应用多重PCR检测人工感染鸡呼吸道疾病的研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

庞耀珊  谢芝勋  谢志勤  刘加波  邓显文  廖敏  M.I.Khan 《中国预防兽医学报》2001,23(6):415-418

本文报道了IBV，NDV，ILTV，MG人工感染4周龄SPF鸡和非免疫鸡后，用多重PCR检测试验鸡的咽喉棉拭子和器官组织样品，并与传统的病原分离鉴定，血清学方法进行比较，多重PCR无论是对单一感染病原，还是对两种以上混合感染病原，其敏感性和检测速度都优于传统的鉴别诊断方法，具有较高的实用价值，可以直接应用于临床检测，服务于生产。  相似文献   

一步法RT-PCR检测禽呼肠孤病毒方法的建立与应用(摘要)     

廖敏  谢芝勋  谢志勤  刘加波  庞耀珊  邓显文  唐小飞  何竞铭 《广西畜牧兽医》2003,19(2)

禽呼肠孤病毒(ARV)是呼肠孤病毒属的成员,在临床上主要引起鸡病毒性关节炎/腱鞘炎、吸收障碍综合症等多种疾病.禽呼肠孤病毒感染导致鸡群的饲料报酬降低、生产能力下降、屠宰废弃率高和引起免疫抑制而造成其它疾病的并发或继发感染,使鸡群死亡率升高,其危害相当严重.  相似文献   

应用RAPD技术分析禽多杀性巴氏杆菌广西分离株的DNA多态性     

刘加波谢芝勋  唐小飞邓显文庞耀珊  谢志勤 《中国兽医科技》2004,34(8):32-35

应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术，以随机引物单条或成对组合的方式对9株禽巴氏杆菌(PM)广西分离株和3个参考株的DNA进行了多态性分析。结果显示，在选用的20个引物中，有4对引物(4条引物成对组合)扩增的条带为1～16条，其长度在90～2600bp。相似指数分析显示，PM广西分离株GX2与GX4的相似指数最高，为0．97；GX7与B26T1200的相似指数最低，为0．21，C48—1标准强毒株与PM广西分离株间的相似指数为0．33～0．64。表明广西当地的流行株呈现多样性，与PM标准强毒株存在差异。  相似文献   

2000～2004年间广西新城疫病毒强毒株的分离与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘加波  谢芝勋  唐小飞  庞耀珊  邓显文 《中国家禽》2005,9(Z1):129-132

近年来从广西不同地区规模化鸡场的13个肉鸡群病死鸡中分离到13株有血凝性的病毒,这13株病毒的血凝性均能被新城疫标准阳性血清抑制,经过血凝(HA)试验、血凝抑制(HI)试验和RT-PCR检测结果确定为新城疫病毒.13株病毒的生物学特性测定实验结果证明该13株病毒均为新城疫病毒强毒株.  相似文献   

禽呼肠病毒感染鸡胚成纤维细胞后Toll样受体mRNA转录水平的动态变化     

蓝元喜  谢芝勋  黄莉  谢丽基  邓显文  范晴  罗思思  谢志勤  黄娇玲  张艳芳  王盛  曾婷婷 《动物医学进展》2016,(9)

为分析禽呼肠病毒(ARV)标准毒株S1133株感染鸡胚成纤维细胞(CEF)后对相关鸡Toll样受体(ChTLRs)mRNA转录水平的影响作用,利用实时荧光定量PCR,测定和分析ARV-S1133感染CEF后ARV结构蛋白σC和ChTLRs的mRNA转录水平变化情况。结果表明,ARV-S1133感染CEF 10h后,ARVσC蛋白的mRNA相对表达量开始迅速上升,在48h达到峰值;同时,感染CEF中的ChTLR3、ChTLR5、ChTLR7、ChTLR15和ChTLR21mRNA表达量发生显著变化,在感染72h内各个受体的mRNA表达量呈波浪式变化。5个不同滴度的ARV感染CEF 24 h后,ChTLR3、ChTLR5、ChTLR7、ChTLR15、ChTLR21mRNA转录水平与病毒滴度均呈正线性相关。上述结果表明,ARV感染后可诱导CEF ChTLR3、ChTLR5、ChTLR7、ChTLR15、ChTLR21的mRNA转录水平发生变化,可能与禽呼肠病毒的复制和致病机制相关。  相似文献   

广西鸡毒支原体血清学调查   总被引：20，自引：1，他引：19  

邓显文  谢芝勋  刘加波  庞耀珊  谢志勤  韦启高  邓小明  廖欣雪 《广西畜牧兽医》1999,15(1):22-24

鸡毒支原体（ＭＧ）是引起鸡慢性呼吸道病（ＣＲＤ）的重要病原。其特征是病鸡表现气管罗音、咳嗽、流鼻涕,母鸡产蛋下降,生产性能降低。是危害养鸡业发展的重要传染病之一。为了搞清广西鸡群中鸡毒支原体的感染情况,我们采用了鸡毒支原体血清快速平板凝集方法,检查了...  相似文献   

3株新城疫病毒广西分离株L基因的克隆与序列分析     

唐小飞  谢芝勋  刘加波  庞耀珊  邓显文  谢志勤 《畜牧与兽医》2006,38(4):18-20

根据GenBank登陆的新城疫病毒L基因序列,设计了3对引物(L1和L2、L3和L4、L5和L6)。用RT-PCR技术对3株新城疫病毒广西分离GX7/02、GX9/03、GX11/03的L基因进行了分段扩增和克隆,并对克隆出来的3个片段进行序列测定,用DNAstar软件比较分析后进行拼接,得到长约为6.8 kb、包含有L基因全长的核苷酸序列。L基因的RNA全长为6 704 bp,拥有一个6 615 bp的开放阅读框,推导其编码的氨基酸数为2 204个。氨基酸同源性分析表明广西分离株之间同源性为98.6%~98.7%;与ZJ1株同源性为98.8%~98.9%;与La-Sota、B1、F48E9、HB92同源性为92.0%~94.2%。  相似文献   

对虾WSSV和IHHNV多重PCR检测试剂盒的研究与应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

庞耀珊  谢芝勋  谢志勤  唐小飞  邓显文  刘加波 《水利渔业》2007,27(6):95-97

在对虾白斑综合征病毒(WSSV)和传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)二温式PCR检测技术前期研究的基础上,将这2种病原的特异性引物与PCR基础反应液一起组装成快速检测试剂盒。通过对试剂盒敏感性、稳定性和保存期等技术指标的测定以及对临床样品的检测试验,该试剂盒对同一样品中的WSSV和IHHNV DNA模板均能特异性地扩增出2条与实验设计相符的593 bp(WSSV)和356 bp(IHHNV)的DNA片段,而对其它对虾病原的扩增结果均为阴性;该试剂盒最低能检测到102pg的WSSV DNA和10 pg的IHHNV DNA。对WSSV和IHHNV DNA的检出量分别为102~103pg和10~102pg。  相似文献   

二温式多重RT-PCR快速检测对虾TSV和IHHNV的研究     

庞耀珊  谢芝勋  唐小飞  邓显文  刘加波 《水利渔业》2005,25(6):93-95

分别针对桃拉综合征病毒（TSV）基因、传染性皮下和造血器官坏死病毒（IHHNV）基因,设计了2对特异性引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了快速检测TSV和IHHNV的二温式多重RT-PCR技术.特异性和敏感性试验结果表明,该技术只对TSVRNA和IHHNVDNA进行扩增,分别得到1条231bp的TSV特异性cDNA扩增片段和1条356bp的IHHNV特异性DNA扩增片段,对其它对虾病原核酸的扩增结果为阴性,该技术最低能同时检测到10pg的TSVRNA和IHHNVDNA,具有高度的特异性和敏感性.临床应用试验证明,该技术可以用于对虾养殖业中TSV和IHHNV的快速检测和鉴别诊断.  相似文献   

多重聚合酶链式反应鉴别新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒和鸡毒支原体研究的概述     

谢芝勋  庞耀珊  谢志勤  刘加波  邓显文  廖敏 《广西畜牧兽医》2002,18(5):3-5

新城疫 (ＮＤ)、传染性支气管炎 (ＩＢ)、传染性喉气管炎 (ＩＬＴ)和鸡毒支原体 (ＭＧ)是四种严重危害养鸡业发展的常见呼吸道传染病 ,在世界许多国家广泛流行。这几种鸡呼吸道传染病的流行病学、临床特征和病理变化十分相似。临床上 ,一个鸡群同时感染二种上述呼吸道传染病病原体的现象也常有发生。常规的病原分离鉴定、血清学方法难以对两种上述病原混合感染的鸡呼吸道传染病作出快速鉴别诊断。聚合酶链式反应 (ＰＣＲ)技术具有快速、简便、特异及敏感等特点 ,近年来在禽病诊断中已得到了广泛应用。但常规ＰＣＲ技术一次扩增只能诊断一种…  相似文献