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用针对抗氟喹诺酮类(fluoroquinolones,FQs)药物的广谱性单克隆抗体建立了可以同时检测11种FQs药物的胶体金免疫层析方法。该试纸条用20 nm的胶体金标记单抗,将诺氟沙星－卵清蛋白喷涂在检测线上,羊抗小鼠二抗喷涂在质控线上。该胶体金试纸对猪肉和虾中环丙沙星、恩诺沙星和氧氟沙星的检测限都是30 ng/g,对诺氟沙星、培氟沙星、依诺沙星、麻保沙星、洛美沙星、达氟沙星、沙拉沙星和二氟沙星8种药物在以上两种样品中添加浓度为100 ng/g时都可被检出,整个检测过程包括样品前处理的时间可在20 min内完成。试验结果表明符合对这11种FQs药物在鸡肉和虾中残留现场大量筛查的要求。 相似文献
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《中国家禽》2016,(14)
试验建立了一种分散固相萃取前处理技术结合高效液相色谱-串联质谱法检测禽蛋中9种喹诺酮类(丹诺沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、依诺沙星、培氧沙星、双氟沙星)兽药残留的分析方法。样品以乙腈、EDTA-Mcllvaine和乙酸为提取试剂、无水氯化钠为脱水剂、C18为吸附剂进行净化,以甲醇-0.1%甲酸水为流动相,反相C18色谱柱分离,正离子多反应监测模式进行质谱分析。结果:9种喹诺酮在1.0~200μg/kg范围内具有良好的线性关系,相关系数(r~2)均在0.991以上;检出限范围为0.07~0.20μg/kg,定量限范围为0.22~0.67μg/kg;平均回收率介于73.5%~92.9%之间,相对标准偏差(RSD)低于11.8%。结果表明,该方法适合于检测禽蛋中喹诺酮类药物残留量。 相似文献
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为了解和掌握定点屠宰猪肉中单核细胞增生李斯特菌(Lm)污染状况及药敏试验情况,应用国标法和PCR技术对合肥市5家定点屠宰场370份猪肉样品进行Lm分离和hly毒力基因检测,并采用标准Kirby-Bauer纸片法对分离菌株进行12种抗生素敏感试验。结果显示,Lm检出率为1.08%(4/370),4株Lm对恩诺沙星、新霉素、强力霉素、青霉素、环丙沙星、氨苄青霉素、庆大霉素、红霉素、诺氟沙星、丁胺卡那霉素、卡那霉素敏感,对依诺沙星耐药。表明合肥市定点屠宰猪肉中存在一定程度Lm的污染,hly毒力基因检测是鉴定Lm的一个重要方法;Lm对多种抗生素敏感,对依诺沙星耐药。 相似文献
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《现代畜牧兽医》2021,(10)
试验为建立1种采用高效液相色谱法检测猪肉组织中环丙沙星(CIP)、达氟沙星(DFLX)、恩诺沙星(ENR)、沙拉沙星(SAR)残留量的方法。按照农业农村部标准方法进行优化,猪肉样品经磷酸盐溶液提取,固相萃取柱浓缩净化,使用高效液相色谱分析,荧光检测器检测,外标法定量。结果表明:环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星在5～500μg/L浓度范围内,达氟沙星在1～100μg/L线性关系良好。猪肉中环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星检出限为5μg/L,达氟沙星检出限为1μg/L。在指定的高、中、低3个浓度添加水平下,4种药物在猪肉的回收率为66.1%～107.9%;批内变异系数为1.3%～6.4%,批间变异系数为2.8%～7.1%。研究表明,该方法操作简单、准确度和精密度较好、实用性强、灵敏度高,可以满足猪肉样品中氟喹诺酮类4种药物残留检测的需要。 相似文献
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利用胶体金标记的抗氟喹诺酮类单克隆抗体制备了氟喹诺酮类胶体金免疫检测试纸条。该试纸条对牛奶中恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、氟甲喹、达氟沙星检测检测限为20ug／L;对依诺沙星、恶喹酸检测检测限为40ug／L,检测检测时间5min：与三聚氰胺、磺胺类药物、氯霉素、大环内酯类药物、氨基糖苷类药物、四环素类药物在500μg／L浓度时,不发生交叉反应。试纸条的检测结果与仪器检测结果一致,重复性较好,在4℃条件下可以保存12个月,所以本研究制备的氟喹诺酮类药物残留检测试纸条可用于牛奶中11种氟喹诺酮类药物残留的检测。 相似文献
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利用胶体金标记的抗氟喹诺酮类单克隆抗体制备了氟喹诺酮类胶体金免疫检测试纸条。该试纸条对牛奶中恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、氟甲喹、达氟沙星检测限为20g／L。对依诺沙星、恶喹酸检测限为40g／L,检测时间5min,与三聚氰胺、磺胺类药物、氯霉素、大环内酯类药物、氨基糖苷类药物、四环素类药物在500g／L浓度时,不发生交叉反应。试纸条的检测结果与仪器检测结果一致,重复性较好,在4℃条件下可以保存12个月,所以该研究制备的氟喹诺酮类药物残留检测试纸条可用于牛奶中11种氟喹诺酮类药物残留。 相似文献
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胶体金免疫层析法快速检测牛奶中氟喹诺酮类药物残留 总被引：1，自引：0，他引：1
利用胶体金标记的抗氟喹诺酮类单克隆抗体制备了氟喹诺酮类胶体金免疫检测试纸条.该试纸条对牛奶中恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、氟甲喹、达氟沙星检测,检测限为20μg/L;对依诺沙星、恶喹酸检测,检测限为40μg/L.检测时间为5min.与三聚氰胺、磺胺类药物、氯霉素、大环内酯类药物、氨基糖苷类药物、四环素类药物在500μg/L浓度时,不发生交叉反应.试纸条的检测结果与仪器检测结果一致,重复性较好,在4℃条件下可以保存12个月.本研究制备的氟喹诺酮类药物残留检测试纸条可用于牛奶中11种氟喹诺酮类药物残留的检测. 相似文献
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《畜牧与兽医》2021,(10)
为快速检测食源性动物中沙拉沙星及二氟沙星的药物残留,将沙拉沙星单克隆抗体(SAR-Ab)与辣根过氧化物酶(HRP)偶联得到酶标抗体(McAb-HRP),从而建立直接竞争化学发光酶联免疫(dc-CLEIA)检测方法。结果显示:经紫外扫描鉴定,McAb-HRP偶联成功;以包被抗原(SAR-1-OVA)浓度1.25μg/mL,McAb-HRP稀释比1∶8 000作为最佳工作条件,从而建立了dc-CLEIA分析法;精密度的平均批内批间变异系数均低于7%;建立的标准曲线呈线性关系,线性范围为0.312～20 ng/mL,回归方程式y=-0.373x+0.688(R~2=0.985),经计算其灵敏度IC_(50)为3.19 ng/mL;除二氟沙星外与其他氟喹诺酮类药物的交叉反应率均低于8%,与其他种类的抗生素均无交叉反应;沙拉沙星和二氟沙星在鸡肉样品中的最低检出限分别为1.25、1.36μg/kg;沙拉沙星和二氟沙星在鸡肉样品中的添加回收率分别为88.2%～108.3%、93.36%～102.7%,且其变异系数均≤13.4%。结果表明:此方法不仅快速且灵敏度高,可作为沙拉沙星及二氟沙星药物残留的定量检测方法。 相似文献
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合成、鉴定了马波沙星(MBF)人工抗原,为马波沙星单克隆抗体的制备及其免疫学检测方法的建立奠定基础。以牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清蛋白(OVA)为载体蛋白,采用碳二亚胺法分别合成马波沙星免疫抗原(MBF-BSA)和包被抗原(MBF-OVA),并使用紫外分光光度法、SDS-PAGE、ELISA方法鉴定人工抗原合成效果。初步鉴定结果显示,MBF-BSA与MBF-OVA均偶联成功;用免疫抗原MBF-BSA免疫小鼠,经ELISA方法检测,五免后血清中抗体效价可达1∶5.12×105,半数抑制率为90.20 ng/m L。研究表明,马波沙星人工抗原合成成功,其免疫抗原具有良好的免疫原性,免疫小鼠可获得高效价、高特异性多克隆抗体。 相似文献
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为了建立一种简单、快速、灵敏、特异的肉鸡组织中氟喹诺酮类抗生素残留检测方法,试验采用胶体金标记单克隆抗体与竞争抑制方法,组装了检测氟喹诺酮类抗生素残留的胶体金免疫层析试纸条。结果表明:将具有氟喹诺酮类药物母核结构共性特征的环丙沙星(CPFX)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,获得了人工抗原CPFX-BSA,免疫6周龄Balb/c雌性小鼠,筛选得到了3株抗氟喹诺酮类抗生素广谱特异性单克隆抗体,分别命名为2D5、3E9、4H8。以4H8单克隆抗体对10种氟喹诺酮类抗生素的广谱性最好、敏感性最强,将4H8单克隆抗体纯化后标记胶体金颗粒作为金标垫,分别以CPFX-BSA偶联蛋白和兔抗鼠IgG作为检测限和质控限,组装了检测氟喹诺酮类抗生素残留的胶体金免疫层析试纸条,该试纸条肉眼于10 min内即可判定结果。检测10种氟喹诺酮类抗生素均为阳性,而检测4种常见药物均为阴性。对CPFX、培氟沙星、达氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、洛美沙星的检测限为3.2 ng/mL,对沙拉沙星、双氟沙星、麻保沙星的检测限为6.4 ng/mL。在37℃条件下可稳定保存60 d,在4℃条件下可稳定保存360 d。检测2015—2016年河北省及周边地区的鸡肉样品3 414份,阳性率为0.76%,其中屠宰场、超市、活禽市场的阳性率分别为0.38%、0.10%、2.31%。说明胶体金检测氟喹诺酮类抗生素残留具有良好的广谱性、特异性、灵敏度、稳定性,且操作简单、检测快速,适合现场检测。 相似文献
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通过N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星和沙拉沙星分别与牛血清白蛋白偶联制备免疫抗原,与卵清白蛋白偶联制备检测抗原,筛选一种可用于多种氟喹诺酮残留的检测抗体。将免疫抗原分别免疫獭兔制备多克隆抗体,采用间接竞争ELISA法测定抗体特异性。诺氟沙星抗体特异性较强,与同类药物的交叉反应较少,沙拉沙星抗体与同类药物发生交叉反应最多,且与诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星的交叉反应率较高。结果表明,确定沙拉沙星抗体作为进一步研究的抗体。 相似文献
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为了对动物源性食品中的呋喃唑酮进行快速、有效的检测,试验对检测呋喃唑酮残留的三种免疫学快速检测方法,即化学发光免疫分析法(CLEIA法)、酶联免疫分析法(ELISA法)、胶体金免疫层析法(ICA法)在检测限、检测时间等方面进行综合比较。结果表明:CLEIA法、ELISA法、ICA法对呋喃唑酮代谢物(AOZ)的检测限分别为0.01μg/L、0.02μg/L、50 ng/L,CLEIA法和ELISA法添加回收试验的变异系数范围分别为小于15.0%和小于8.0%。说明三种免疫学检测方法在不同的应用环境各具优势,CLEIA法检测灵敏度高,适用于实验室痕量残留检测;ELISA法灵敏度满足限量残留检测,适用于实验室一般项目的快速检测;ICA法所用胶体金试纸条价格低廉,操作简便,无需任何仪器,适用于野外大批量样本的阳性筛选。 相似文献
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本文采用胶体金标记的抗氟喹诺酮类单克隆抗体构建出一款试纸条,它可以特异性地检测猪尿中氟喹诺酮类药物的残留。通过透射电子显微镜进行表征,确定所制备的胶体金颗粒平均直径为40nm;通过紫外一分光光度计扫描得到的胶体金氟喹诺酮单克隆抗体最大吸收波长为524 nm。浓度为1 mg/mL的该单克隆抗体最佳加入量为10μL。用该方法制备的试纸条,可以检测猪尿中恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、依诺沙星和恶喹酸等9种氟喹诺酮类药物,检出限为20μg/L,在37℃时可以保存160天左右,在4℃时可以保存24个月。 相似文献
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