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抗鸡ＩｇＧ、抗鸭ＩｇＧ单克隆抗体杂交瘤细胞株的稳定性研究张春红伍惠卿杜伟贤黄忠（广东省农业科学院兽医研究所，广州５１０６４０）自１９７５年Ｋｏｈｌｅｒ和Ｍｉｌｓｔｅｉｎ首次利用Ｂ淋巴细胞杂交瘤技术生产单克隆抗体（ＭｃＡｂ）以来，为所有需要制备和使用抗... 相似文献
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用牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）单克隆抗体检查了大量北美ＢＶＤＶ分离株和血清学相关的瘟病毒属中的猪瘟病毒（ＨＣＶ）。结果，没有一种ＢＶＤＶ单克隆抗体能与所有ＢＶＤＶ分离株发生反应，交叉反应性最强的单克隆抗体为抗Ｐ８０／Ｐ１２５抗体，这种抗体与１７５／１８０株北美分离株发生阳性反应（９６％）、抗ｇｐ５３单克隆抗体与少数分离株的交叉反应性也较高（９４％）。７株单克隆抗体中至少有１株能与所有ＢＶＤＶ分离株 相似文献
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牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的鉴定 总被引：3，自引：1，他引：2
筛选建立了8株牛病毒性腹泻病毒（BVDV）单克隆抗体杂交瘤细胞，通过对其染色体的分析、单克隆抗体免疫球蛋白类型及病毒中和活性等指标的检测，表明8株单克隆抗体杂交瘤细胞的染色体数目均接近两亲本细胞的染色体数目之和；单克隆抗体免疫球蛋白类型均为IgG，其中6株为IgG1,2株为IgG2a，且以BVDV具有不同程度的中和能力。 相似文献
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葛红霞 《畜牧兽医科技信息》2007,(3):9-10
单克隆抗体（monoclonal antibody，McAb）是指由一个B细胞分化增殖的子代细胞，浆细胞产生的针对单一抗原决定簇。单克隆抗体与抗血清（又称多克隆抗体，polyclonal antibody，PcAb）主要区别是单克隆抗体为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。所以单克隆单体是B细胞克隆的标志，是一种独特型的抗体。它的特异性是针对一个抗原决定簇的。与多克隆抗体相比单克隆抗体具有无可比拟的优越性：高特异性、高纯度、均质性好、亲和力不变、重复性好、效价高、成本低并可大量生产等优点。但是制备单克隆抗体不能用化学分离的方法从多克隆抗体中分离得到，而是用分离生产抗体的B细胞克隆的方法得到它。Kohler和Milstein在1975年建立了体外淋巴细胞杂交瘤技术，利用该技术他们获得了第一株能分泌抗羊红血球单抗的杂交瘤细胞。 相似文献
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作者建立了一种抗原捕获酶联免疫吸附试验（Ｃ－ＥＬＩＳＡ）。用对各血清型Ｓ１糖蛋白有特异性的单克隆抗体（ＭＡｂ），对阿肯色（ＡｒＫ）、康涅狄格（Ｃｏｎｎ）、马萨诸塞（Ｍａｓｓ）等血清型的传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）进行了检测和鉴定。当Ｓ１特异性单克隆抗体、抗原、鸡血清的血清型相同时，试验（采用双抗体夹心法）结果最为理想。而用群特异性（Ｍ糖蛋白特异性）ＭＡｂ捕获抗原。抗原和异源鸡血清之间有不同程度的交 相似文献
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用猪瘟单克隆抗体监测猪瘟免疫抗体及疫情段荫祥，王建民（天津市畜牧兽医站，天津３００４０２）马志刚（天津市小南河猪场）猪瘟是养猪生产中的重要疫病之一，猪场如何及时发现猪瘟强毒感染，采取紧急措施避免造成严重损失，是养猪生产急待解决的问题。猪瘟单克隆抗体诊... 相似文献
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用与细胞色素C交联的氨苄青霉素（Ampcy）免疫的BALB／c鼠脾细胞与SP2／0鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选、克隆，获得3株能稳定传代并分泌抗青霉素的单克隆抗体的杂交瘤细胞（1C1，2C11K和207），并分别制备它们的单克隆抗体腹水。3株单克隆抗体腹水的间接ELISA效价在10“以上，1C1和2C11的抗体类型及亚类均为IgG1，而207为IgM，3株单克隆抗体的轻链均为k链。3株单克隆抗体（1C1、2C11、2G7）的青霉素50％抑制质量浓度分别为45．3、60．1、80．0μg／L。间接竞争酶联免疫吸附试验（CI—ELISA）显示，3株单克隆抗体对青霉素类和先锋霉素类抗生素有特异性反应，而对链霉素、卡那霉素、氯霉素、土霉素、四环素、新霉素其他抗生素没有交叉反应，可用于青霉素类抗生素残留的检测。 相似文献
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用醋酸缓冲液和４０％饱和硫酸铵边续沉淀法从绵羊棘球囊液（ＳＨＣＦ）中得到部分纯化抗原（ＳＰＰＣＦ），并从中分离了抗原Ａ和抗原Ｂ，分别用单克隆抗体反向间接血凝试验（Ｍ－ＲＰＨＡ）、单克隆抗体双扩散试验（Ｍ－ＤＤ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）进行了鉴别，表明自制的三株单克隆抗体（ＭｃＡｂ）均识别ＳＨＣＦ、ＳＨＣＦ、ＳＰＰＣＦ及抗原Ｂ，而不识别抗原Ａ；用ＥＬＩＳＡ对阳、阴性血清检测，ＳＰＰＣＦ、抗原 相似文献
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抗狂犬病毒单克隆抗体的纯化及标记 总被引：2，自引：0，他引：2
对一株稳定、特异、高效的单克隆抗体（mAb）进行了纯化和荧光素（FITC）的标记,利用标记产物与已有的抗狂犬病毒核蛋白单克隆抗体标记物相比较,效果良好,二者可以结合（或单独）使用;应用标记好的荧光抗体与FITC-抗狂犬病毒免疫球蛋白比较进行血清样品效价测定实验,来确定纯化、标记后的单克隆抗体的灵敏度,结果表明本实验制备的单克隆抗体与FITC-抗狂犬病毒免疫球蛋白具有相同的灵敏度,该单克隆抗体测得的血清样品效价结果与FITC-抗狂犬病毒免疫球蛋白测得的结果相同。因此,此荧光抗体可应用于狂犬病病毒检测（FAT）、病毒毒力测定（TCID50）、中和抗体实验（FAVN）等方面的检测实验,此荧光抗体可为狂犬病的相关研究提供有力的保障。 相似文献
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利用提纯的禽脑脊髓炎病毒（AEV）Van Roekel株作为免疫原，免疫6周龄BALB／c小鼠，采取其脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，用间接ELISA法筛选，间接免疫荧光法（IFA）和免疫组织化学法鉴定，经3次亚克隆得到了稳定分泌抗AEV单克隆抗体的杂交瘤细胞株F11和G2，制备了腹水，并利用该单克隆抗体初步建立了Dot—ELISA、间接ELISA和IFA等特异性检测AEV抗原的方法。 相似文献
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新城疫病毒的实验室诊断一般是接种SPF鸡胚分离病原，通过血凝抑制性实验（HI）或者快速实时逆转录聚合酶链反应试验（RRT-PCR）来进行确诊。众所周知，新城疫病毒可在鸡胚的尿囊腔内复制繁殖，而鸡胚平均致死时间（MDT）取决于病毒毒力的强弱。血凝抑制试验（HI）常被用来判断一种未知病毒是否属于新城疫病毒，单克隆抗体试验可进一步对新城疫病毒进行分型。当没有唯一的单克隆抗体来确定新城疫病毒的毒性时，可用一组单克隆抗体来区分病毒的差异，例如，可以从PPMV-1中区分出低毒力的新城疫病毒。此外，单克隆抗体试验对于快速鉴定Ⅰ型新城疫病毒的效果并不佳，绝大多数单克隆抗体已经过改良并适用于识别Ⅱ型新城疫病毒，但并不能识别Ⅰ型新城疫病毒。由于单克隆抗体直接作用于单一特异的抗原表位，因此它们检测不同病毒的能力往往是有限的。而其他血清学的方法，如ELISA也常用于实验室诊断，以用来评估疫苗接种后的抗体反应。不过，这对于疾病的监测和诊断方面的价值非常有限，主要因为家禽使用疫苗的情况非常普遍。 相似文献
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我们应用番鸭细小病毒单克隆抗体建立检测MPV抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，并和胶乳凝聚试验（LPA）、免疫荧光抗体试验（FA）的检测结果相比较：１材料方法１．１病毒和单克隆抗体雏番鸭细小病毒强毒株（MPV－F），雏番鸭细小病毒单克隆抗体（MPV－McAb１５），由本所单克隆研究室制备提供犤１、２犦。１．２样品处理２日龄雏番鸭２０羽，每羽腿部肌肉注射０．２mlMPV－F番鸭胚悬液。待雏番鸭发病后扑杀，取肝脏和脾脏组织。一部分组织用蒸馏水制成１∶１匀浆液后，加等体积氯仿振荡３min，５０００rpm／min离心５min，… 相似文献
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鸡传染性喉气管炎病毒单克隆抗体的研究＊杨润德冯书章＊＊郑瑞峰马丛林＊＊张旭曰升高轩李谭清（河北农业大学动物科技学院，保定０７１００１）鸡传染性喉气管炎（ＩＬＴ）是由传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）引起的一种急性上呼吸道传染病，各年龄及品种均易感，一年四... 相似文献
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抗鸡IgG单克隆抗体酶结合物的制备 总被引：1，自引：0，他引：1
抗鸡ＩｇＧ单克隆抗体酶结合物的制备张春红，杜伟贤，伍惠卿等（广东省农科院兽医研究所广州５１０６４０）近年来，核酸探针等一系列新技术不断问世并逐步投入了生产应用，但在兽医临床体液免疫效果及疫病情况监测量方面，血清抗体（主要是ＩｇＧ）水平的测定仍以其准确... 相似文献
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应用纯化的新城疫病毒（ＮＤＶ）Ｆ４８Ｅ９株免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，经间接ＥＬＩＳＡ法检测筛选到４２株分泌抗ＮＤＶ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。并对各株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类、血凝抑制效价（ＨＩ）、溶血抑制效价（ＨＬＩ）、ＥＬＩＳＡ效价及中和效价加进行了测定，结合单克隆抗体的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ反应结果鉴定出抗ＮＤＶＨＮ蛋白１１株，抗Ｆ蛋白２０株 相似文献
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猪生长激素抗独特型抗体的制备及免疫学鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
应用猪生长激素（Ag）纯品，通过杂交瘤技术制备了猪生长激素单克隆抗体（Ab1）。Ab1经免疫亲和层析柱纯化后免疫新西兰白兔，其血清经饱和硫酸铵纯化后获得猪生长激素抗独特型抗体（Ab2）。再应用ELISA等方法进行鉴别。Ab2与Ab1呈阳性反应，与BALB／c小鼠r球蛋白呈阴性反应；Ab2与Ag竞争结合Ab1；Ab2抑制Ab1与Ag的结合。Ab1是针对猪生长激素纯品的单克隆抗体。Ab2是具有猪生长激素抗原内影像的抗独特型抗体。 相似文献
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[目的] 纯化猪塞尼卡谷病毒（Seneca Valley virus，SVV）SVV-CH-HB2016毒株，并制备其结构蛋白VP1、VP2和VP3的单克隆抗体。[方法] 以蔗糖密度梯度离心法纯化的SVV-CH-HB2016病毒颗粒作为抗原，免疫BALB/c小鼠，取脾细胞与骨髓瘤细胞（SP2/0）进行细胞融合。通过间接免疫荧光试验（IFA）结合间接ELISA筛选阳性细胞株，制备能特异性分泌针对结构蛋白的杂交瘤细胞株。采用Western blotting和IFA方法分别检测单克隆抗体与重组表达蛋白及天然结构蛋白的反应性，并对单克隆抗体的病毒中和保护效果进行测定。利用空斑试验和实时荧光定量PCR方法探究中和性单克隆抗体对SVV-CH-HB2016毒株吸附过程的影响，最后用抗体相加试验来分析14株单克隆抗体的抗原表位。[结果] 在蔗糖密度梯度为5%~45%（W/V）时获得了纯度较好、浓度较高的SVV-CH-HB2016毒株结构蛋白，免疫小鼠血清抗体效价均达到了1：12 800，成功制备了17株能稳定分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经验证14株单克隆抗体能与重组结构蛋白发生Western blotting反应，17株单克隆抗体能与病毒发生IFA作用；2G6、4A3和4C11 3株单克隆抗体对SVV-CH-HB2016毒株感染的BHK-21细胞具有明显中和保护作用，也能有效抑制SVV-CH-HB2016毒株对293T细胞的吸附。经分析发现，除1F5与2E1、4B8与4F11外，其余10株单克隆抗体分别针对不同抗原表位。[结论] 本研究初步建立了SVV的纯化方法，制备了17株特异性针对SVV-CH-HB2016毒株的单克隆抗体，为后期进一步开展SVV全病毒灭活疫苗的研发、ELISA检测方法的建立及保护性抗原表位的鉴定奠定了基础。 相似文献