】建立一种南美白对虾精子超低温冷冻保存方法,为南美白对虾优良种质的长期保存奠定基础。【方法】利用胰蛋白酶消化法获得游离的南美白对虾精子,分别使用灭菌天然海水、无钙人工海水、3％等渗NaCl溶液和0．9％生理盐水作为基础液,并以不同浓度的二甲基亚砜（DMSO）、甘油、甲醇及其与海藻糖的混合溶液作为抗冻剂,在4种不同降温程序下超低温冷冻保存南美白对虾精子,然后在不同的温度下复苏冷冻精子,以伊红-苯胺黑染色法检测精子存活率。【结果】使用1．00g／L胰蛋白酶消化精荚5min能获得大量游离的南美白对虾精子,以灭菌天然海水为基础液,以10％DMSO和0．25mol／L海藻糖为抗冻剂,在P．1降温程序（4℃平衡30min,以．5℃／min的速率降至-20℃;-20℃平衡5min,以-10℃／min的速率降至-80℃;-80℃平衡5min,然后置于液氮中保存）下超低温冷冻保存南美白对虾精子,经37℃水浴复苏后精子存活率最高。【结论】建立的南美白对虾精子超低温冷冻保存方法具有可行性,为南美白对虾精子冷冻保存库的建立提供了技术支撑。 相似文献
16.
《福建农业学报》2015,(12)
以中国明对虾体壁N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)为研究对象,探讨10种有机溶剂对酶活力的影响。结果表明:甲醇、乙醇、正丙醇、乙二醇、丙三醇、二甲亚砜、二氧六环和丙酮对NAGase的作用均表现为低体积分数时有一定的激活作用,高体积分数时转化为抑制作用;而正丁醇在0%~55%范围对NAGase表现为激活作用;甲醛对NAGase的抑制作用则呈现明显的浓度效应。进一步研究甲醛和丙酮对NAGase的作用机理,结果显示:甲醛对NAGase的抑制作用是一个可逆过程,而低体积分数丙酮对NAGase的激活作用和高体积分数丙酮对NAGase的抑制作用均属于可逆过程。说明不同有机溶剂对NAGase活力有不同的影响,NAGase在不同体积分数有机溶剂中的催化作用存在差异性。 相似文献
17.
【目的】探究不同冷冻保护剂冷冻猪精子后,精子中Caspases表达模式。【方法】采用普通PCR和荧光定量PCR技术检测Caspase-1~15在添加不同冷冻保护剂冷冻猪精子后的表达谱。【结果】①甘油和乙二醇可以抑制Caspase-2、-8、-13的表达,而DMSO只能抑制Caspase-2和Caspase-8的表达。②海藻糖和乳糖能有效地抑制Caspase-2、-8、-13、-15的表达,而蔗糖能有效地抑制Caspase-1、-6、-13和Caspase-15的表达。③超氧化物歧化酶和过氧化氢酶可以有效防止Caspase-2、-8和Caspase-13的表达,而谷胱甘肽仅可以有效地抑制Caspase-13的表达。④不添加抗冻剂冷冻对凋亡执行子Caspase-3和Caspase-7的表达没有影响。【结论】冷冻保存主要影响凋亡启动子在猪精子中的表达,添加甘油、蔗糖、乳糖能有效抑制猪精子冷冻解冻造成的凋亡。 相似文献
18.
为研究齐口裂腹鱼的精子活力,在显微镜下观察了不同pH值及不同浓度NaCl溶液中精子的运动时间和寿命.结果表明:齐口裂腹鱼精子对pH值的适应范围在5~9之间,pH值为7时精子的活力较好,快速运动时间为(42.56±1.81)s,精子寿命为(84.33±4.77)s;齐口裂腹鱼精子最适的NaCl溶液百分浓度为0.5%,其快速运动时间为(42.78±3.03)s,寿命为(119.89±11.75)s.在较低百分浓度的NaCl溶液中,精子寿命较长,但是快速运动时间较短,当NaCl百分浓度大于0.7%时,精子基本上会被抑制,加水稀释后精子被激活且不影响其活力.pH值过低或过高都会破坏精子的生理结构,使其死亡,0.8%~0.9%NaCl溶液可用作齐口裂腹鱼精液稀释剂室温暂时保存,且短时间内不会影响其活力. 相似文献
19.
《西南农业学报》2017,(7)
【目的】为探讨达氏鲟胚胎在各阶段的形态学特征和发育过程。【方法】用Leica EZ4 HD体视显微镜和Leica DM2500正置荧光显微成像系统分别对全人工繁殖达氏鲟受精卵的胚胎发育过程和组织切片进行了观察和描述。【结果】全人工繁殖达氏鲟受精卵呈球形、灰褐色或淡黄色、不透明,卵径2.6~3.2 mm。受精卵在水温为16~18℃下历时159 h后开始出膜,整个发育过程可人为地划分为受精卵、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官发生和出膜7个阶段,34个发育时期。整个胚胎发育过程所需总积温为2322~2544℃*h。【结论】总体而言,达氏鲟胚胎发育阶段经历鲟形目鱼类普遍存在的辐射状卵裂方式,与其它鲟鱼胚胎发育早期阶段有较高的相似性。 相似文献
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本文首次报导了一种新的抗冻剂——N-N-二甲基甲酰胺(Dimethyl Formamide，DMF)对淡水鱼类精液超低温冷冻保存具有明显效果，冻精的受精效果优于二甲亚砜(DMSO)。团头鲂、鲤、草鱼、鲢、鳙使用139／ODMF抗冻剂，精液液氮保存3-4周，受精率分别为76%、54．03％、68．6％、37．9％和40．60%，而用13%DMSO作为抗冻剂时，则分别为69．1％、42．6％、67．6％、19．4％和37．4％。结果表明10-159／DMF作为抗冻剂，含0．5％NaCl的稀释液稀释精液，精液与稀释液按1：4比例混合冷冻；2％NaCl作为激活剂，以10倍体积激活剂稀释解冻精液进行授精为宜。 相似文献