共查询到20条相似文献，搜索用时 171 毫秒
1.
原位PCR技术在兽医分子生物技术中的应用 总被引：2，自引：0，他引：2
本文阐述了原位PCR技术的原理、操作步骤及注意事项，原位PCR中非特异性问题及主要技术难点，原位PCR结果对照实验的目的和设计方法，不同原位检测技术的应用比较及其在兽医分子生物技术的应用和前景。对临床兽医分子水平的研究和诊断具有一定的指导作用，是兽医分子生物技术的重要研究内容。 相似文献
2.
猪流行性腹泻病毒检测方法研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
介绍了猪流行性腹泻病毒实验室检测方法的研究进展,在细胞生物学方面,主依靠病毒分离培养、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等检测方法;在分子生物学方面,主依靠核酸杂交技术、RT—PCR法和实时荧光定量RT—PCR法等检测方法。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者提供参考。 相似文献
3.
禽网状内皮组织增生症病毒检测方法研究进展 总被引：1，自引：0，他引：1
禽网状内皮组织增生症（Reticuloendotheliosis,RE）是危害养禽业的一种重要病毒性肿瘤病。本文概述了禽网状内皮组织增生症病毒（REV）实验室检测方法的研究进展。在细胞生物学方面,主要依靠病毒分离培养、病毒电镜形态检查、病毒特异性抗原及其抗体的检查等。在分子生物学方面,主要依靠国内外相继建立起的PCR、荧光定量PCR、LAMP技术及斑点分子杂交等。介绍和比较了各种方法的优缺点和实用性,为临床兽医科技工作者建立快速、简便、准确、实用的检测方法提供参考。 相似文献
4.
5.
6.
7.
8.
近年来,随着畜牧兽医行业的发展和人民卫生水平的提高,核酸检测起着越来越重要的作用,即时检测在兽医实践中的需求十分迫切。重组酶聚合酶等温扩增（RPA）和重组酶介导扩增技术（RAA）是近年发展起来的核酸恒温扩增技术,可与侧向流层析等多种技术相结合,实现恒定温度下的快速检测。相对于PCR等传统方法,RPA和RAA具有操作简单快速、不易交叉污染、不需要大型仪器、结果判定简单明确、利于基层应用的优点,因而在兽医领域得到了广泛应用。该文对RPA和RAA技术的发展和在兽医领域的应用进行了综述。 相似文献
9.
在病毒学研究中,对体内外病毒载量及细胞基因表达水平进行定量分析,对于从分子水平上揭示病毒的致病机理、病毒和机体之间的相互作用等十分必要[1].在众多对核酸定量的方法中,实时荧光定量PCR,简称Real-time PCR或Kinetic PCR,是20世纪90年代发展起来的一项新技术,由于其与常规PCR相比,具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、无需PCR后电泳、全封闭反应等优点,在多个学科领域中都得到了应用.文章就Real-timePCR技术在病毒学研究中的应用进行了简要概述. 相似文献
10.
本文主要以猪病诊断和防治中PCR技术的应用为重点进行阐述,结合当下PCR技术相关概述为主要依据,从PCR技术在猪2型环病毒中的应用、PCR技术在猪瘟病毒中的应用、PCR技术在呼吸与繁殖综合症中的应用、PCR技术在混合感染中的应用这几方面进行深入探索与研究,其目的在于加强对猪病的诊断和防治,从而为养殖猪场带来更多的经济效益。 相似文献
11.
为建立犬细小病毒(CPV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法,实现CPV的早期快速诊断,本研究根据GenBank登录的CPV VP2基因序列,在其序列保守区域设计LAMP引物,利用CPV基因组DNA为模板进行扩增。结果表明:LAMP方法检测灵敏度达到10-1TCID50/mL;并且与其它细小病毒等无特异性扩增,表现出良好的特异性。与PCR技术相比,LAMP法操作更加简单方便,更适合基层和实验室的快速检测。 相似文献
12.
荧光RT-PCR技术与古典病原分离技术检测AIV比较试验 总被引：7，自引：0，他引：7
应用荧光RT-PCR技术和古典病原分离技术对304份样品进行AIV对比检测试验，结果应用RT-PCR技术可在4小时内从304份样品中检出AIV阳性26份，而病原分离技术检出了AIV阳性22份，需要时间为至少15天．两者阳性样品重复率为100％，因此，与古典病原分离技术比较，荧光RT-PCR技术具有高度特异、敏感的特性，而且可以大大地缩短对AIV的检测时间。 相似文献
13.
实时荧光定量PCR技术是结合PCR技术、光谱技术和计算机技术发展起来的一种新型分子生物学定量检测技术,其融合了PCR技术的高灵敏性、DNA杂交的高特异性和光谱技术的高精确定量的特点,它不仅实现了对核酸模板的定量,而且具有特异性强、灵敏度高、重复性好、准确性高、自动化程度高、速度快、全封闭反应、无污染等优点,在猪瘟疫苗的定量检测、猪瘟的诊断以及猪瘟病毒强、弱毒株鉴别诊断中得到了广泛应用,显示出了良好的应用前景。论文就荧光定量PCR技术及其在猪瘟诊断上的应用做一简要综述,为我国猪瘟的综合防控提供参考。 相似文献
14.
15.
16.
根据NC-005336 ORFV全基因中gORF011设计合成一对引物。建立用于检测羊传染性脓疱病毒的PCR方法。此方法检测羊传染性脓疱病毒结果与病毒分离培养,电镜检查结果一致。经过对扩增产物进行序列分析,与NC-005336 ORFV的核苷酸序列同源性高达97.48％。通过特异性,敏感性及临床应用实验证明,此方法可以检测10^4ICID50浓度病毒;临床应用检出率为94．7％,显著高于病毒分离培养36．8％的检出率;并能与羊痘病毒,口蹄疫病毒鉴别;此方法用于检测羊传染性脓疱病毒是特异的、敏感的、可行的。 相似文献
17.
18.
19.
20.
经生物学软件DNAStar分析,参照已发表的禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)(H5N1)基因组序列,设计合成1对特异性引物,RT-PCR扩增了长约750 bp的M1基因片段,将目的片段定向克隆至pET30a表达载体,经酶切及测序鉴定正确后转化BL21表达菌,经IPTG诱导获得以包涵体形式表达的重组蛋白。将重组蛋白变性、纯化和复性后,BCA法测定纯化蛋白的浓度为0.656 mg/mL,免疫印迹检测结果表明,纯化的重组蛋白具有良好的反应活性。将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,间接ELISA检测结果表明,重组蛋白可产生抗M1蛋白特异性抗体,具有良好的免疫原性。本研究成功表达了流感病毒H5N1的基质蛋白M1,且重组蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研制H5N1亚型流感病毒诊断试剂及基因工程疫苗奠定基础。 相似文献