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相似文献
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1.
嗜水气单胞菌检验程序的研究   总被引:13,自引:0,他引:13  
本试验系统研究了嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila,Ah)的细菌学及毒力因子检测。对不同来源菌株的细菌作分离及生化鉴定,确定了Ah的六项生化鉴定指标,同时比较确定了AHM和RS作为Ah的选择培养基。检验中氧化酶阳性反应是Ah重要的鉴别指标。比较Ah毒素、蛋白酶及S蛋白三种毒力因子的常规检测及免疫学检测,根据检测结果选出毒力因子分布各异的Ah菌株作动物致死性试验,最终在Ah三项毒力因子指标中选择蛋白酶一项作为检测指标,具有代表性,同时简化了检验程序,使Ah的检测实际可行。  相似文献   

2.
用取自 3~5 m m 卵泡的处于减数分裂阻抑状态的猪卵丘卵母细胞复合体(p C E O),培养 48 h,用 F S H(100 I U/ L)或 h C G(0、50、100、200、500 I U/ L)刺激 p C E O 分泌甾体激素;用放射受体测定法( R R A)比较 p C E O 的卵丘细胞及壁层颗粒细胞( M G C)上促黄体激素受体/人绒毛膜促性腺激素受体( L H R/h C G R)的数量; A M e X 石蜡切片、免疫组织化学染色,检测 L H R/h C G R 在 p C E O 以及 M G C 的分布情况。在 F S H 作用下,p C E O 分泌的孕酮明显高于 h C G 作用组和对照组 ( P < 005); 平均每个壁层颗粒细胞上的 L H R/h C G R是每个卵丘细胞的 105 倍; L H R/h C G R 在基膜两侧分布较多,且卵母细胞上没有 L H R/h C G R,临近卵母细胞的卵丘细胞膜上较少被染色。以上结果表明,在体外试验中,可能由于 C E O 上 L H R/h C G R 的数量不足或生理活性降低, L H/h C G 不能促进卵母细胞恢复减数分裂。  相似文献   

3.
应用HI、AGP、PAT等方法,对毕节地区9种鸡疫病感染情况进行调查,结果阳性率ND52.54%,CRD45.95%,SP43.52%,FC31.05%,MD23.12%,ILT0.47%,AL、AI、IB均为0。CRD、MD、ILT在我区历史上从未记载,属首次发现。  相似文献   

4.
顿河红豆草下胚轴培养及其植株再生   总被引:2,自引:1,他引:1  
对顿河豆草5d龄无菌苗下胚轴愈伤组织诱导及其植株再生条件的研究结果表明,愈伤组织培养基为MS基础培养基,附加0.2mg/l2,4-D、1mg/lBAP和2mg/lNAA,pH5.8;分化培养我激素MS培养基;生根培养基为1/2MS或1/2LS+0.05mg/lNAA+0.8%琼脂培养基。其愈伤组织绝大多数生长良好,出愈率达96.8%。体细胞胚化率为25.3%,具有体细胞胚分化力的基因型占35%,生  相似文献   

5.
一株鸡大肠杆菌1型及P型菌毛蛋白结构基因的克隆   总被引:2,自引:0,他引:2  
据国外发表的人病性大肠杆菌1型及P型菌毛蛋白结构基因(pilA、pa;pA)_序列,设计并合成 于PioA及papA保守区的2对引物。经PCR从1株带有甘露糖敏感血凝特性(MSHA)及甘露9糖抵抗血凝特性(MRHA)的鸡致病性大肠杆菌(HJ20e)染色体中扩增到大小分别在657bp、54lbp的2种阳性产物。通过核酸序列测定分别确证所扩增的DNA片段分别为pilA、papA基因。经酶切、连接、转化  相似文献   

6.
假俭草侧芽愈伤诱导和植株再生   总被引:3,自引:3,他引:0  
以中国优良品系E 126假俭草的侧芽为外植体建立高效的再生体系。试验结果显示,1)适宜于侧芽生长的培养基为MS+BAP2.0mg/L+NAA0.8 mg/L;2)在最佳诱导培养基MS+2,4 D1.0 mg/L+BAP0.1 mg/L上,侧芽愈伤诱导率达93%。较强的光照能提高愈伤组织的诱导率;3)在最佳分化培养基MS+KT2.0mg/L 上,绿苗分化率为12.6%;4)试管苗最佳生长培养基为MS+BAP2.0mg/L+NAA0.8 mg/L;5)在最佳生根培养基MS+NAA0.6mg/L 上,试管苗的生根率达98%,植株移栽成活率为94%。本试验为假俭草体细胞筛选和遗传转化提供依据。  相似文献   

7.
国外养蜂文摘蜂蜜储存期间羟甲基糠醛形成的研究[印度]GHOSHDASTIDAR,N.等取9个蜂蜜样品,其羟甲基糠醛(HMF)的原始含量为0~12.0ppm,在21~30℃和37℃条件下储存,于0、3、6、9和12个月进行分析。结果表明HMF含量随时间...  相似文献   

8.
荒漠猫血液蛋白质和酶多态性的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对5只荒漠猫(Felisbieti)血液中的血红蛋白(HB),运铁蛋白(TF),亲血色蛋白(Hp)以及乳酸脱氢酶(LDH),淀粉酶(AMY),酯酶(ES)和碱性磷酸酶(ALP)的多态性进行了研究。结果发现,被检荒漠猫的TF,Hp,RBC-LDH,S-ES和S-ALP共5个基因座存在多态性,HB,RBC-AMY,S-AMY,S-LDH,RBC-ES和RBC-ALP共6个基因座为单态,表明荒漠猫的血液蛋白质和酶具有颇大的遗传变异性  相似文献   

9.
试验用主要由小肽组成的酶解酪蛋白(CSP)和相应氨基酸组成的混合物(FAA),进行了灌注和^3H-Tyr同位素标记试验,由十二指肠同时灌注^3H-Tyr和CSP或相应FAA混合物后20min,CSP组雏鸡肠道、肝脏和胸肌组织蛋白质合成率分别显著或极显著高于FAA组。CSP和FAA组胸肌、肝脏和肠道组织蛋白质部分合成率分别为46.43%/日和34.20%/日;98.54%日和69.39%日;86.7  相似文献   

10.
青海细毛羊生化遗传多态性的研究   总被引:7,自引:0,他引:7  
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和火焰光度法对509只青海细毛羊细血液和乳汁中HB,EP-1,EP-2,KE,TF,AMY1,AMY2,ES,ALP,RBC-LDH,Hpα-LA和β-LG总共13个位点的多态性进行了研究。结果为:(1)在青海细毛羊的HB,KE,TF,AMY2,ES,ALP,RBC-LDH1,Hp,β-LG总共9个位点上发现多态性,多态性位点的比例为69.23%;(2)每个位点实有的平均等位  相似文献   

11.
企鹅源嗜水气单胞菌的分离鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
从上海某水族馆因血痢、厌食、消瘦而死亡的秘鲁帝企鹅的心脏、肝脏中分离到2株细菌SH051237和SH060104,其培养性状及生化特性基本一致,经生化试验、VITEK试验等鉴定为嗜水气单胞菌.动物试验表明,分离株对小鼠均具有较强的致病性,且从死亡鼠回收到相应细菌.结果表明,分离到的菌株为致病性嗜水气单胞菌.  相似文献   

12.
根据GenBank上登陆的嗜水气单胞菌AH-1株Ⅲ型分泌系统aopN基因序列,设计1对特异性引物,以J-1株的基因组为模板,PCR扩增得到aopN基因,连入pET-32a(+),转化至大肠杆菌表达,同时PCR检测aopN基因在66株嗜水气单胞菌中的分布情况。aopN基因测序分析发现,片段长度为874 bp,与嗜水气单胞菌AH-1、SSU、AH-3的同源性分别为97%、81%、82%,与杀鲑气单胞菌杀鲑亚种A449的同源性为81%,与温和气单胞菌的同源性为82%。PCR检测结果表明,57株能检测到aopN基因的目的片段。SDS-PAGE分析表明重组蛋白分子量为54.5ku,用兔抗J-1株的全菌抗血清进行Western blot分析表明,该蛋白具有较好的免疫反应性。由于多数菌株都含有aopN基因,提示AopN可能是嗜水气单胞菌的共同保护性抗原。  相似文献   

13.
Dot-ELISA法检测致病性嗜水气单胞菌   总被引:3,自引:0,他引:3  
在鱼类致病性气单胞菌诊断试剂盒的基础上,用斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)胞外蛋白酶ECPase54,同时用脱脂奶平板、PCR特异性扩增气溶素基因aer和16S rRNA基因检测72株气单胞菌分离株.结果显示致病性嗜水气单胞菌检测阳性率分别如下:Dot-ELISA法90.3%(65/72)、脱脂奶平板法75%(54/72)、aer基因PCR法94.4%(68/72)、16S rRNA PCR法81.9%(59/72),Dot-ELISA与其他3种方法的符合率分别为79.2%(57/72)、91.6%(66/72)、81.9%(59/72).在ECPase54兔抗血清制备后的2、4、6、12、18个月,用Dot-ELISA检测72株分离株,检测结果重复性好.结果表明Dot-ELISA法敏感、特异、实用,可用于鱼类致病性Ah的临床诊断.  相似文献   

14.
嗜水气单胞菌疫苗的检验及免疫效力试验   总被引:4,自引:1,他引:3  
选用嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophilic,Ah)疫苗生产用菌J-1株,以气升式发酵罐28℃通气培养28h,制备嗜水气单胞菌疫苗用菌液。半成品检验表明,该疫苗用菌液内无杂菌生长,细菌数量达2.7×1010cfu/ml。以0.4%福尔马林溶液37℃灭活24h,制成灭活疫苗。经成品检验,该疫苗为棕黄色液体,涂布平板无活菌生长,以1×107cfu攻击6尾健康鲫鱼,1周内鲫鱼无异常反应。取该疫苗分别以腹腔注射和浸泡两种方式各免疫12尾鲫鱼,1月后以同源强毒菌株攻击,疫苗的相对存活率分别为83.3%和58.3%。  相似文献   

15.
6株嗜水气单胞菌的毒力因子及其对小鼠的致死性   总被引:18,自引:0,他引:18  
根据嗜水气单胞菌毒素、蛋白酶及S蛋白3种毒力因子的检测结果,从66株嗜水气单胞菌中选出3种毒力因子分布情况各异的有代表性的6个菌株。分别用含菌量均为108CFU/mL的6株嗜水气单胞菌肉汤培养物注射小鼠,结果,毒素、蛋白酶及S蛋白均有的菌株以及具有前两者而无S蛋白的菌株对小鼠的致死率均达100%;仅有蛋白酶的菌株对小鼠致死率达60%;而只有S蛋白的,或既有毒素又有S蛋白的,或3种毒力因子均无的菌株对小鼠无致死性。  相似文献   

16.
本试验根据GenBank已登录的致病性嗜水气单胞菌保守序列16S rDNA和Aero,设计2对引物,以嗜水气单胞菌纯培养物为起始材料,建立PCR检测方法。从12株分离物中均扩增到16S rDNA片段,从3株分离物中均扩增到Aero片段,经序列测定和分析,所扩增的片段均为嗜水气单胞菌的核苷酸序列。结果表明,建立的PCR方法可用于检测致病性嗜水气单胞菌。  相似文献   

17.
为阐明淡水鱼的主要致病菌嗜水气单胞菌对氟苯尼考的耐药现状,本试验采用纸片扩散法和浓度稀释法分别定性、定量检测了2010年9月至2013年5月期间收集的26株鱼源嗜水气单胞菌对氟苯尼考的耐药性,利用PCR法检测菌株携带氟苯尼考耐药基因的情况。结果显示,北京地区的鱼源嗜水气单胞菌对氟苯尼考的耐药率为15.38%,氟苯尼考对其最小抑菌浓度(MIC)主要集中在2~4 μg/mL,5株菌对氟苯尼考的MIC超过8 μg/mL,1株分离菌具有氟苯尼考耐药基因floR。结合以往数据及其他省市的相关数据,结果表明鱼源嗜水气单胞菌对氟苯尼考已呈较高的耐药率和耐药浓度,且位于质粒上的floR基因阳性菌株有传递该基因给其他种属鱼类致病菌的风险。因此,有必要科学规范氟苯尼考在水产养殖中的应用。  相似文献   

18.
The presence of potentially human pathogenic strains of Aeromonas was investigated in 84 samples of seafood which were purchased from retail traders in Berlin, Germany in spring 2000. A total of 134 Aeromonas strains were isolated on selective [GSP agar and Aeromonas (Ryan) agar] and unselective (standard count agar and enterohaemolysin agar) media from 27 (32.1%) of the samples and were classified as Aeromonas hydrophila (67.9%), A. caviae (26.1%) and A. sobria (6.0%) by biotyping. Thirteen (48.1%) of the 27 positive samples contained more than one species of Aeromonas. Production of haemolysins on enterohaemolysin agar was found with 132 (98.5%) of the strains at 28 degrees C and with 130 strains (97.0%) at 37 degrees C growth temperature. Vero cytotoxins were produced by 99 (73.9%) of the strains when grown at 28 degrees C but only by 24 of the strains (17.9%) at 37 degrees C. The latter strains were identified as A. hydrophila (n = 22) and A. sobria (n = 2) which came from 17 (20.2%) samples of raw seafood and from ready-to-eat salted herring 'Matjes' products. Cytotoxin-encoding genes for aerolysin (aer) and haemolysin A (hlyA) were investigated by PCR. Aer and hlyA genes were detected in both, strains which produced toxins only at 28 degrees C and strains which produced toxins at 37 degrees C. Our data indicate that raw seafood and ready-to-eat fish products can harbour potential human pathogenic, cytotoxin producing Aeromonas strains.  相似文献   

19.
Aeromonas hydrophila and Ichthyophthirius multifiliis are important fish pathogens. To clarify their relationship, two host models, goldfish with trauma and those infected with I. multifiliis, were used to study infection kinetics of A. hydrophila 4332 tagged with plasmid pGFPuv (Ah4332(GFP)). The results showed that in fish suffering from ichthyophthiriosis, the bacterial infection process was accelerated and more persistent than in the other groups. It is suggested that I. multifiliis plays an important role in the infection of A. hydrophila. Mechanical trauma caused by I. multifiliis might act as a portal of entry for A. hydrophila present in the water, thereby facilitating the invasion of bacteria. The ectoparasite might also serve as a vector and reservoir of pathogenic bacteria.  相似文献   

20.
嗜温气单胞菌的鉴定及其外膜蛋白型研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
从病鳖、鳗鱼体内分离到2株嗜温气单胞菌(TAh-3、EAs-1),经形态学观察、生理生化特性等鉴定,确定TAh-3为嗜水气单胞菌,EAs-1为温和气单胞菌。动物感染试验结果表明,TAh-3株为致病性嗜水气单胞菌,对鲫鱼的致死率100%,EAs-1株为非致病性温和气单胞菌。SDS-PAGE电泳结果显示,TAh-3株外膜蛋白(OMPs)型由7条蛋白带组成,其中1条主带大小为40.0kDa;EAs-1株OMPs型由8条蛋白带组成,其中2条主带大小为38.0kDa、45.0kDa。  相似文献   

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