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PCR技术在畜禽细菌病诊断中的应用 总被引：3，自引：0，他引：3
ＰＣＲ技术在畜禽细菌病诊断中的应用罗满林张楚瑜（武汉大学病毒研究所，４３００７２）聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，是一种模拟体内ＤＮＡ复制过程，在体外扩增特异性ＤＮＡ片段的有效手段。该技术自１９８５年问世以来，在国际上引起极大的反响，并以惊人速度广泛应用... 相似文献
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生物检测技术PCR及其在兽医微生物检测中的应用 总被引：3，自引：0，他引：3
简述生物检测新技术ＰＣＲ的原理,特征,及其在兽医微生物检测中的应用。归纳和小结了其在临床传染病诊断中的应用领域,对从事畜禽疾病诊断,防治的工作人员进一步掌握和运用ＰＣＲ技术具有一定的指导意义。 相似文献
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鸡最常见的肿瘤病为马立克氏病 (ＭＤ)、禽白血病 (ＡＬ)和网状内皮增生症 (ＲＥ) ,它们可引起在临床上相似的组织器官肿瘤病变以及免疫抑制状态 ,而且常常混合感染 ,是目前严重危害我国养鸡业的一类重要疾病。建立一种能够快速鉴别诊断三种肿瘤病的方法 ,尤显必要。ＰＣＲ作为一种体外扩增技术 ,已广泛应用于禽病的诊断。发展多重ＰＣＲ诊断技术对于临床禽病的鉴别提供方便、可靠的诊断具有重要的实用价值。在广西九·五科技攻关项目、广西“十百千人才”工程基金项目和教育部科技重点研究项目的资助下 ,历经 3年先后分别对ＰＣＲ技术应用… 相似文献
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阐述了ＰＣＲ技术在原理及近年来推出的ＰＣＲ新方法，着重讨论了ＰＣＲ技术在检测感染病毒，疾病的鉴别诊断，区别野毒与重组疫苗毒，鉴别不同的病毒株，制备标记探针等方面的应用。 相似文献
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应用副结构分枝杆菌ＩＳ９００序列特异引物，对Ｊｏｈｎｅ氏病（副结核病）牛的福尔马要固定、石蜡包埋回肠组织进行ＰＣＲ扩增并与Ｚｉｅｈｌ－Ｎｅｅｌｓｅｎ氏染色法（抗酸染色法）和免疫组化法进行比较。ＰＣＲ检出率为１９／２１（９０％），抗酸染色为１８／２１（８６％），免疫组化为２１／２１（１００％）。抗酸染色法和免疫组化法检测副结核分枝力的特异生不高。扩增ＩＳ９００序列的ＰＣＲ方法诊断Ｊｏｈｎｅ氏病非常特 相似文献
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ＰＣＲ技术及其在奶牛病毒性疾病检测中的应用西北大学生物系（西安７１００６９）晋坤贞西安市奶业科学研究所（７１００６８）房兴利１前言ＰＣＲ是聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃ－ｔｉｏｎ）的简称，是１９８５年Ｃｅｔｕｓ公司发展起来的一种... 相似文献
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应用中药防治禽病是近十多年来随着我国家禽业的发展而逐步推广开来的,作者在多年的临床工作中比较重视应用中药来防治禽病,颇有体会,现简述之。一应用中药制剂防治禽病的概况众所周知,应用中药防治畜禽疾病副作用小,畜禽 相似文献
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聚合酶链反应（PCR）技术体系研究进展 总被引：8，自引：1，他引：7
聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在生物学及其相关学科的广泛运用,不断深入研究和发展,现已形成一种新的技术体系。本文将近年研究和发展的一些特殊的ＰＣＲ技术,即：免疫－ＰＣＲ,套式引物ＰＣＲ,反转录ＰＣＲ,反向ＰＣＲ,复合ＰＣＲ,标记ＰＣＲ,不对称ＰＣＲ,玻片ＰＣＲ,定量ＰＣＲ,锚定ＰＣＲ,加端ＰＣＲ,理组ＰＣＲ,长ＰＣＲ,热起动ＰＣＲ,兼并引物ＰＣＲ等予以综述。 相似文献
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应用ＰＣＲ和ＲＴ－ＰＣＲ技术,对兔出血症病毒核酸作了鉴定,分别设计合成２对ＰＣＲ扩增特异性引物,即按兔出血症病毒中国分离的ＮＪ核酸酸序列合成１对引物（ＮＪ引物）,按国分离的ＦＲＧ株核酸序列民另１对引物（ＦＲＧ引物）,进行ＰＣＲ和ＲＴ－ＰＣＲ。 相似文献
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根据鸡传染性贫血病病毒的基因结构，设计并合成一对限制扩增长度为０．６８ｋｂ的ＰＣＲ引物，直接对临床可凝病鸡的血清进行靶ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增。 相似文献
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用病毒分离、血凝与血凝抑制试验、琼脂扩散试验、夹心ＥＬＩＳＡ、ＲＴ－ＰＣＲ及ｃＤＮＡ探针斑点杂交试验等六种方法对一起罕见疫情的传入途径进行了调查。病毒分离和ＲＴ－ＰＣＲ试验证明，这是由于鱼粉中污染有鸡传染性法氏囊病病毒所致。本研究结果提示，ＲＴ－ＰＣＲ是进行鸡传染性法氏囊病病毒传播途径研究的首选方法，应加强饲料的兽医卫生监督管理，探讨把重要疫病病原列入质检项目的可行性。 相似文献
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一步法RT—PCR检测禽呼肠孤病毒方法的建立与应用（摘要） 总被引：2，自引：0，他引：2
禽呼肠孤病毒 (ＡＲＶ)是呼肠孤病毒属的成员 ,在临床上主要引起鸡病毒性关节炎 /腱鞘炎、吸收障碍综合症等多种疾病。禽呼肠孤病毒感染导致鸡群的饲料报酬降低、生产能力下降、屠宰废弃率高和引起免疫抑制而造成其它疾病的并发或继发感染 ,使鸡群死亡率升高 ,其危害相当严重。目前 ,对于禽呼肠孤病毒的检测已建立起了常规的病毒分离鉴定、ＥＬＩＳＡ和荧光抗体检测方法 ,近年来 ,我们也建立了ＲＴ ＰＣＲ、半套式ＰＣＲ和核酸探针等技术。本研究的目的是建立一种更加简便的一步法ＲＴ ＰＣＲ检测禽呼肠孤病毒的技术。禽呼肠孤病毒为双链Ｒ… 相似文献
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应用反转录聚合酶链反应检测鸡传染性支气管炎病毒核酸的研究 总被引：1，自引：0，他引：1
根据国外报道的鸡传染性支气管炎病（ＩＢＶ）Ｇｒａｙ株的纤突蛋白（Ｓ１）核苷酸序列，自行设计合成了Ｓ１蛋白主要抗原决定簇基因两侧的１对引物，跨幅为１．０ｋｂ。用该引物对从内蒙古、天津、山东等地分离的３株ＩＢＶ进行ＲＮＡ提取，反转录后ＰＣＲ，经琼脂糖凝胶电泳结果表明，３株毒株均获得了与预期一致的ＰＣＲ产物；此外，ＩＢＶＰＣＲ灵敏度的测定结果表明，ＰＣＲ方法可检测出１０ｐｇ的模板，ＰＣＲ酶切结果为，ＨａｅⅢ、ＴａｇⅠ酶对３株ＰＣＲ产物均有１个酶切位点，而ＭｓＰⅠ酶无酶切位点 相似文献
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根据鸡传染性贫血病病毒（ＣＡＶ）的基因结构，设计并合成一对限制扩增长度为０．６８ｋｂ的ＰＣＲ引物．直接对临床可疑病鸡的血清进行靶ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增．在不同地区的３批样品中，有２批扩增出一二分子量接近０．７ｋｂ的单一特异性ＤＮＡ片段．用限制酶ＢｇｌⅡ消化ＰＣＲ产物．可获得分子量分别为０．３３ｋｂ和０．３５ｋｂ两个ＤＮＡ片段，其酶切位点与靶ＤＮＡ的相吻合．将ＰＣＲ扩增为阳性的病料接种６日龄ＳＰＦ鸡胚，并取其１８日龄胚肝和由接种鸡肛孵出的雏鸡的血清重新进行ＰＣＲ扩增，结果均为阳性，而同期对照胚肝及雏鸡血清为阴性．此外还用胚胎时接种过病料的雏鸡肝、脾和胸腺等组织抽提液作抗原，建立了检测ＣＡＶ血清抗体的ＥＬＩＳＡ方法．研究结果提示，用ＰＣＲ直接对病鸡血清中ＣＡＶＤＮＡ的扩增以及ＣＡＶ抗体的ＥＬＩＳＡ检测是快速和特异的．它为鸡传染性贫血病（ＣＩＡ）的流行病学调查、实验室诊断、ＣＡＶ毒株的分离和鉴定提供了必要的检测手段． 相似文献
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利用TB_PCR试剂盒对牛结核病的检测 总被引：5，自引：0，他引：5
应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术制备的ＴＢ－ＰＣＲ试剂盒对来自新疆６个牛场的２３８份血样、奶样、口腔分泌物标本中结核分枝杆菌进行检测,结果显示：ＴＢ－ＰＣＲ试剂盒对４０份奶样样本进行检测,７头为阳性,阳性检出率１７．５％。ＴＢ－ＰＣＲ试剂盒对１７８份血样标本的检测,２３头牛为阳性,阳性检出率为１２．９２％。ＴＢ－ＰＣＲ试剂盒对２０份口腔分泌物标本中结核分歧杆菌检测结果均为阴性。本试验中共计检测６个牛场的２３８份不同标本的ＰＣＲ阳性牛共计２７头,阳性检出率为３．０２％。将ＰＣＲ和传统的ＰＰＤ检测方法的结果比较显示ＰＰＤ检出阳性率高于ＰＣＲ,ＰＰＤ检出阳性牛３９头,检出阳性率６．７％。本试验对口腔分泌物标本的检测结果不理想。总之,ＴＢ－ＰＣＲ试剂盒在检测牛结核病不同标本中显示出快速、特异等优点。为今后牛结核病的检测 相似文献
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一、甘保罗病病毒基因分型概念和原理甘保罗病病毒（传染性法氏囊病病毒．ＩＢＤＶ）能够引起雏鸡的免疫抑制，从而给养鸡业带来严重的经济损失近年来ＩＢＤ临诊呈现出温和型至毁灭性的死亡等多种不同症状，ＩＢＤＶ也出现了低毒力型和超强毒力型等不同类型的毒株。鉴于不同ＩＢＤＶ毒株引起疾病的能力不同，所以ＩＢＤＶ毒株类型的确定对于ＩＢＤ的防治具有重要意义。随着现代分子生物学技术的发展，很多新技术已经被应用于禽病的诊断，其中ＰＣＲ和ＲＦＬＰ是近年来应用较多的方法．在美国已有禽病专家将其成功应用于ＩＢＤＶ的诊治。ＲＷ… 相似文献
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应用聚合酶链反应检测鉴别火鸡支原体方法的建立 总被引：8，自引：0，他引：8
根据基因库中火鸡支原体（ＭＭ）１６Ｓ ｒＲＮＡ基因序列（Ｇｅｎｅｂａｎｋ Ｕ０４６４９）,设计了一对跨幅为８５０ｂｐ的引物,用这对引物对４禽侏火鸡支原体标准菌株和６种其它禽病病原体进行ＰＣＲ扩增,结果４禽株鸡支原体菌株均得到片段大小与预期设计相一致的８５０ｂｐ的ＰＣＲ扩增产物,而其它６种禽病病原体（包括ＭＧ、ＭＳ和ＭＩ）的扩增结果则均为阴性,该ＰＣＲ能检出１００ｆｇ的火鸡支原体的ＤＮＡ模板。 相似文献
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减蛋综合征病毒套式PCR检测技术的研究 总被引：5，自引：1，他引：4
从ＧｅｎｅＢａｎｋ的１段含六邻体蛋白基因、蛋白酶基因、ＤＮＡ结合蛋白基因的序列中，应用Ｐｒｉｍｅｒ软件设计了２对引物。用这２对引物在分别对反应体系成分和聚合酶链反应（ＰＣＲ）试验条件进行优化后，成功地建立了减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）套式ＰＣＲ检测技术。对鹌鹑源ＥＤＳＶＱＡＶｃ－９４株、ＡＶ－ｘｂ西北分离株、ＡＶ－１２７国际标准株扩增结果，第一轮ＰＣＲ得到约２９０ｂｐ的特异性片段，第二轮ＰＣＲ得到约９０ｂｐ的片段，与预期２８９ｂｐ、８９ｂｐ的设计相符合。而传染性腔上囊病病毒（ＩＢＤＶ）疫苗株Ｂ８７、鸡亲城疫病毒（ＮＤＶ）Ⅳ系疫苗株（ＬａＳｏｔａ）和正常尿囊液等对照的扩增结果均未显示任何扩增条带，有很好的特异性。所建立的套式ＰＣＲ检测方法具有特异、快速的优点，其灵敏度比常规ＰＣＲ灵敏１００倍，可检测出０．０１ｆｇ的 相似文献