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为寻找引起养殖锦鲤(Ornamental carp)病害的致病因子,从北京地区自然患病的锦鲤体内分离疑似致病菌,再将此菌人工感染健康锦鲤,确定致病菌。采用生理生化鉴定与16S rRNA基因序列的系统发育学分析相结合的方法确定该致病菌株的系统发育地位,同时采用琼脂扩散法测定该菌对抗菌类药物的敏感性。试验结果表明,从病鱼体内分离得到革兰氏阴性杆菌CL0901,人工感染健康锦鲤后,能够引起鱼生病甚至死亡,症状与自然发病症状一致。菌株CL0901与Aeromonas veronii ATCC 35624T的16S rRNA基因序列相似性达99.9%,构建系统发育树,并结合形态特征与生理生化测定结果,将该致病菌鉴定为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。在21种抗菌类药物对该菌的抑菌试验中,左氧氟沙星、诺氟沙星和洛美沙星等10种药物的抑菌效果较好。本研究为进一步防制锦鲤养殖病害提供依据。 相似文献
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从鲫鱼肠道中分离出1株细菌,暂时编号为SR-1,进行细菌形态学观察、理化特征、16S rDNA序列分析及药敏试验等研究,结果表明SR-1菌株为山梨醇发酵阳性的温和气单胞菌;PCR扩增SR-1菌株的16S rDNA序列为1509 bp;BLAST比对分析结果表明SR-1菌株与温和气单胞菌(Aeromonas sobria)亲缘关系最近,序列同源性为99.87%～100%;药敏试验结果显示SR-1菌株对阿奇霉素、氯霉素、四环素、诺氟沙星、头孢噻肟、头孢克肟等药物敏感。 相似文献
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Jens Laurits Larsen 《Acta veterinaria Scandinavica》1983,24(4):456
An examination of 41 fish pathogenic and 51 environmental strains of Vibrio anguillarum from Danish coastal areas, and of 8 reference strains of Vibrio anguillarum, biotype 1, showed that these strains shared rather broad-spectered activities towards many carbohydrates, amino acids, proteins and lipids.They also exhibited rather uniform growth characteristics, including parameters as salinity (NaCl), temperature, antibiotic resistance, and growth on specific media.A computer analysis of these strains and 3 strains of Vibrio anguillarum, biotype 2 (Vibrio ordalii), showed that the Danish strains all belonged to Vibrio anguillarum, biotype 1, and that no basis existed for setting up new biotypes.Mean values of the G+C content in DNA of strains of the various categories of Vibrio anguillarum, biotype 1, ranged from 45.5 to 46, while the mean value for the Vibrio ordalii strains was 48.9.The biochemically active Vibrio anguillarum seems more suitable for environmental studies than the more fastidious Vibrio ordalii.Key words: Vibrio anguillarum, Vibrio ordalii, biochemical activities, environmental, fish pathogenic, reference strains 相似文献
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为了探讨松鼠葡萄球菌(Staphylococcus sciuri)的病原学特性,本试验从耗儿鱼(Corydoras)分离出菌株YDE0916,并对其进行生理生化鉴定、16S rDNA基因PCR扩增、序列分析及耐药性分析。结果显示,该菌株为革兰氏阳性球菌,呈串形,无芽孢,无荚膜。该菌不运动,β-半乳糖苷酶、VP反应为阴性,蔗糖、麦芽糖为阳性。扩增的16S rDNA基因序列长度为1 476 bp (GenBank登录号:KP031644),与GenBank中的松鼠葡萄球菌16S rDNA基因序列的相似性达99%。系统进化树显示,菌株YDE0916和松鼠葡萄球菌聚为一簇,由此判定菌株YDE0916为松鼠葡萄球菌。药敏试验结果显示,该菌株对诺氟沙星、杆菌肽耐药,对美满霉素、庆大霉素、氨苄西林等22种药物高度敏感。本研究为松鼠葡萄球菌的分离鉴定及预防积累参考依据。 相似文献
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To explore etiology characteristics of Staphylococcus sciuri, strain YDE0916 was isolated and identified from Corydoras by cultivation, biochemical identification, 16S rDNA gene PCR amplification and sequence analysis, and resistance analysis.The result showed this strain was gram-positive, serial, spore, without capsule.The physicochemical properties showed immobility, β-galactosidase-negative, VP reaction-negative, sugar and maltose-positive.The nucleotide sequence of 16S rDNA was 1 476 bp and its GenBank accession number was KP031644.This 16S rDNA showed 99% homology with Staphylococcus sciuri.Phylogenetic tree showed that strain YDE0916 and several Staphylococcus sciuri strains gathered into one cluster.So the strain was identified as Staphylococcus sciuri.The antibiotic sensitive test showed that strain YDE0916 was resistant to norfloxacin and bacitracin, and was highly sensitive to 22 kinds of drugs, such as minocycline, gentamicin and ampicillin.This study could provide a reference for identification and prevention of Staphylococcus sciuri. 相似文献
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In order to select probiotic strains with probiotic potential isolated from Tibetan sheep,fresh excreta of the healthy female Tibetan sheep was processed with 90 ℃ water-curing treatment for 5 min,and Bacillus with resistance were screened.The morphological,physiological and biochemical characteristics and 16S rDNA sequence of the Bacillus were comprehensively analyzed and identified.Biochemical characteristics were studied by using antimicrobial test,acid resisting tests and bile salt resisting tests,hydrolytic enzyme test and other methods.The results showed that the Bacillus SWUN-G43 isolated from fresh excreta of Tibetan sheep had a significant antibacterial effect on E.coli and Salmonella.Through analysis and identification,the Bacillus SWUN-G43 was Bacillus pumilus.Its survival rate was 50.43% under the environment of pH 2.0 and 44.35% under the environment of 0.3% bile salt.It could produce protease and cellulase and was sensitive to 12 kinds of commonly used antibiotics.By studying,the Bacillus pumilus(SWUN-G43) had a certain degree of resistance and potential probiotic ability.Besides,the strain didn't contain R-plasmid and would not cause horizontal transmission of antibiotic resistance in the intestinal microecosystem.It also had the potential to be developed as a micro ecological additive. 相似文献
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为获得来源于藏绵羊的益生菌菌株,对健康母藏绵羊新鲜粪便进行90 ℃水浴处理5 min以筛选具有抗逆性的芽孢杆菌,再综合形态学、生理生化特征及16S rDNA序列分析进行鉴定,通过抑菌试验、耐酸、耐胆盐试验及产水解酶试验等方法对其生物学特性进行研究。结果显示,从新鲜粪便样品中分离到的芽孢杆菌菌株SWUN-G43对大肠杆菌和沙门氏菌有明显的抑菌效果,通过分析鉴定其为短小芽孢杆菌,该菌株在pH 2.0的环境中存活率为50.43%,在0.3%胆盐环境中存活率为44.35%,可产生蛋白酶和纤维素酶,对12种常用的抗生素具有很高的敏感性。从试验结果可分析出该短小芽孢杆菌(SWUN-G43)有一定的抗逆性和潜在的益生能力,且该菌株不含耐药质粒,不会在动物肠道微生态系统中造成抗生素抗性的水平传递,具有作为微生态添加剂开发的潜力。 相似文献
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副猪嗜血杆菌的分离鉴定及16S rRNA序列分析 总被引：1，自引：1，他引：0
从云南某规模化养猪场病猪肺脏分离到1株革兰氏阴性小杆菌,经细菌生化鉴定、PCR鉴定和16S rRNA序列比对鉴定为副猪嗜血杆菌。抗生素药物敏感试验结果表明,分离菌株对四环素、红霉素、氯霉素、头孢噻吩高敏;对庆大霉素、氧氟沙星、诺氟沙星中敏;对磺胺甲唑耐药。16S rRNA分析结果表明,该分离株与GenBank中的Hps参考株AB078973(基因登录号)同源性为100%,将分离菌株鉴定为副猪嗜血杆菌。16S rRNA遗传进化关系表明,分离株与副猪嗜血杆菌3株血清5型参考株AB078972、AB078973、AB078974的16S rRNA序列位于一个分支上,遗传进化关系最近,它们之间的核苷酸同源性在99.0%~99.4%之间,初步鉴定为血清5型副猪嗜血杆菌,致病性试验结果表明,分离菌株对小白鼠有强致病性,命名为YN-1株。 相似文献
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为探究缅甸蟒肺炎病因,本研究对海南文昌缅甸蟒养殖场的4条发病缅甸蟒进行了肺和心血组织的病原菌分离纯化、菌落及染色形态观察、生化、和16S rRNA分子鉴定,最后对各分离菌株进行了体外药敏实验。结果显示,全部分离株菌落及细胞形态特征一致,均为革兰氏阴性杆菌;糖醇发酵等生理生化特性与肠道沙门氏菌一致;根据16S rRNA基因的同源性比对,发现分离菌株与肠道沙门氏菌Salmonella enterica subsp.houtenae DSM 9221菌株同源性达到99%,可确定分离株全部为肠道沙门氏菌。通过23种抗菌药物的药物敏感性显示,所分离菌株对氟罗沙星等12种抗生素完全敏感。本研究结果表明海南文昌缅甸蟒肺炎病因为沙门氏菌感染,体外药敏实验可为该病的抗生素治疗提供使用参考。 相似文献
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研究旨在筛选1株能够高效净化污水的光合细菌。通过对不同来源光合细菌的筛选分离以及比较菌株对水体有机质、氨态氮、可溶性磷的去除作用,综合比较得到1株最优菌株P1,该菌对水体有机质有很强的吸收能力,去除率可以达到66.87%,对水体氨态氮和磷有一定的吸收作用,去除率分别为3.33%和8.03%。经过16S rDNA测序以及生理生化实验鉴定,该菌为粪红假单胞菌(Rhodopseu-domonas faecalis)。药敏试验显示P1菌对常用抗生素均有一定的敏感性,其中对庆大霉素最敏感,其次是氨苄青霉素和链霉素,对卡那霉素最不敏感,显示在应用过程中要注意抗生素对该菌存活能力的影响。 相似文献
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【目的】探究昆明轿子雪山自然保护区死亡麂子体内潜在微生物的生物学特性,以揭示其与该麂子死亡是否存在相关性,同时为昆明轿子雪山自然保护区的微生物多样性提供数据支持。【方法】无菌采集死亡麂子的肩部肌肉组织,对其进行细菌分离培养,采用革兰氏染色镜检、生化试验及16S rRNA基因扩增鉴定后进行序列比对并构建系统发育树,确定分离菌株种类并对分离菌株进行药敏试验和动物回归试验。【结果】分离菌株在胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)和血琼脂培养基上菌落形态为圆形、边缘整齐、表面光滑,呈乳白色;在麦康凯培养基(MAC)上不生长,革兰氏染色镜检见紫色杆菌。生化试验结果显示,分离菌株不能发酵蔗糖、棉子糖、山梨醇等;苯丙氨酸、鸟氨酸、赖氨酸、V-P试验、葡萄糖产气阳性。16S rRNA基因序列和系统发育树分析发现,该菌株与GenBank数据库中登录的麦芽香肉杆菌菌株MMF-23(GQ304931.1)相似性达100%。结合形态学、生化特征等,鉴定分离菌株为麦芽香肉杆菌,命名为BJT86,并将16S rRNA序列提交GenBank,获得登录号为ON966116.1。药敏试验结果显示,分离菌株对青霉素、阿莫西林、哌... 相似文献
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南美白对虾白便综合征病原霍乱弧菌的分离与药敏试验 总被引：1，自引：0，他引：1
为确定南美白对虾白便综合征的病原菌及其药物敏感性,采用传统方法从患白便综合征的南美白对虾肝胰腺中分离到病原菌菌株BB31,结合API 20E革兰阴性菌鉴定系统、16SrDNA序列及聚类分析对菌株BB31进行了鉴定,并通过纸片琼脂扩散法对菌株BB31的药物敏感性进行了测定。结果表明,菌株BB31为霍乱弧菌(GenBank登录号:KF446244),其16SrDNA序列与GenBank数据库中弧菌菌株的16S rDNA序列有99%~100%的同源性,而且与霍乱弧菌菌株RD1(GenBank登录号:KF307775)的亲缘性最近。菌株BB31对四环素、庆大霉素、恩诺沙星、氧氟沙星、诺氟沙星等抗生素的敏感性高,对磺胺甲氧嘧啶、呋喃唑酮、复方新诺明等抗生素不敏感。本研究证实霍乱弧菌是南美白对虾白便综合征的病原菌,庆大霉素、诺氟沙星等常规渔药可作为防控霍乱弧菌引起的南美白对虾白便综合征的用药参考。 相似文献
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为探究鱼源蜡样芽孢杆菌的致病性和耐药性及指导科学用药,本试验采用形态学观察、生理生化特性分析、16S rDNA基因扩增及系统进化树构建等方法鉴定分离菌,人工感染试验确定分离菌的致病性,耐药基因检测和药敏试验确定菌株耐药性。结果显示,分离菌株形成边缘不规则、不光滑的乳白色菌落,为需氧型革兰氏阳性菌。葡萄糖、硝酸盐、明胶液化等生化反应为阳性,木糖、阿拉伯糖、甘露醇等生化反应为阴性。16S rDNA基因片段长度为1 457 bp,在系统发育树中,分离菌与蜡样芽孢杆菌RTR菌株亲缘关系最近,与蜡样芽孢杆菌的同源性均达到99%以上,从而综合判定分离菌株为蜡样芽孢杆菌。人工感染试验发现,分离菌株对黄颡鱼有一定的致病性。耐药基因检测结果显示,分离菌株中检测出Sul1和Sul2两种耐药基因。药敏试验发现,该菌株对庆大霉素、哌拉西林、米诺环素等敏感,对头孢哌酮中度敏感,对青霉素、头孢曲松、氨苄西林等耐药。本试验结果为有效防控蜡样芽孢杆菌感染的疾病提供了科学参考资料。 相似文献
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To further identify the pathogenic strains and analyze their antibiotic resistance, the methods of pathogen isolating, the methods of Gram staining, biochemical tests and 16S rRNA PCR amplification, virulence tests, drug sensitive tests, virulence genes and resistance genes PCR amplification were used. The results showed that the strain was Gram-positive and revealed positive after reacting with 6.5% NaCl, melibiose, sucrose and etc., while revealed negative reactions with VP, hippurate, arabinose and etc.. It showed 100% similarity with Enterococcus feacium 16S rRNA gene sequence in GenBank after PCR amplification of 16S rRNA gene and BLAST alignment. It was found severe pathogenicity after virulence tests in mice. The strain was highly resistant to oxacillin, penicillin G of β-lactam antibiotics and norfloxacin, ciprofloxacin, levofloxacin of quinolones antibiotics and tetracycline, while was sensitive to antibiotics of erythromycin, vancomycin and clindamycin. It revealed that virulence factor genes Asal, cylA, acm and resistance genes TetM, ant(6)-Ⅰ, aac(6')-aph (2"), ermB showed positive. The results showed that the bacteria was Enterococcus feacium, it had a strong pathogenicity and severe drug resistance, which might be related to the highly positive rates of virulence genes and drug resistance genes. 相似文献
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试验从甘肃肃南县某羊场死亡羊中分离出疑似某球菌菌株XCP,为进一步确定该致病菌株及其耐药性情况,进行了病原菌分离、革兰氏染色、生化试验、16S rRNA PCR扩增鉴定、小鼠致病力试验、药敏试验、毒力基因和耐药基因扩增试验研究。结果发现,该菌革兰氏染色阳性,高盐、蜜二糖、蔗糖等生化反应阳性,VP、马尿酸盐、阿拉伯糖等生化反应阴性;16S rRNA基因PCR扩增后,进行BLAST比对,结果与GenBank中的屎肠球菌16S rRNA基因序列同源性为100%;小鼠致病力试验发现,该菌株具有很强的致病性;该菌株对β-内酰胺类抗生素苯唑西林、青霉素G,喹诺酮类抗生素诺氟沙星、环丙沙星、左氟沙星,以及四环素等高度耐药,对红霉素、万古霉素、克林霉素等抗生素敏感;毒力基因Asal、cylA、acm和耐药基因TetM、ant（6）-Ⅰ、aac（6'）-aph（2"）、ermB扩增均为阳性。结果表明,该菌为屎肠球菌（Enterococcus faecium）,具有较强的致病性和耐药性,可能与毒力基因和耐药基因的高阳性率有关。 相似文献
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鸡卡氏杆菌的分离与16S rRNA基因的分析鉴定 总被引：1，自引：1，他引：0
四川雅安某种鸡场种鸡出现消瘦,腹部膨大,肝脏肿大破裂出血,腹膜和输卵管炎为主要特征的疾病。为诊断和预防此病的发生,通过对细菌分离纯化、形态学观察、生化试验、药物敏感性试验鉴定出1株致病菌,应用通用引物对细菌的16S rRNA基因进行克隆和测序,测序结果于NCBI上进行BLAST比对,选择同源性较高的巴氏杆菌科15个属的29株细菌16S rRNA序列进行比对分析,构建遗传进化树。结果表明,分离纯化的细菌能在血平板上生长,革兰氏染色阴性短杆状,能发酵大多数糖和醇类,对头孢类抗生素敏感,16S rRNA序列与卡氏杆菌属细菌的同源性最高,在92.2%～99.5%之间,特别是与鸭卡氏杆菌同源在97.5%～99.5%之间。遗传进化树分析结果表明,该菌株与卡氏杆菌属细菌属于同一大分类群,与鸭卡氏杆菌位于同一个小分支,最终诊断该鸡场为卡氏杆菌感染。 相似文献
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【目的】 查明江苏某鹅场鹅发病及死亡原因。【方法】 剖检病死鹅，运用细菌分离纯化、染色观察、生化试验、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）鉴定、16S rDNA测定方法进行病原菌分离鉴定，通过药敏试验和小鼠致病性试验探究分离菌株的特性。【结果】 从患病鹅肝脏分离到1株革兰氏阴性短杆状细菌；生化试验结果显示，此菌株可发酵葡萄糖、麦芽糖、枸橼酸盐、尿素；MALDI-TOF MS鉴定结果显示，此菌株为类志贺邻单胞菌；16S rDNA序列对比分析发现，分离菌与类志贺邻单胞菌相似性最高，达98%以上；药敏试验结果显示，分离菌对左氧氟沙星、美罗培南、头孢西丁、庆大霉素等10种抗菌药敏感，对四环素、头孢吡肟、头孢他啶、头孢唑林表现为中介，对阿奇霉素、复方新诺明、氨苄西林等6种药物表现为耐药，是典型的多重耐药菌；小鼠致病性试验结果显示，分离菌对小鼠的半数致死量为5.0×106.5 CFU。【结论】 本试验首次报道了从鹅体内分离到致病性类志贺邻单胞菌，通过药敏试验筛选了左氧氟沙星、美罗培南、头孢西丁等有效的临床常用抗菌药，分离株对小鼠致病性较强，提示其带来的潜在风险不可忽视。 相似文献
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为确诊广西中医药大学瑶山亚种树鼩人工驯化养殖中心的瑶山亚种树鼩发病死亡原因,并调查分离菌株的致病性与耐药情况,试验通过平板划线分离获得病原菌,进一步对分离菌进行形态观察、培养特性、生化试验及16S rRNA序列分析,纯化获得一株致病性嗜水性气单胞菌;利用昆明小鼠的致病性试验测定了该分离菌株的半数致死量（LD50）,利用药敏纸片法分析该分离株对常用药物的敏感性,并应用PCR方法进行菌株耐药基因的检测。结果显示,从病死瑶山亚种树鼩分离到一株嗜水性气单胞菌,镜检显示为革兰氏阴性菌,形态呈短杆状。该菌16S rRNA序列与日本淡水湖源嗜水性气单胞菌SWCY-3.27株同源性高达100%,遗传进化关系最近。该分离菌对成年昆明小鼠的LD50为1×107 CFU,毒力高于模式菌株ATCC 7966,近似于中国流行株NJ-35和J-1等,致病性试验鉴定该菌为强毒力菌株。生化鉴定七叶苷、阿拉伯糖、氧化酶呈阳性,各种生化鉴定符合嗜水气单胞菌生化特性。药敏检测显示,该菌株对米诺环素、链霉素、妥布霉素等9种药物敏感,对四环素、红霉素、青霉素等10种药物耐药。以PCR扩增基因方法对分离菌进行6类12种耐药基因的检测,发现分离菌存在氨基糖苷类（Aph-（3）-lia）和β-内酰胺类（mecA）两类抗生素的耐药基因,与药敏试验结果基本吻合。本研究结果表明,引起此次树鼩死亡的病原菌为嗜水性气单胞菌,可用高敏药物进行针对性治疗,为防治嗜水性气单胞菌感染导致的树鼩疾病提供参考依据。 相似文献