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PCR法检测犬细小病毒的研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
聚合酶链反应是一种体外扩增特定DNA片断的技术,能快速、特异地在体外扩增特定的DNA片断,使之在短时间(数小时)内特异地扩增数百万倍.目前,在临床上聚合酶链反应方法已被广泛应用于DNA的检测.本文就聚合酶链反应检测细小病毒的研究作一综述. 相似文献
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聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)是Mullis等人(1985)发明的一项DNA扩增技术。它利用耐热的DNA聚合酶快速特异地扩增任何所希望的目的基因或DNA片段。PCR技术不仅可以用于基因分离、克隆和核酸序列分析,还可用于遗传病及传染病的早期诊断等诸多方面。目前,PCR技术在传染病的诊断 相似文献
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聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）,又称体外扩增技术,最早于1985年由Kary Mullis研制,是一种根据生物体内DNA复制的特点而设计的在体外对特定DNA序列进行快速扩增的新技术,具有特异性和敏感性高、操作简便、快速高效等特点。它能特异地在体外扩增微量基因或DNA片段,将皮克（pg）水平的DNA特异地扩增10^6～10^7倍,达到检测诊断的目的;在对特异性基因进行扩增时可使核苷酸的错配率低于万分之一;其操作过程在2～4h即可完成,有效缩短了诊断的时间。PCR技术目前已广泛应用于从基因扩增、基因检测到基因克隆、基因改造、 相似文献
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环介导等温扩增技术（LAMP）是由Notomi等于2000年开发的新颖的恒温核酸扩增方法,在等温条件下可高效、快速、高特异、高灵敏地扩增靶序列。1技术特点环介导等温扩增技术特点是针对靶序列的6个特异性区域设计两对引物,利用具有链置换活性的DNA聚合酶在恒温条件下30～60分钟,不需要PCR仪即可实现核酸的大量扩增,并且伴有肉眼可见的副产物白色焦磷酸酶沉淀产生。LAMP的扩增效率是目前最高的一种, 相似文献
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聚合酶链反应(PCR)是1985年Saiki和Mullis等人首先建立的一种体外扩增DNA的方法。应用该方法可使极微量的特定核苷酸片段在3—5小时内扩增到上百万倍。由于这一技术具有快速、简便、敏感度高及特异性强的优点,因此在其首次报道后 相似文献
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《中国兽医学报》2016,(10):1797-1802
建立动物疫病的快速诊断,对于我国养殖业疫病的预防及控制、进出口检疫、动物食品安全卫生等方面具有重大意义。重组酶聚合酶扩增技术(RPA)是近几年出现的1种有望替代PCR的新的核酸扩增技术。该技术主要依赖于3种酶:能结合单链寡核苷酸引物的重组酶、单链DNA结合蛋白和DNA聚合酶。反应过程中不需要模板链的热变性,可以在恒定的低温条件下快速扩增DNA或者RNA。具有特异性强、灵敏度高、快速、操作简便、适用于现场快速诊断等特点,在动物疾病早期诊断、实地检测、进出口快速检疫等方面具有巨大的应用前景和市场。本文对RPA技术进行综述,以期为相关研究提供参考。 相似文献
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PCR(polymerase Chain reaction聚合酶链反应),又称DNA或基因体外扩增技术。它是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学新技术。1985年,Saiki首次报道用PCR检测镰刀贫血病;1986年Erlish分离并纯化了适用于PCR的热稳定性Tag DNA聚合酶,并于1988年获专利;1988年,Saiki开始使用耐热 相似文献
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聚合酶链反应(Polymerase chain Rea-ction,PCR),又称体外基因放大技术,是美国 Cetus 公司人类遗传学研究室 Mullis 等设计并研制成功的,它是一种模拟生物体内天然基因复制过程,在体外通过 DNA 聚合酶对极微量单拷贝的特定核酸片段在2—4小时的短时间内扩增至上百万倍而用于实际检测。PCR 技术具有快速、简便、 相似文献
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定量测定羊关联性恶性卡他热病毒DNA的竞争性PCR方法的建立 总被引：1，自引：0，他引：1
此项研究中建立了用于定量测定羊关联性恶性卡他热 (Sheep- associated malignant catarrhal fever,SA- MCF)病毒 DNA的竞争性聚合酶链反应 (Comppetitive polymerase chain reaction,c PCR)方法。该分析中采用同一引物 ,分别将一固定但未知含量的待测目的 DNA(target DNA)与一系列已知含有不同拷贝数量的竞争性 DNA(com petitive DNA)同时扩增。经4 0次扩增后 ,在 30～ 30 0 0 0 0 DNA拷贝范围内 ,目的 DNA与竞争性 DNA之间其扩增产物具有明显的线性竞争关系 (r=0 .98) 相似文献
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应用South—Western blot mapping方法观察了初步提纯的锥虫转录变异抗原基因的聚合酶与其基因组DNA片段的结合情况.在选定的试验条件下,初步纯化的RNA聚合酶既能与变异抗原基因结合,也能与一些待鉴定的非特异性核酸片段结合.本文对存在的问题进行了讨论. 相似文献
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为建立一种简单、快速的非洲猪瘟病毒(ASFV)分子检测方法,基于ASFV P72基因保守序列,设计并合成引物,建立了一种ASFV重组酶聚合酶扩增(RPA)等温检测方法。结果表明,所建立的RPA方法在38℃水浴锅中恒温反应30 min,即可实现对目的片段的有效扩增;以包含ASFV P72基因的ORF质粒为模板,RPA的检测限达到10~2 copies,同世界动物卫生组织(OIE)推荐的实时荧光PCR方法检测限一致,但比OIE推荐方法的检测限高10倍;RPA仅特异性扩增ASFV P72基因,对FMDV、CSFV、PRRSV、PRV和PCV-2基因组c DNA或DNA没有扩增。本研究所建立的RPA方法操作简单、反应快速、检测成本低、结果确实可靠,为非洲猪瘟的一线防控提供了一种新的、可靠的技术支持。 相似文献
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分子检测技术是进行病原检测、鉴定和疾病诊断的重要手段。重组酶聚合酶扩增技术（recombinase polymerase amplification，RPA）是一种新型核酸扩增技术，主要在能结合单链核酸（寡核苷酸引物）的重组酶、单链DNA结合蛋白（SSB）和链置换DNA聚合酶3种酶的作用下等温扩增DNA或RNA，具有操作便捷、特异性强、灵敏度高和反应迅速等优点，可实现对疾病的现场诊断。作者简述了RPA技术的反应体系组成、反应原理、引物和探针的设计以及扩增产物的检测方法等，介绍了RPA技术在动物重要病毒性、细菌性及寄生虫病原检测中的应用，分析了该技术的局限性，并对其发展前景进行了展望。 相似文献