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真核生物mRNA差异显示技术的创立及其对该技术的一系列改进,为研究胚胎发育过程中有关基因的差异表达,以及有关基因的分子克隆提供了有效工具.文章概述了差显技术的原理及其在动物早期胚胎发育基因方面的研究进展. 相似文献
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mRNA差异显示技术及其在动物科学研究中的应用 总被引：5，自引：1，他引：5
基因表达的变化是调控细胞生命活动过程的核心机制,分析不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下基因的表达状况,可以为研究生命活动过程提供重要信息。mRNA差异显示技术(differentialdisplay,DD)是目前应用比较广泛的在mRNA水平上检测基因表达的方法之一。本文介绍了mRNA差异显示技术原理及其优缺点,对包括引物设计改进、反应条件的优化、差异条带显示方法改进和降低假阳性策略等在内的技术改进进行了概述,对mRNA差异显示技术在动物生理学和病理学、动物胚胎、个体发育、动物遗传育种、动物营养研究中的应用作了概括介绍。 相似文献
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生物体表现出的各种生物学特性,主要是由于基因在不同细胞间及不同生长阶段的选择性差异表达引起的.这些基因的差异表达按特定的时间和空间顺序有序地进行着,决定了生命活动的多样性.而基因差异表达研究的各种分析技术正是在此基础上发展起来并在兽医寄生虫学中得到广泛应用.以mRNA差异显示、抑制消减杂交法和DNA微列阵分析等为代表的基因差异表达分析技术,在基因表达谱的分析及基因生物学功能研究,阐述寄生虫的发病机制,寄生虫疾病诊断,筛选合适的药物靶标和疫苗候选分子有效地防病治病方面发挥着重要作用. 相似文献
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应用mRNA差异显示技术,对牛卵母细胞、体外培养的牛早期8细胞期和囊胚期胚胎的基因表达进行了研究。选取4条mRNA表达量存在差异的基因条带进行测序和同源性分析,并利用RT-PCR技术粗略检测其在卵母细胞、8细胞和囊胚中的表达水平。结果表明:4个基因分别与核糖体蛋白S4,Y连接1(RPS4Y1)、末端脱氧核苷酰转移酶作用因子2(DNTTIP2)、剪接和多聚腺苷酸化特异因子3(CPSF3)和转录因子AP-2γ(TFAP2C)高度同源。RPS4Y1、DNTTIP2、CPSF3和TFAP2C在牛卵母细胞和早期胚胎发育过程中mRNA表达量存在时间性差异,可能与其参与不同的生理活动有关。 相似文献
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白来航蛋鸡与丝羽乌骨鸡杂交 ,正反交组合鸡群 32周龄产蛋数的杂种优势率分别为 12 .2 %和 2 1.6 1%。mRNA差异显示研究表明 :产蛋高峰期 (32周龄 )卵巢组织的基因表达在杂种群与亲本纯种群之间存在显著的质和量的差异 ;8对引物组合显示出 91条 (31.2 7% )差异带 ;分属于 7类 2 2种基因差异表达模式 ,其中量的差异有 3类 8种。这些基因差异表达模式的存在说明了杂种的基因表达调控方式发生了变化 ,这必然与正反交组合鸡群具有较高的杂种优势率有关 ,或是mRNA水平上杂种优势形成的分子遗传基础。 相似文献
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采用mRNA差异显示技术检测了产蛋高峰期高邮鸭、金定鸭及正反交组合群体卵巢组织中的基因差异表达,并分析了差异表达模式与繁殖性状杂种优势率的相关性.研究结果表明:杂交组合在开产日龄、42周龄产蛋数性状上表现出明显的杂种优势,杂种优势率>±10%;16对引物组合共扩增出326条cDNA片段,能够重现的有248条,重现率为76.03%,发现7种差异表达模式;相关性分析显示开产日龄、42周龄产蛋数杂种优势率与杂种超强表达模式呈极显著正相关(P<0.01),与杂种特异表达呈极显著负相关(P<0.01);共显性表达模式与开产日龄杂种优势率呈显著正相关(P<0.05);7种差异表达模式与42周龄种蛋受精率和受精蛋孵化率杂种优势率2个指标之间并不存在显著相关性(P>0.05). 相似文献
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用银染mRNA差异显示技术寻找不同生长阶段绵羊皮肤中差异表达基因 总被引：2，自引：0，他引：2
利用优化了的银染mRNA差异显示技术(DD-PCR)，比较了出生后40日龄、60日龄和120日龄三个不同生长阶段的绵羊相同部位的皮肤中总RNA的差异表达。结果表明：同一个体不同日龄的绵羊存在着表达量不同的差异表达基因，并初步筛选出了8条重复性好的差异cDNA片段，其中1条表达量不同的差异片段存在于40日龄，5条存在于60日龄，2条为120日龄所特有。本试验将为进一步研究影响绵羊毛性状相关基因在皮肤中的表达提供科学的参考依据。 相似文献
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为了探讨梅山与杜洛克母猪卵巢差异表达基因对猪排卵与繁殖性状的影响,应用mRNA差异显示技术研究梅山猪与杜洛克猪卵巢中基因表达的差异性,分离9条在纯种梅山猪与纯种杜洛克猪卵巢中差异表达的表达序列标签(ESTs),并用半定量RT-PCR鉴定。通过BLAST比对发现,其中有3条EST与GenBank序列同源性较高。组织表达谱分析揭示了这些ESTs在梅山猪心脏、肝脏、肺脏、肾脏、肌肉、脂肪、小肠、大脑、卵巢、子宫、脾脏、输卵管等各个组织中的表达有不同程度的差异。研究结果表明,梅山猪和杜洛克猪卵巢之间的不同基因差异表达的方向存在差异,这些差异表达的基因可能在某种程度上导致猪繁殖力的差异,进而为研究影响猪排卵数的分子机理调控网络打下基础。 相似文献