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应用PAPD方法对鸡败血霉形体DNA多态性的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）方法,通过筛选的５个随机引物（ＯＰＨ－０２,ＯＰＨ－０５,ＯＰＨ－０７,ＯＰＨ－１３,ＯＰＧ－１６）,对１４株鸡败血霉形体（ＭＧ）国际标准株和国内分离株进行了ＤＮＡ多态性研究。结果表明,５个引物共产生２１种条带,其中有３个条带分别为２个菌株所特有,扩增产物片段的长度在１５０～４５００ｂｐ之间,所有菌株均有１条共同条带,以ＯＰＨ－０５扩增产物的多态性最丰富。根据样品ＤＮＡ所获得的菌株间相似性指数表明,Ｄ９６０３与Ｄ９６０７相似指数最高,Ｓ６,Ｋ３９１３和Ｄ９６０４三者相互间相似性指数最低。提示ＲＡＰＤ方法可用于霉形体遗传标记的分析。 相似文献
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一种检测牛血清中副结核分枝杆菌（Ｍ．Ｐ）抗体的商品化快速吸附ＥＬＩＳＡ经改良后用于检测山羊血清中Ｍ．Ｐ抗体，使用来自副结核病群中的１６３只山羊，评价诊断的敏感性。采集血和粪样，而且应用商品试验盒，通过测定分枝杆菌插入序列ＩＳ９００ＤＮＡ来估计粪便中Ｍ．Ｐ的排出情况。诊断的特异性是通过１０群临床上认为无副结核病的１２３只山羊的血样来评估的。感染羊群中的１６３只山羊中有３５只（２１％）检出了ＩＳ９００ＤＮＡ。在３５只ＩＳ９００ＤＮＡ阳性山羊中有１９只检出了Ｍ．Ｐ血清抗体，敏感性为５４％，感染群中１２８只ＩＳ９００ＤＮＡ阴性山羊１８只检出血情抗体。临床上认为无副结核病羊群中的１２３只山羊的Ｍ．Ｐ血清抗体检测结果为阴性。 相似文献
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龙陵黄山羊遗传多样性同功酶电泳研究 总被引：1，自引：0，他引：1
采用常规水平式淀粉胶蛋白电泳技术，对３８只龙陵黄山羊个体的３９个遗传座位的血液同功酶的多态性进行了研究。结果发现，ＡＫＰ、ＣＥＳ－Ｉ、ＥＳＤ、ＧＯＩ、ＬＡＰ、ＭＤＨ、ＭＥ和ＮＰ等８个座位具多态性，多态座位ＡＫＰＯ、ＣＥＳ－ＩＩ、ＦＳＤＡ、ＧＯＩＢ、ＬＡＰＡ、ＭＤＨＡ、ＭＥＡ和ＮＰＡ的基因频率较高；多态座位百分比Ｐ＝０２０５１，平均杂合度Ｈ＝００９０６±００２６５。结果表明，云南龙陵黄山羊与已检测的其它山羊比较，遗传多样性水平较高 相似文献
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随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡＳ,ＲＡＰＤ）是利用含有１０个（或９个）碱基的随机引物（单引物）通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对模板ＤＮＡ进行随机扩增,根据扩增的某一ＤＮＡ片段的有无来比较不同基因组ＤＮ... 相似文献
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HRP直接标记属特异性基因探针检测沙门氏菌的研究 总被引：2，自引：2，他引：0
以活化辣根过氧化物酶复合物（ＨＲＰ—ＰＢＱ—ＰＥＩ＋—ＮＨ３＋）直接标记沙门氏菌属特异性ＤＮＡ探针ｐＬＳ２和ｐＬＳ３，探针与靶ＤＮＡ杂交后催化发光底物，经增强型化学发光反应（ＥＣＬ），用普通Ｘ光胶片自显影（ＣＰＤ）检测沙门氏菌。经狭缝杂交（Ｓｌｏｔｂｌｏｔ），该法标记探针均可检测到０．１ｐｇ的纯质粒ＤＮＡ及１０３个未经培养的鼠伤寒沙门氏菌。Ｄｏｔ—ｂｌｏｔ杂交结果证明，ＨＲＰ标记的探针仅与沙门氏菌属细菌杂交，而与试验的其他肠道非沙门氏菌不杂交。本研究表明，ＨＲＰ直接标记基因探针化学发光自显影法检测沙门氏菌，安全、快速、简便，且有高度的敏感性和特异性，是一种有较大应用前景的非放射性标记探针杂交检测方法。 相似文献
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RAPD技术在动物遗传育种中的应用 总被引：7，自引：0，他引：7
ＲＡＰＤ技术在动物遗传育种中的应用龙火生方心葵（西北农业大学动物科学系陕西杨凌７１２１００１关于ＲＡＰＤ技术１９９０年,Ｗｉｌｉａｍｓ和Ｗｅｌｓｈ的两个研究小组几乎同时在各自的实验室建立了检测ＤＮＡ多态性的随机扩增多态ＤＮＡ（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆ... 相似文献
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单核增生李斯特菌的随机扩增多态DNA分型研究 总被引：1，自引：0，他引：1
通过优化反应条件和筛选随机引物，建立了单核增生李斯特菌的随机扩增的多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析方法。在１０条长为１０ｂｐ的随机组合引物介导下，经过低温（３５℃）扩增收集到的８株不同血清型的单核增生李斯特菌可产生稳定、复杂的ＰＣＲ指纹图。图谱经过ＰＨＹＬＩＰＳ软件分析，绘制出菌株的遗传聚类树图。８株单核增生李斯特菌可分成３个聚类群，其中两株血清型相同但遗传距离较远。试验结果表明，ＲＡＰＤ可作为微生物的 相似文献
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从２型犬腺病毒的ＭＤＣＫ细胞培养物中提取线状双链病毒基因组ＤＮＡ，利用限制性内切酶ＰｓｔＩ、ＢｇｌⅠ和ＨｉｎｄⅢ分别进行酶切，在１％琼脂糖凝胶上电泳，随后Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹到尼龙膜上，利用Ｄｉｇｏｘｉｎ标记的２型犬腺病毒Ｅ３区ＰＣＲ产物与膜上ＤＮＡ杂交，结果发现，Ｅ３区探针分别与病毒ＤＮＡ的ＰｓｔＩＢ片段、ＢｇｌＩＡｌ片段和ＨｉｎｄⅢＡ２、Ｂ２片段呈现阳性杂交反应，该结果为Ｅ３区的克隆及犬腺病毒 相似文献
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产蛋下降综合征（EDS－76）病毒DNA探针的制备及应用研究 总被引：2，自引：0，他引：2
用纯化的产蛋下降综合征（ＥＤＳ－７６）病毒（Ｈ９１毒株）悬液提取的核酸，经琼脂糖凝胶电泳只出现１条分子量较大、背景清晰的核酸带。用ＢａｍＨＩ酶消化产生４个片段，大小分别为１７ｋｂ、１０ｋｂ、４．０ｋｂ和２．０ｋｂ。将其中的２．０ｋｂ片段克隆进ｐＵＣ１８ＤＮＡ载体中，重组质粒ＤＮＡ用ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记作为ＤＮＡ探针，在ｄｏｔｂｌｏｔ中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物、马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＤＮＡ、鸡传染性贫血病毒（ＣＡＶ）ＤＮＡ、ＳＰＦ鸡基因组ＤＮＡ等核酸反应，只与３株ＥＤＳ病毒（ＥＤＳ标准毒株ＡＶ－１２７、ＥＤＳＨ９１毒株和从健康鹅体中分离的ＥＤＳＹ８１毒株）ＤＮＡ呈阳性反应。人工感染产蛋母鸡和雏鸡后２４ｈ即可用该探针从泄殖腔棉拭子样品中检测出ＥＤＳ病毒ＤＮＡ，在感染后３５ｈ仍能从部分感染鸡样品中检出。对部分探针检测阳性鸡的泄殖腔棉拭子样品用ＳＰＦ鸡胚分离病毒，并用ＨＡ和ＨＩ试验检测分离病毒的特异性；在感染过程中，同时检测了血清中ＨＩ抗体的消长情况。结果表明，人工感染鸡排毒至少可以维持２个月左右，而且血清中ＨＩ抗体即使很高，也不能阻止感染鸡的排毒。 相似文献
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选用4种扩增多态性良好的RAPD引物,对45只南江黄羊基因组DNA进行PCR扩增,对多态标记结果应用SPSS统计之星软件进行统计分析。结果表明:南江黄羊基因组多态频率为84%。RAPD多态标记条带与体重紧密连锁的标记有CY0816引物扩增的ABCF片段和F09引物扩增的ABDF片段,这两种标记组合对体重的贡献率分别为32.6%和28.9%;与体长(A1)、胸围(A3)和胸深(A5)紧密连锁的标记有CY0816引物扩增的ABF片段和F09引物扩增的ABEF片段,其贡献率均在24.2%～28.9%之间。 相似文献
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波尔山羊体质量生长随机扩增多态DNA标记及遗传连锁图谱构建 总被引：2，自引：0，他引：2
利用随机扩增多态 DNA(random am plified polym orphic DNA,RAPD)技术研究了 RAPD标记与波尔山羊体质量的相关性 ,并利用 Jointmap和 Genemap程序构建了 RAPD分子标记遗传连锁图谱。结果表明 ,RAPD标记OPP0 6 2、OPQ0 6 1、OPO113、OPO0 2 1、OPO0 71、OPQ0 6 2、OPQ0 6 5、OPP0 4 3和 OPP0 6 3与各年龄阶段体质量有显著 (P<0 .0 5 )或极显著 (P<0 .0 1)相关。构建了 11个 RAPD分子标记遗传连锁图谱和 1个表型标记连锁图谱 ,标记OPO0 71、OPO0 2 1、OPP0 6 2和 OPQ0 6 5分别座落于第 3、4、5、10连锁群中 相似文献
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本文旨在研究生长期奶水牛体重与体尺指标的相关关系,为通过体尺指标估测其体重提供科学依据。选取76头健康的11~14月龄生长期奶水牛,用地磅、测仗、卷尺分别进行体重与体尺指标测量。采用Excel中LINEST函数对数据进行多元回归和多项式回归分析,用SPSS 17.0对体重与体尺指标进行相关性分析及主成分分析。结果表明,各体尺指标均在不同程度上影响生长期奶水牛的体重,体重与体高、体斜长、十字部高、胸围、腹围、胸宽、胸深、尻长、尻宽和管围均存在极显著相关关系(P<0.01),其中胸围与体重的相关性最大(P=0.823),其次是腹围、体斜长、胸深、管围等;由体重与各体尺指标间多元回归方程的相关系数r可知,11~14月龄奶水牛体重与体尺间存在较强的线性回归关系,可通过不同的体尺指标预测其体重;从主成分的特征根与累计贡献率来看,由第一主成分关系式可见,体重、胸围、体斜长、腹围、管围等的特征向量较大,对第一主成分的贡献也较大,基本反映11~14月龄奶水牛的体型结构,可称为体型因子,第二主成分为尻宽因子,第三主成分为体高因子。 相似文献
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以1份美国进口马蹄金(Dichondra repens)品种为对照,用RAPD和SRAP两种分子标记方法研究20份野生马蹄金种质资源的遗传多样性。结果发现,20条RAPD引物扩增出多态性条带130条,多态性比率为68.78％;22对SRAP引物扩增出175条多态性条带,多态性比率为72.31％,表明20份野生马蹄金之间具有较丰富的遗传多样性。聚类结果表明,RAPD标记将供试材料聚为两大类群,SRAP标记也将材料划分为两大类。两种标记下,供试材料呈现出较好的地域性分布规律,地理来源相近的材料能大致聚为一类,部分同聚为一类的材料在形态上也具有相似性。两种标记方法相关系数r0.01=0.910,二者存在极显著正相关,表明应用这两种技术对马蹄金遗传多样性与亲缘关系的分析具有较高的一致性和可信度。 相似文献
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为研究安格斯牛各体尺指标及体重间的相关关系,掌握其生长发育规律,试验采集了新疆天山某安格斯牛场出生于2012-2016年的安格斯牛生长发育记录,共649条,其中主要包括体重及体尺指标,应用SPSS 16.0软件分析安格斯牛主要体尺指标及体重的相关性。结果发现：安格斯牛体尺指标及体重均随着月龄的增加逐步增大;14月龄之前各体尺指标增长速度较快,14月龄以后增长速度的缓;腹围和胸围增长速度高于其他指标。安格斯公牛的体长指数、体躯指数、胸围指数和管围指数平均分别为111.99%、129.79%、145.26%和16.71%;母牛体长指数、体躯指数、胸围指数和管围指数平均分别为112.15%、132.01%、147.86%和16.95%。安格斯牛体重与体高、体长、胸围、腹围和管围的相关性均达到极显著水平（P<0.01）;各体尺指标两两均呈极显著正相关（P<0.01）,其中,胸围与腹围的相关性最高,公、母牛相关系数分别为0.948、0.939;腹围与管围之间的相关性最低,相关系数分别为0.797和0.851。本试验结果可为明确安格斯牛选育方向,开展其遗传育种、品种资源开发利用提供基础数据。 相似文献
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本研究旨在利用微卫星标记分析阿拉善戈壁双峰驼的遗传多样性,寻找与其体尺性状相关联的微卫星标记,为阿拉善戈壁双峰驼的标记辅助选择提供参考。试验利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,检测17个微卫星标记在阿拉善戈壁双峰驼群体中的多态性,并与其体尺性状进行相关性分析。结果显示,17个微卫星标记共检测到60个等位基因,平均有效等位基因数为2.7302,平均杂合度为0.6205,平均多态信息含量为0.5308,可见阿拉善戈壁双峰驼群体的遗传多样比较丰富。微卫星标记多态性与阿拉善戈壁双峰驼体尺性状的关联分析发现,有8个微卫星标记（LCA82、LCA90、CMS15、CMS36、CMS104、CVRL01、YWLL36和YWLL44）与不同体尺性状有一定的关联性,尤其是CMS36和YWLL44与所测体尺性状均有关联,其中CMS36不同基因型的体长和体重均有显著差异（P<0.05）,具体表现为BB > AA > AB,AA和BB基因型的体高、胸围、管围均显著高于AB基因型（P<0.05）;YWLL44的AC基因型体高、胸围和体重均显著高于BD基因型（P<0.05）,AC基因型的体长显著高于AB和BD基因型（P<0.05）,AB和AC基因型的管围显著高于BD基因型（P<0.05）。研究表明,8个微卫星标记对阿拉善戈壁双峰驼体长有一定影响,CMS36和YWLL44对其体高有影响,LCA82、LCA90、CMS36、CVRL01、YWLL36和YWLL44对其胸围有影响,LCA82、CMS15、CMS36、CMS104、CVRL01和YWLL44对其管围有影响,LCA82、LCA90、CMS15、CMS36、CVRL01和YWLL44对其体重有影响。 相似文献
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野生马蹄金种质资源的RAPD鉴别 总被引：1，自引：1，他引：0
采用RAPD分子标记技术,从100个随机引物中筛选出多态性强、重复性好且稳定性高的引物22个,对西南区16份抗性较强、坪用价值较高的马蹄金Dichondra repens材料进行扩增,共扩增出269条带,其中多态性带246条,多态性比率为91.45%,表明野生马蹄金植物种间有丰富的遗传多态性。采用UPGMA法聚类分析,在遗传距离0.73处把马蹄金材料分为4类,部分地理上相近的马蹄金种质资源被聚在了不同的大类中,分类结果能将优异马蹄金材料区分开来,与景观价值评定较吻合。 相似文献
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The purposes of this study were to assess the genetic variability between Taoyuan (T) and Duroc (D) pigs using randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) fingerprints and to evaluate the genetic relationship to a commercial synthetic line-Taiwan Black (TB) pig (75% D, 25% T). To assess the genetic variability between T and D, 71 random primers (Operon) were used for RAPD fingerprinting by polymerase chain reaction (PCR). The evaluation of the genetic relationship was based on band sharing frequency and band frequency. Thirty-five of the 71 primers (49%) could generate polymorphisms in RAPD fingerprints of T or D pigs. Twenty-two primers produced polymorphic bands from only T genomic DNA, and 14 primers could produce polymorphic bands from only D genomic DNA. These results indicated that there was some genetic difference between T and D pigs. The within-population genetic similarity (WGS) for T, D, and TB populations were 0.742, 0.747, and 0.745, respectively, the between-population genetic similarity (BGS) was 0.946 between T and TB; 0.953 between D and TB; and 0.934 between D and T. The parameters of genetic distance between T and TB; D and TB, T and D were 0.080, 0.064, and 0.096, respectively. When the values of genetic similarity and genetic distance between populations estimated as frequency of occurrence of bands showed lower genetic similarities between pig populations, but indicted similar relationship. TB was genetically more related to D than to T. It provided evidence of the usefulness of the RAPD technique to determine genetic relatedness among T, D, and TB. 相似文献