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相似文献
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1.
sIgA in bovine colostrum was purified by ultrafiltration and enzymolysis methods in this experiment, and the prepared substance was detected by Western Blot. The purity and yield were up to 73.6% and 65.2%, respectively. This convenient technique offers helpful exploration for production of bovine colostrum sIgA.  相似文献   

2.
Mucosal immunity plays an important role in protecting pigs against transmissible gastroenteritis virus (TGEV) infection. To elicit mucosal immune response against TGEV, we developed a surface antigen display system using the poly-γ- glutamate synthetase A (pgsA) protein of Bacillus subtilis as an anchoring matrix to express recombinant fusion proteins of pgsA and nucleocapsid protein of TGEV in Lactobacillus casei. Surface location of fusion protein was verified by ELISA and indirect immunofluorescence test. Oral and intranasal inoculations of pregnant sow and mice with recombinant L. casei resulted in high levels of serum immunoglobulin G (IgG) and secretory immunoglobulin A (slgA) against recombinant N protein as demonstrated by ELISA. More importantly, the level of specific slgA in colostrum significantly increased compared with that of IgG. The serum IgG levels of the piglets increased after suckling colostrum produced by sows was previously inoculated with recombinant L. casei. These results indicate that immunization with recombinant L. casei expressing TGEV N protein on its surface elicited high levels of specific slgA and circulating IgG against TGEV N protein.  相似文献   

3.
牛初乳sIgA分离纯化及其检测方法的研究进展   总被引:2,自引:0,他引:2  
利用牛初乳开发新的功能性食品和类母乳化食品是当前研究热点,而在牛初乳中,sIgA是一种重要的免疫球蛋白,因此分离及检测牛初乳中sIgA具有重大现实意义。目前分离纯化方法主要有亲和色谱法、嗜硫色谱法、离子交换法、超滤法、酶解法等,检测方法有高效液相色谱法、酶联免疫吸附测定法、辣根过氧化物酶标记凝集素法、免疫胶体金检测法等。文章对sIgA分离纯化及检测方法进行了简要介绍。  相似文献   

4.
To further utilize bioactive substance such as bovine colostrum sIgA and IgG, sIgA and IgG were isolated and purified simultaneously by salting out, ultrafiltration and gel chromatography, etc. The analysis of results were showed quantitatively by nonhydrogenized SDS-PAGE, and quanlities of sIgA and IgG were respectively detected by Western Blot. The results showed that the purity and yield of bovine colostrum sIgA were 85.3% and 42.8%, respectively, while the purity and yield of bovine colostrum IgG were respectively 97.2% and 64.4%. This preparative method provides theoretical and experimental foundation for sIgA industrial production.  相似文献   

5.
sIgA in bovine colostrum was purified by ultrafiltration and enzymolysis methods in this experiment, and the prepared substance was detected by Western Blot. The purity and yield were up to 73.6% and 65.2%, respectively. This convenient technique offers helpful exploration for production of bovine colostrum sIgA  相似文献   

6.
用增殖与浓缩后的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)分别免疫健康牛犊和家兔,制备牛抗BVDV和兔抗BVDV超免疫血清,并用层析法纯化牛抗BVDV IgG和兔抗BVDV IgG,建立了检测BVDV的双抗体夹心ELISA快速检测方法.结果表明:该检测方法的最佳反应条件为:牛抗BVDV IgG包被浓度为100μg/mL,兔抗BVDV IgG最佳工作浓度为50μg/mL,样品反应时间为90min,酶标抗体工作浓度为1∶8 000,以D490nm≥0.177作为阳性判定标准.该ELISA检测方法的重复性CV小于10%,最低检测限为1.87μg/mL,与牛轮状病毒、牛冠状病毒、猪瘟病毒、犊牛大肠杆菌和沙门菌等病原无交叉反应,该ELISA试剂在室温下至少可保存6个月.用该ELISA方法和IDEXX公司抗原检测试剂盒对甘肃省不同地区牛场156份临床粪便样品进行了检测,阳性检出率分别为17.3%和16.7%.表明本试验建立的ELISA方法特异性强、敏感性高且重复性好,可用于BVDV的快速检测.  相似文献   

7.
将微生态制剂产品倍利素添加到断奶仔猪的日粮中,通过测定断奶仔猪的生长性能、健康状况、粪便菌群数、消化酶的活性及分泌型免疫球蛋白A(sIgA)等指标,探讨倍利素对断奶仔猪生长性能和免疫功能的影响。结果显示,试验组与对照组相比饲料增重比降低了6.60%,发病率降低了19.4%,腹泻率降低了12.3%;54日龄时,试验组的大肠杆菌数比对照组低7.10%(P<0.05),差异显著;61日龄时,试验组的拟杆菌、乳杆菌数分别高出对照组14.5%(P<0.05)、4.80%(P<0.05),试验组的大肠杆菌数比对照组低7.80%(P<0.05),均差异显著;在54、61日龄时,试验组粪便中中性蛋白酶的含量分别比对照组提高了101.6%(P<0.01)、56.9%(P<0.05),淀粉酶的含量与对照组相比分别提高了10.8%、16.9%;在47、54、61日龄,试验组仔猪粪便中sIgA含量高出对照组44.1%(P<0.05)1、6.2%2、7.7%(P<0.05);结果表明,该微生态制剂产品有促进断奶仔猪生长、增强机体免疫力的作用。  相似文献   

8.
Porcine colostrum and milk were separated into the acid-soluble fraction (SF) and casein frac-tion (CF) by centrifuge. Trypsin and chymotrypsin inhibitory capacity in porcine colostrum, milk and theircomponents were determined by incubating bovine trypsin or chymotrypsin in a medium. The inhibition of in-sulin-like growth factor Ⅰ (IGF-Ⅰ) and epidermal growth factor (EGF) degradation in pig small intestinal con-tents by porcine colostrum was measured by incubating iodinated IGF-Ⅰ or EGF. Degradation of labeled IGF-Ⅰor EGF was determined by monitoring the generation of radioactivity soluble in 30% trichloroacetic acid(TCA). The results showed that porcine colostrum had high levels of trypsin and chymotrypsin inhibitory ac-tivity and increased the stability of IGF-Ⅰ and EGF in pig intestinal contents. The SF was higher in inhibitorypotency than CF. The present study revealed that the protease inhibitors in porcine colostrum, milk-derivedand colostrum-specific, existed mainly in SF.  相似文献   

9.
通过对野葛根中葛根素的分离提纯研究,发现溶剂的浓度对葛根素的收率及酸解过程中盐酸浓度对葛根素晶体纯度的影响均非常明显。为此,对这两个因素做进一步研究,结果表明:45%乙醇抽提时收率达2%;5%盐酸酸解时纯度达95.8%。并对提取物结构进行了1H NMR1、3C NMR、MS、IR表征。为进一步研究葛根素的应用奠定了基础。  相似文献   

10.
比较3种提取猪血清中免疫球蛋白IgG方法的提取效果。分别用辛酸沉淀法,硫酸铵分步沉淀法,辛酸-硫酸铵沉淀法粗提猪血清免疫球蛋白IgG,并通过SDS-PAGE凝胶电泳、AlphaEaseFC凝胶成像分析软件、Bradford蛋白浓度测定法等比较3种方法的提取纯度和得率,同时比较3种方法的时效性和经济性。辛酸沉淀法提取IgG所用时间最短,只需1h,得率较高但纯度不高;硫酸铵盐析法提取的IgG纯度较高、得率也高,但时间较长;辛酸-硫酸铵分步沉淀法所得IgG纯度很高,但所用时间较长,得率也较低。3种提取方法各有特点,可根据不同的实验条件和目的选择不同的提取方法。  相似文献   

11.
研究霍乱毒素重组B亚单位(recombinant cholera toxin Bsubunit,rCTB)为佐剂的流感抗原滴鼻免疫小鼠后,小鼠的体液免疫和局部黏膜免疫反应。三价流感病毒灭活抗原及裂解抗原按比例与rCTB配伍,滴鼻免疫小鼠,分析血清中IgG和IgM的动态变化,二免三周后,分析血清中HAI的变化,收集鼻、肺冲洗液,分析kG和slgA的变化。结果表明:全病毒组及rCTB+裂解抗原组各项指标变化较明显,小鼠血清kG和IgM在二免三周后仍维持在较高的水平,而其他两组均呈下降趋势;全病毒组鼻、肺冲洗液IgG和sIgA抗体滴度以及血清HAI抗体滴度均高于rCTB+全病毒组(P〈o.01),而rCTB+裂解抗原组鼻、肺冲洗液kG和sIgA抗体滴度以及血清HAI抗体滴度明显高于裂解抗原组(P〈0.01)。研究表明:以全病毒抗原及rCTB+裂解抗原滴鼻免疫小鼠,均可诱导小鼠产生较强的系统免疫反应和局部黏膜免疫反应。rCTB与流感裂解抗原配伍滴鼻,可提高抗原的免疫原性,增强机体的黏膜免疫应答反应。  相似文献   

12.
非致病性大肠杆菌鞭毛蛋白对O型口蹄疫病毒的佐剂效果   总被引:2,自引:0,他引:2  
【目的】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)的传染性强,传播广,给世界经济和社会发展带来巨大危害,目前疫苗接种仍是主要而有效的防控手段。以增强口蹄疫疫苗免疫效力为目的,基于国内外对鞭毛蛋白佐剂的深入了解与研究,对非致病性大肠杆菌鞭毛进行修饰,研究鞭毛蛋白(flagellin,F)以及有无LTMT佐剂不同重组鞭毛蛋白对口蹄疫病毒(foot and mouth disease virse,FMDV)的佐剂作用。【方法】通过体外表达获得pCold-F0、pCold-F0-LTMT、pCold-F0NC、pCold-F0NC-LTMT 4种不同重组鞭毛蛋白,用间接ELISA方法检测pCold-F0-LTMT和pCold-F0NC-LTMT蛋白的生物学活性,按照5μg/只小鼠蛋白量与FMDV灭活抗原混合制备疫苗,同时设置添加或者不添加ISA 206佐剂组,皮下接种Balb/c小鼠,共免疫2次,每次间隔2周。分别于免疫前和免疫后14、21、28、35和45 d采血并采集小鼠粪便,45 d后取小肠后段,采用阻断ELISA方法检测血清IgG抗体滴度,用间接ELISA方法检测小鼠粪便和肠洗液中特异的分泌性IgA(secretory IgA,SIgA)抗体滴度,以评估免疫效力。【结果】SDS-PAGE和Western blot分析表明,4种不同重组鞭毛蛋白成功表达。并用GM l-ELISA方法验证了pCold-F0-LTMT和pCold-F0NC-LTMT的生物学活性,融合蛋白F0-LTMT和F0NC-LTMT保留了与GM l结合能力。动物试验结果表明,疫苗经皮下注射接种后,单独口蹄疫抗原组没有产生明显的抗体水平,而鞭毛蛋白佐剂组比单独的口蹄疫抗原组,IgG滴度高,并且产生sIgA抗体滴度更早、更高。此外,LTMT与鞭毛蛋白协同作用能刺激小鼠机体产生更高的IgG和sIgA。在试验中,当鞭毛蛋白与ISA 206佐剂联合使用时,血清中IgG滴度大幅增高,且抗体持续期延长。口蹄疫抗原与ISA 206佐剂和F0NC-LTMT混合使用效果最佳,显示对FMDV的最好保护。【结论】数据表明,黏膜佐剂F0-LTMT发挥双重佐剂活性,皮下注射可显著提高FMDV全身特异性IgG和局部sIgA水平,显示其具有良好的应用前景。  相似文献   

13.
以热研5号柱花草为材料,研究了不同的底肥、种植密度、追肥、灌水次数和采收方式对柱花草种子产量和质量的影响。结果表明,3个底肥(磷肥)水平种子产量和质量均高于未施磷水平,0.07 kg/m2处理磷肥水平产量最高,为358.50 kg/hm2,且3个处理相差不大。净度和千粒重最低的处理是0.13 kg/m2磷肥水平,分别为8.87%和2.42 g。种植密度为0.5 m×1.0 m产量最高,为448.63 kg/hm2,种植密度行距为1 m的种子净度、千粒重和出苗率均高于株行距为0.5 m的,净度为9.12%,千粒重为2.63 g,出苗率为74.33%。未追肥条件种子产量最低,为339.96 kg/hm2,种子净度、千粒重和出苗率变化较小。3个灌溉处理种子产量差异较小,未灌溉处理种子千粒重和出苗率最低,分别为2.48 g和42.44%。铺膜采收种子处理种子产量最高,为370.79 kg/hm2,成熟后刈割收种处理种子产量和千粒重最低,分别为197.42 kg/hm2和2.47 g。试验为云南柱花草生产及草业的发展提供理论依据。  相似文献   

14.
牛初乳粉对调节免疫低下大鼠免疫功能的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
研究牛初乳粉对免疫低下大鼠免疫功能调节作用,初步探讨其机制.将SD大鼠随机分为3组,空白对照组、模型组、牛初乳粉组,每组大鼠10只,其中模型组、牛初乳粉组肌注免疫抑制剂氢化可的松建立SD大鼠免疫低下模型,牛初乳粉组用牛初乳粉干预14 d后,测定几项免疫指标.实验表明,牛初乳粉可以明显提高免疫低下大鼠血中白细胞数;牛初乳粉对免疫低下大鼠脾脏具有保护作用;牛初乳粉可以明显提高淋巴细胞增殖能力,增强免疫低下大鼠抗体分泌细胞分泌功能,提高血清溶血红素的含量;牛初乳粉可以明显提高免疫低下大鼠血清白介素-1的含量,有增加血清白介素-2、肿瘤坏死因子含量的趋势.实验还表明,牛初乳粉具有免疫调节作用,其机制与牛初乳粉明显提高大鼠血清白介素-1、血清白介素-2、肿瘤坏死因子含量有关.  相似文献   

15.
牛初乳热稳定性影响因素的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
以不同泌乳期的牛初乳为原料,测定不同泌乳期,不同pH值以及添加磷酸盐、柠檬酸盐、蔗糖、钙离子、EDTA、卡拉胶等食品中允许添加物质的热凝固时间(HCT)对初乳热稳定性的影响。结果表明:初乳的热稳定性随泌乳期和pH值的增大而增大;磷酸盐、柠檬酸盐、蔗糖均对初乳的热稳定性有改善作用;而钙离子、卡拉胶、高浓度的EDTA则使初乳的热稳定性下降。  相似文献   

16.
NS复合乳酸菌制剂对母猪生产性能和免疫水平的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
[目的],探讨微生态制剂NS复合乳酸菌对母猪的生产性能和部分免疫指标的影响。[方法]通过在母猪日粮中添加NS复合乳酸菌制剂,研究其对母猪生产性能、血清和初乳中的免疫球蛋白IgG、IgA、IgM含量以及T淋巴细胞亚群的影响。[结果]在母猪各阶段日粮中添加0.2%NS复合乳酸菌制剂后,哺乳仔猪平均21日龄断奶窝重和平均断奶窝重均显著提高,分娩时和分娩后30 d母猪血清与初乳中免疫球蛋白IgG、IgA和IgM含量均显著提高,并且在初乳中的抗体滴度能维持在较高的水平。另外,在母猪日粮中添加0.2%NS复合乳酸菌制剂能显著提高CD3+和CD4+细胞亚群的百分比。[结论]NS复合乳酸菌制剂对提高母猪生产性能、加强机体体液免疫和促进细胞免疫具有良好的效果。  相似文献   

17.
研究了仔牛哺乳期血清IgG水平的变化及血清IgG含量与牛龄、性别的关系。结果表明:仔牛吃完母乳24h后血清中的IgG达到峰值(65.58±9.87)mg.mL-1,提取免疫球蛋白的原料血液应选择的牛龄在8年以下为宜;当以6 ̄8年的牛血液作为原料时,母牛血液IgG含量比公牛血液IgG含量高1%。  相似文献   

18.
评价乳铁蛋白牛初乳颗粒增强免疫力作用,为该产品提供功能学资料。采用SPF级雌性小鼠,设0.200,0.04,1.200 g/kg(分别相当于人体推荐量的5,10,30倍)3个剂量组,每日1次经口给予小鼠相应浓度的受试样品,连续给样1个月。检测对小鼠体重、胸腺、脾脏器官、ConA诱导的脾淋巴细胞转化、DNFB诱导的DTH、溶血空斑数、血清半数溶血值(HC50)、碳廓清能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞、NK细胞活性的影响。结果表明:细胞免疫功能、体液免疫功能、NK细胞活性均与对照组有显著差异,认为该乳铁蛋白牛初乳颗粒具有增强免疫力功能效果(P<0.05)。  相似文献   

19.
本文研究黑白花奶牛初乳中葡萄糖-β-磷酸脱氢酶(G6PDH),谷草转氨酶(GOT)、三氮醋酸沉淀蛋白(TCA-P)的动态变化,以及G6PDH,GOT与乳腺分泌机能的关系。结果表明:G6PDH,GOT,TCA-P在初乳7天的分泌模式为y=Ax~(-b)。初乳中每次挤奶乳样的G6PDH总量的7天平均值与日产乳量(3个月平均)存在显著正相关(r=0.7163,n=14,P<0.01);G6PDH与TCA-P的相关系数为r=0.7183(n=35).GOT与TCA-P的相关系数为r=0.8642(n=35)。本研究认为,黑白花奶牛初乳中的G6PDH、GOT活性可反映乳腺在初乳阶段的分泌机能,并可作为预测乳产量的指标。  相似文献   

20.
兔抗猪瘟高免血清的制备及纯度鉴定   总被引:1,自引:1,他引:0  
利用猪瘟弱毒疫苗(C株)免疫新西兰大白兔,制备抗猪瘟高免血清IgG。运用间接ELISA方法测血清效价,再经饱和硫酸铵盐析沉淀法提纯血清IgG,SDS-PAGE电泳法鉴定提纯IgG的纯度,结合无菌检查试验和仔猪接种试验,检测血清IgG的安全性。结果表明,获得了蛋白含量为6 mg/mL,效价为1∶6400的高效价、安全性高、成本低的抗猪瘟高免血清IgG。为猪瘟病毒的检测和猪瘟的防制提供了理想的生物制剂。  相似文献   

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